ING4 Geninin aktarılması amacıyla Gen taşıyıcı Sistemler hazırlanması Ve farklı Kanser hücre kültürlerinde etkinliğinin gösterilmesi
General Material Designation
[Thesis]
First Statement of Responsibility
Karagöz, Uğur
Subsequent Statement of Responsibility
Kantarcı, Ayşe Gülten
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
Marmara Universitesi (Turkey)
Date of Publication, Distribution, etc.
2019
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
126
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
Ph.D.
Body granting the degree
Marmara Universitesi (Turkey)
Text preceding or following the note
2019
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
Amaç: Tez kapsamında; ING4 genini taşıyan plazmid kullanılarak kanser hücrelerine yönelik tedavi amaçlı non-viral gen taşıyıcı sistemler geliştirilmesi ve çeşitli kanser hücrelerinde etkinliğinin gösterilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: pcDNA3.ING4 plazmid DNA'sı çoğaltılıp saflaştırıldıktan sonra, bu DNA'yı taşımak için üç farklı taşıyıcı sistem geliştirilmiştir: KLN, Niozom ve PEI-türevi polimerik nanopartiküller. KLN'lerin hazırlanması için sıcak mikroemülsiyon yöntemi kullanılmıştır. Niozom formülasyonu, ince film hidrasyon metodu modifiye edilerek hazırlanmıştır. Hidrofobik olarak modifiye PEI'ler, alifatik lipidler kullanılarak N-açilasyon yöntemi ile sentezlenmiştir. Bulgular ve Sonuçlar: Hazırlanan non-viral taşıyıcı sistemler ING4 gen bölgesini taşıyan plazmid DNA ile kompleksleştirildikten sonra belirtilen hücre kültürlerinde test edilmiş, bu hücrelerde proliferasyona etkisi gözlenmiştir: L929, MCF-10-A, MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-436, PC-3, Calu-1. ING-4 için hazırlanan taşıyıcı sistemlerin kanser hücrelerinde proliferasyonu baskıladığı gösterilmiştir. Taşıyıcı sistemlerin kanserli hücreler üzerindeki etkileri karşılaştırılmış, hangisinin daha etkili olduğu belirlenmiştir. Hazırlanan taşıyıcı sistemlerin sağlıklı hücreler üzerine etkisini gözlemlemek amacıyla L929 fare fibroblast hücreleri kullanılmıştır. Transfeksiyonun gözlenebilmesi için, ING-4 ile optimize edilen sistem yeşil floresans protein içeren plazmid ile kompleksleştirilmiştir. Transfeksiyon sonrası floresans görüntüleme yapan mikroskopta temsili fotoğraflar çekilmiş ve flow sitometride yapılan kantitatif analiz ile transfeksiyon etkinliği gösterilmiştir.