بررسی تاثیر محیط انجمادی حاوی ملاتونین بر مارکرهای پیش میوزی و پس میوزی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی(SSCs) پس از پیوند به مدل موش آزواسپرمی ناشی از تورشن بیضه
General Material Designation
[پایان نامه]
First Statement of Responsibility
شکوفه کاظم زاده
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
Date of Publication, Distribution, etc.
۱۳۹۹
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
دکتری تخصصی(PHD)
Discipline of degree
علوم تشریح
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی برای آغاز اسپرماتوژنز ضروری هستند. انجماد، نگهداری طولانی مدت و پیوند می تواند یک روش درمانی جدید برای ناباروری باشد. افزودن عوامل کرایوپروتکتانت به مدیوم انجمادی برای به حداقل رساندن آسیب های ناشی از انجماد ضروری است. مطالعات زیادی بر روی آنتی اکسیدان ها به عنوان عوامل محافظت کننده در برابر انجماد برای کاهش آسیب های ناشی از انجماد انجام شده است. بنابراین، تحقیقات در این زمینه ضروری به نظر می رسد. هدف از این مطالعه افزودن ملاتونین به محیط پایه فریز و ارزیابی تأثیر آن بر کارایی SSCs ذوب شده پس از پیوند به بیضه موش های آزواسپرمی بود.روش کار: سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی از موشهای نوزاد (6-3 روزه) بعد از دو مرحله هضم آنزیمی جداسازی شدند و سلول ها به منظور بررسی خصوصیات مورفولوژیکی خالص سازی شدند. زنده مانی، آپوپتوز و سطح ROS قبل پیوند در SSCs ذوب شده بررسی شد و مارکر های تکثیری (MVH and ID4) و تمایزی (c‐Kit, SCP3, TP1, TP2, and Prm1) SSCs پس از پیوند با استفاده از ایمنوفلورسنت، وسترن بلات و Real-Time PCR مورد ارزیابی قرار گرفت.یافتهها: نتایج نشان داد که میزان بقا SSCs بعد از ذوب شدن در گروه ملاتونین به طور معنی داری بالاتر از گروه انجماد محتوای محیط پایه فریز بود و میزان آپوپتوز و سطح تولید ROS در گروه انجماد با ملاتونین کاهش معنی داری داشت (p < 0.05). بیان مارکرهای تکثیری و تمایزی بعد از پیوند در گروه انجماد با ملاتونین در مقابسه با گروه انجماد افزایش معنی داری داشت (p < 0.05).نتیجهگیری: بر اساس نتایج به دست می توان گفت که افزودن ملاتونین به محیط پایه فریز از طریق افزایش زنده مانی، کاهش تولید ROS و آپوپتوز به طور موثری از SSCs حفاظت می کند و کارایی پیوند SSCs را پس از انجماد بهبود می بخشد که پیشنهاد قابل توجهی را برای حفاظت از باروری در کلینک ارائه می دهد.