عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
NATIONAL BIBLIOGRAPHY NUMBER
Number
۹۶۷۱۵پ
LANGUAGE OF THE ITEM
.Language of Text, Soundtrack etc
فارسی
Language of Original Work
فارسی
TITLE AND STATEMENT OF RESPONSIBILITY
Title Proper
بهینه سازی و رسانش نانو ذرات کیتوزان_ pDNA به سلول های یوکاریوت HEK۲۹۳T با استفاده از روش الکترواسپری و بررسی کارایی انتقال آن
General Material Designation
[پایان نامه]
First Statement of Responsibility
فرزانه سعیدی لندی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
دانشگاه علوم پزشكي تهران دانشكده پزشكي
Date of Publication, Distribution, etc.
۱۳۹۹
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۹۰ص.
Other Physical Details
جدول نمودار
Accompanying Material
سي دي
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
نانو فناوری پزشکی
Text preceding or following the note
۱۸/۸۵
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
ژن درمانی روش درمانی نوین و جایگزینی برای درمان¬های قدیمی برای بیماری¬های ژنتیکی و سرطان است. در روند انتقال ژن به سلول به حاملی با کمترین سمیت و ایمنی¬زایی با بیشترین کارایی انتقال ژن نیاز است. حامل¬ها به دو نوع ویروسی وغیرویرسی تقسیم می¬شوند. معایبی چون احتمال ایجاد سرطان و ایمنی¬زایی حامل¬های ویروسی استفاده از آن¬ها را محدود کرده است. امروزه تلاش برای افزایش کارایی انتقال حامل¬های غیرویروسی است. این دسته حامل¬ها طیف وسیعی از جمله لیپیدهای کاتیونی، پلیمرهای کاتیونی، دندریمرها و نانوذرات را شامل می¬شود. پلیمرهای کاتیونی مانند کیتوزان به دلیل زیست سازگاری، سمیت بسیار پایین، ظرفیت بالای بارگذاری DNA، رهایش آهسته بسیار مورد توجه هستند. برای افزایش کارایی انتقال حامل کیتوزان راهکارهایی مانند کاهش اندازه آن به اندازه نانومتری پیشنهاد می¬شود.در مطالعه انجام شده از کیتوزان با وزن مولکولی kDa 100 به عنوان حاملی برای انتقال pDNA با وزن مولکولی bp 4700 استفاده شد، همچنین از روش الکترواسپری که یک روش نوین تهیه نانوذرات است به منظور تهیه نانوحامل و انتقال همزمان آن به درون سلول¬های یوکاریوت HEK293T استفاده شد. پژوهش حاضر در سه بخش تهیه pDNA و بررسی آن، تهیه نانوذرات حامل و تعیین ویژگی¬های آن¬ها و تهیه و انتقال نانوذرات به سلول و بررسی اثر برخی پارامترها بر انتقال ژن انجام شد. مرحله اول کشت باکتری و استخراج pDNA و بررسی کیفیت پلاسمید استخراج شده با روش ژل الکتروفورز و نانودراپ بود. سپس نانوذرات کیتوزان-pDNA با روش الکترواسپری تهیه شدند، پارامترهای دستگاهی الکترواسپری مانند جریان مایع ml/h 1، ولتاژ منبع kv 5/5، فاصله نازل تا جمع کننده cm 6 و ثابت در نظر گرفته شد. نانوذرات تهیه شده در سه غلظت طبق طراحی نرم افزار Box-Behnken تهیه شدند، قطر هیدرودینامیک نانوذرات به ترتیب در غلظت¬های pDNA، μg/ml 100 ،55 ،10 حدود nm 240 ،188 ،110 تعیین شد. لازم به ذکر است که در تمام غلظت¬ها N/P ثابت و حدود 5 در نظر گرفته شد. میزان EE نانوذرات حامل با سه بار تکرار حدود 85% و پتانسیل زتای آن¬ها حدود mv 25+ بود. محلول پلیمری با غلظت¬های ذکر شده بر روی سلول¬های کاشته شده در پلیت الکترواسپری شد، در این مرحله هم نانوذرات تهیه می-شدند و هم با اثر میدان الکتریکی ایجاد شده در روند الکترواسپری نانوذرات به داخل سلول منتقل می-شدند. با استفاده از نرم افزار پارامترهای موثر مانند غلظت حامل کیتوزان-pDNA، مدت زمان الکترواسپری بر سلول و مدت زمان انکوباسیون سلول¬ها پس از انتقال ژن بر روند انتقال ژن به روش الکترواسپری بررسی شدند. نمونه بهینه¬ای که بر طبق طراحی نرم افزار Box-Behnken با غلظت pDNA، μg/ml 86/52 مدت زمان الکترواسپری min 06/32 مدت زمان انکوباسیون سلولی پس از انتقال ژن day 09/4 محاسبه شد. پس انجام فرایند انتقال ژن با شرایط نمونه بهینه به روش الکترواسپری سلول¬ها با میکروسکوپ فلورسنس و به روش فلوسیتومتری بررسی شدند. درصد سلول¬های GFP مثبت پس از شمارش سلولی حدود 04/3 ± 05/41% به دست آمد. نتیجه حاصل شده با نتیجه پیش بینی شده توسط نرم افزار قابل انطباق است و در مقایسه با انتقال ژن به روش معمول کلسیم فسفات که حدود 4/2 ± 1/31% کارایی داشت نتیجه بهتری به دست آمد.
TOPICAL NAME USED AS SUBJECT
انتقال ژن
نانوذرات
کیتوزان-pDNA
الکترواسپری
PERSONAL NAME - PRIMARY RESPONSIBILITY
Relator Code
، پديدآور
سعیدی لندی، فرزانه
PERSONAL NAME - SECONDARY RESPONSIBILITY
Relator Code
، استاد راهنما
Relator Code
، استاد راهنما
Relator Code
، استاد مشاور
امانی، امیر
نگاهداری، بابک
فریدی مجیدی، رضا
CORPORATE BODY NAME - SECONDARY RESPONSIBILITY
Entry Element
دانشگاه علوم پزشکی تهران دانشکده پزشکی
ORIGINATING SOURCE
Country
ایران
Agency
دانشگاه علوم پزشکی تهران دانشکده پزشکی
Date of Transaction
20221218
LOCATION AND CALL NUMBER
Call Number
۲۱۳۵ف
DATA NOT CONVERTED FROM SOURCE FORMAT
Tag of the Source Format Field
دانشگاه علوم پزشکی تهران کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
