بررسی تمایز سلولهای اسپرماتوگونی انسان در بستر سه بعدی حاصل از بافت سلولزدایی شده بیضه گوسفند
General Material Designation
[پایان نامه]
First Statement of Responsibility
سپیده آشوری موثق
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
Date of Publication, Distribution, etc.
۱۳۹۸
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۹۱ص.
Other Physical Details
جدول،نمودار
Accompanying Material
سی دی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
دکتری تخصصی(PHD)
Discipline of degree
بیولوژی تولید مثل
Text preceding or following the note
۲۰
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
بررسی تمایز سلولهای اسپرماتوگونی انسان در بستر سه بعدی حاصل از بافت سلولزدایی شده بیضه گوسفندمقدمه: بهبود روشهای کشت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی (Spermatogonial stem cells) در آزمایشگاه می تواند راهی برای مطالعه بیشتر روند اسپرماتوژنز و کمک به درمان ناباروری در مردان باشد. به این منظور مطالعات گسترده ای برای فرآهم کردن بستری مناسب که بتواند شرایط سه بعدی مشابه بدن برای کشت SSCs ایجاد کند انجام شده است. سلولزدایی بافتها با حفظ ماتریکس خارج سلولی و ایجاد شرایط سه بعدی برای رشد سلولها می تواند راهی برای بهبود شرایط کشت در آزمایشگاه باشد. مواد و روشها: نمونه بافت بیضه از بیمار مرگ مغزی کاندید اهدا عضو گرفته شد و پس از هضم آنزیمی سلولهای بافت جدا شده و برای کشت و تکثیر SSCs در محیط کشت اختصاصی به مدت ۴ هفته کشت داده شدند. پس از تایید هویتSSCs تکثیر شده با روش ایمونوسیتوشیمی (ICC) و Real Time PCR این سلولها برای تمایز بر روی بستر سه بعدی حاصل از بافت سلول زدایی شده بیضه گوسفند و همچنین در شرایط دو بعدی با محیط تمایزی کشت داده شدند. در هفته ی چهارم و ششم از شروع کشت SSCs در محیط تمایزی نمونه سلولی از هر دو گروه کشت یافته بر روی بافت بیضه سلولزدایی شده و بستر دو بعدی برداشته شد و بیان ژنهای pre meiotic ،meiotic و post meiotic در سطح mRNA و پروتئین به ترتیب با روش Real Time PCR و ایمونوسیتوشیمی ارزیابی شد.نتایج: نتایج حاصل نشان دادند که میزان بیان ژنهای pre meiotic ،meiotic و post meiotic در سلولهای کشت یافته بر روی بستر سلول زدایی شده به میزان معنی داری بیشتر از بستر دو بعدی است. همچنین میزان بیان ژن های تمایزی در هر دو گروه دو بعدی و سه بعدی در هفته ششم به میزان معنی داری بیشتر از هفته چهارم بود. نتایج این مطالعه نشان داد که بستر سه بعدی استفاده شده در این مطالعه توانسته شرایط ایده آلی برای حفظ، تکثیر و تمایز SSCs بوجود آورد.نتیجه گیری: کشت SSCs بر روی بافت سلولزدایی شده بیضه با ایجاد ECM و شرایط مشابه بدن می تواند به عنوان یک مدل آزمایشگاهی راهی برای انجام اسپرماتوژنز در شرایط برون تنی و امیدی برای درمان ناباروری در مردان باشد.