تعيين پتانسيل پروبيوتيكی دو گونه شايع لاکتوباسیلوس های جدا شده از مدفوع شیر خواران و بررسی تاثير آنها بر تولید بیوفیلم و بیان ژن های vfr و las R در پسودوموناس ائروژینوزا به روش Real-time PCR
General Material Designation
[پایان نامه]
First Statement of Responsibility
شهناز حليمی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
دانشگاه علوم پزشكی تهران، دانشكده پزشكی
Date of Publication, Distribution, etc.
۱۳۹۴
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۱۴۹ص.
Other Physical Details
جدول نمودار
Accompanying Material
سي دي
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
دکتری تخصصی (PHD)
Discipline of degree
ميكروب شناسی
Date of degree
۱۳۹۴/۱۲/۱۹
Text preceding or following the note
۲۰
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
مقدمه: لاکتوباسیلوس ها، باسیل های گرم مثبتی می باشند که قسمتی از فلور نرمال دستگاه گوارش و ادرای تناسلی را تشکیل می دهند. این باکتری ها امروزه به دلیل تاثیرات سودمندی ( تعدیل سیستم ایمنی، کاهش کلسترول و کاهش تهاجم باکتری های پاتوژن) که در بدن میزبان خود دارند به عنوان پروبیوتیک مورد توجه قرار گرفته اند. از جمله خصوصیات یک باکتری پروبیوتیک می توان به بی خطر بودن، مقاومت به شرایط معده و روده، توانایی اتصال به سلول های اپیتلیال و خاصیت آنتی باکتریال آن اشاره کرد. در برخی از مطالعات علاوه بر فعالیت آنتی باکتریال آنها، به مهار سنتز بیوفیلم تعدادی از باکتری های بیماری زا مانند پسودوموناس ائروژینوزا توسط برخی از گونه های لاکتوباسیلوس اشاره شده است. هدف از انجام این مطالعه، شناسایی جدایه هایی از لاكتوباسيل ها با پتانسیل پروبیوتیکی و بررسی تاثیر سوپرناتانت آنها در کاهش تولید بیوفیلم پسودوموناس ائروژینوزا و بیان ژن های vfr و lasR می باشد. روش کار: جداسازی جدایه های لاکتوباسیلوس از مدفوع شیرخواران تا 6 ماه و شناسایی جنس و گونه جدایه ها به وسیله پرایمر های اختصاصی جنس و گونه صورت گرفت. بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی، تحمل عصاره معده و روده، توانایی اتصال به سلول های Caco-2 و خاصیت آنتی باکتریال بر علیه پسودوموناس ائروزینوزا جهت شناسایی جدایه هایی با پتانسیل پروبیوتیکی 4 گونه شایع انجام شد. سپس خاصیت آنتی بیوفیلمی سوپرناتانت جدایه های انتخابی و اگزوپلی ساکاید استخراج شده توسط برخی از جدایه های مورد مطالعه ارزیابی شد و در نهایت تاثیر برخی از این سوپرناتانت ها بر بیان 2 ژن vfr و lasR با روش Real-time PCR ارزیابی شد. نتایج: 4 گونه لاکتوباسیلوس رامنوزوس، گسری، فرمنتوم و پاراکازئی دارای بیشترین فراوانی بودند. در بین 98 جدایه مورد مطالعه، 3 جدایه لاکتوباسیلوس فرمنتوم و 4 جدایه لاکتوباسیلوس رامنوزوس نسبت به سویه پروبیوتیک تجاری L. rhamnosus R0011 دارای پتانسیل پرویبوتیکی بیشتری بودند. سوپرناتانت یک جدایه از هر 3 گونه لاکتوباسیلوس فرمنتوم، رامنوزوس و پاراکازئی دارای فعالیت آنتی بیوفیلمی بر علیه پسودوموناس ائروزینوزا بودند و اگزوپلی ساکارید جدا شده از لاکتوباسیلوس فرمنتوم دارای اختلاف معنی دار با دیگر اگزوپلی ساکارید ها بوده است. بیان 2 ژن مطالعه شده در حضور سوپرناتانت ها تغییر نکرد. نتیجه گیری: از بین 4 گونه مطالعه شده، برخی جدایه های لاکتوباسیلوس فرمنتوم و رامنوزوس دارای پتانسیل پروبیوتیکی و بیشترین اثر مهاری و آنتی بیوفیلمی نسبت به پسودوموناس ائروزینوزا بودند. احتمالا کاهش تولید بیوفیلم به واسطه تغییر در بیان دیگر ژن ها همچون ژن هاي مسئول سنتز پلي ساكاريد ها يا پروتئين ها یا مکانیسم های دیگر مانند كاهش اتصال سلول به سلول و مهار رقابتي بر همكنش كربوهيدرات ها با پروتئين ها می باشد.