#تهیه نانوبادی (VHH) نوترکیب مشتقشده از آنتیبادیهای زنجیره سنگین شتری بر علیه آنتیژن نوترکیب RPSMA در سرطان پروستات با استفاده از تکنیک نمایش فاژی
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
#ی، ۱۵۸ ص.: جدول، نمودار
Specific Material Designation and Extent of Item
1
EXTERNAL INDEXES/ABSTRACTS/REFERENCES NOTE
Name of source
#مقدمه، سرطان پروستات شایع ترین سرطان موجود در مردان میصباشد .استفاده از آنتیصبادی در درمانهای انتخابی سرطان بسیار مورد توجه است .مهمترین فاکتور در درمان یا تشخیص، یافتن آنتیصژن های اختصاصی سرطان میصباشد .آنتیصژن PSMA با توجه به افزایش آن در سرطان پروستات، گزینهص مناسبی جهت آنتی-بادی درمانی می باشد .نوع خاصی از آنتیصبادی های شتری که VHH نام دارد، با توجه به کوچکی اندازه، دارای مزایای بسیار زیادی در کاربردصهای کلینیکی میصباشد .پس از تهیه کتابخانهصهای فاژی حاوی نانوصبادی توسط تکنیک نمایش فاژی و غربالگری آنها، نانوبادی اختصاصی با افینیتی بالا بر علیه آنتیصژن مورد نظر به دست میصآید .هدف از این مطالعه طراحی و تولید یک اپیصتوپ از آنتیصژنPSMA ، تهیه کتابخانه فاژی ایمن حاوی نانوبادیصهای شتری، غربالگری کتابخانه فاژی بر علیه آنتیصژن PSMA و در نهایت تولید نانوبادی (VHH) مونوکلونال اختصاصی بر علیه آنتیصژن PSMA میصباشد .روش، آنتیصژن PSMA پس از کلون و بیان، به شتر تزریق شد .پس از تخلیص لنفوسیت های شتری و جداسازیRNA ، cDNA ساخته شد .با انجام دو واکنش PCR متوالی، ژنهای VHH جدا گردید .ژنهای نانوبادی وارد وکتور فاژمیدی شد و پس از قرار دادن در میزبان مناسب، توسط فاژ کمکی آلوده گردید .بدین ترتیب کتابخانه فاژی حاوی نانوبادی ایجاد شد .این کتابخانه جهت به دست آوردن نانوبادی با افینیتی بالا،5 مرحله غربالگری شد .پس از انجام فاژ الایزا، چند کلونی انتخاب و نانو بادی به صورت محلول تولید شد .جهت افزایش تولید نانوبادی، ژن VHH وارد وکتور بیانی pET28a شد .در نهایت میزان تمایل و اختصاصیت نانوبادی اندازه گیری شد .نتیجه و بحث، بیان آنتیصژن PSMA توسط الکتروفورز و وسترن بلات، و ایمن شدن شترها توسط الایزا تایید شد .تکثیر ژنهای VHH توسط الکتروفورز تایید شد .همچنین تایید کتابخانه ژنی توسط واکنش کلونی PCR انجام شد .وجود فاژهای نمایش دهنده نانوبادی نیز توسط الایزا بر علیه PSMA به تایید رسید .تولید نانوبادی نوترکیب نیز توسط الکتروفورز و وسترن بلات به تایید رسید .میزان تمایل نانوبادی بر علیه PSMA نوترکیب10 - 8ٲ 7/5 محاسبه گردید .در نهایت با توجه به افینیتی و اختصاصیت بالای نانوبادی تولیدی، میتوان به این محصول به عنوان یک ابزار تشخیصی در سرطان پروستات امیدوار بود .