بررسی بیان ژن miR۳۳ و پروتئین CREB در یادگیری وابسته به وضعیت مورفین در هیپوکامپ موش صحرایی
[پایاننامه]
/صادق مرادی
[بی جا]
: پزشکی
، ۱۳۹۷
۱۰۷ص.
چاپی - لوح فشرده
کارشناسی ارشد M.SC
فیزیولوژی
علوم پزشکی کاشان
سابقه وهدف :حافظه و یادگیری یکی از فرایندهای مهم و پیچیده مغزی است که در تشکیل این فرایند عوامل ملکولی مختلفی مثل ژنصها و پروتئینصها دخالت میصکنند .عملکرد برخی مواد و داروهای مختلف منجر به تغییراتی در میزان این عوامل ملکولی میصشود .از جمله داروهای موثر بر حافظه مورفین است که از خانواده مخدرهاست و مشخص شده که در صورت مصرف در زمان آموزش و آزمون) تحت عنوان یادگیری وابسته به وضعیت مورفین (اثر تقویتی در روند حافظه دارد و این اثر بوسیله تغییر در میزان بیان عوامل ملکولی مربوط به حافظه صورت میصگیرد .هدف از این مطالعه بررسی بیان برخی عوامل ملکولی دخیل در فرایند حافظه ، مانند ژن miR ۳۳ و پروتئین CREBدر یادگیری وابسته به وضعیت مورفین میصباشد .مواد و روش ها :در این مطالعه ۲۶ گروه موش صحرایی نر ، شامل گروهصهای تزریق پیش از آموزش مورفین، پس از آموزش مورفین ، یادگیری وابسته به وضعیت مورفین، پیش از آزمون نالوکسان، تداخل نالوکسان با مورفین و تداخل نالوکسان با یادگیری وابسته به وضعیت وجود داشت که هر گروه شامل ۸ موش میصشد .تزریقات مورفین (mg/kg ۵/۷ و ۵ و ۵/۲) و نالوکسان (mg/kg ۲ و ۱ و ۵/۰) در دو روز آموزش و آزمون و به صورت داخل صفاقی انجام شد .آزمایشات رفتاری شامل بررسی فعالیت حرکتی حیوان و بررسی میزان یادگیری اجتنابی بود .آزمایشات ملکولی نیز شامل تکنیکTime PCR - Realبرای بررسی بیان۵p -۳۳- miRو تکنیک Western blot برای بررسی بیان پروتئین CREB و تغییرات نسبتCREB/CREB - pدر هیپوکامپ بود .یافته ها :آنالیز آماری دادهصها نشان داد که تزریق مورفین در روز آموزش سبب تخریب حافظه میصشود .در حالیکه تزریق قبل از آزمون مورفین در حیواناتی که به دنبال تزریق مورفین در روز آموزش حافظهصشان تخریب شده بود موجب بهبود حافظه شد)یادگیری وابسته به وضعیت مورفین .(همچنین مشاهده شد که نالوکسان به تنهایی اثری بر میزان حافظه ندارد ولی در تداخل با گروهصهای یادگیری وابسته به وضعیت مورفین موجب مهار اثر مورفین و کاهش حافظه شد .آنالیز دادهصهای ملکولی نشان داد که تزریق مورفین در روز آموزش سبب افزایش بیان۵p -۳۳- miRو کاهش میزان بیان پروتئین CREB گردید همچنین نسبتCREB/CREB - pنیز کاهش می یابد .در حالیکه تزریق مورفین هم در روز آموزش و هم در روز آزمون موجب کاهش میزان۵p -۳۳- miRو افزایش میزان بیان پروتئین CREB و نسبتCREB/CREB - pشد .همچنین مشاهده شد که نالوکسان به تنهایی اثری بر میزان بیان mir۳۳ ، میزان بیان پروتئین CREB و نسبتCREB/CREB - pندارد ولی در تداخل با گروهصهای یادگیری وابسته به وضعیت مورفین موجب افزایش میزان۵p -۳۳- miRو کاهش میزان بیان پروتئین CREB و نسبتCREB/CREB - pمیصشود .بحث و نتیجه گیری :مشاهدات رفتاری و ملکولی این مطالعه نشان میصدهد که عملکرد حافظه توسط مسیرهای ملکولی متعددی کنترل و تنظیم میصشود .در این مطالعه با بررسی یک مسیرCREB - mirمشخص شد کهmicroRNA ها به ویژه mir۳۳ نقش مهمی در تنظیم ژنصها و پروتئینصهای مربوط به حافظه دارند؛ به گونهصای که mir۳۳ نقش مهاری در بیان پروتئین CREB و به دنبال آن در عملکرد حافظه دارد .واژه های کلیدی :یادگیری وابسته به وضعیت، مورفین،Rat ،miR۳۳ ، CREB