جداسازی انگل های لیشمانیا از بیماران مراجعه کننده به مراکز بهداشتی شهر کاشان حومه و تعیین گونه آنها با استفاده از روش PCR - RFLP و SEQUENCING طی سالهای ۱۳۸۹-۱۳۸۰
[پایاننامه]
/محمدرضا شیعه
[بی جا]
تهران
، ۱۳۹۰
۱۳۲ص.
چاپی
کارشناسی ارشد
انگل شناسی
تهران
مقدمه :لیمانیازیس جلدی یک عفونت انگلی است که به عنوان یک معضل بهداشتی در بخشهایی از ایران بویژه شهر توریستی کاشان محسوب می گردد راههای پیشگیری و کنترل لیشانیازیس بسته به گونه انگل متفاوت است جهت تعیین گونه انگل مطالعات مولکولی ضروری است از آنجایی که تا به حال در این منطقه مطالعه ای جهت تعیین گونه انگل انجام نشده است لذا در این مطالعه از روش مولکولی PCR-RFLP در شهر کاشان و حومه (کاشان ،راوند، زیدی،فین) استفاده گردید. مواد و روشها: در شرایط استریل مقداری از سروزیته زخم بیماران مبتلا به لیشمانیوز جلدی(سالک) درون محیص اختصاصی RPMI ۱۶۴۰ کشت داده شد.پس از تکثیر اشکال پروماستیکوت DNA ایزوله های مختلف استخراج شد در مواردیکه آلودگی باکتریایی محیطهای کشت وجود داشت ،DNA از لام های رنگ آمیزی شده بیماران جدا گردید بوسیله روش PCR قطعه ITSI تکثیر و با استفاده از آنزیم اختصاصی HAEIII ودر کنار ایزوله های استاندارد ایران تعیین گونه شدند جهت تایید نتایج تعدادی از ایزوله ها به حیوان آزمایشگاهی تلقیح گردید و تعدادی از ایزوله ها تعیین سکانس شده و ژن آنها در بانک ژن ثبت گردید. نتایج : از ۱۳۷نمونه مطالعه شده ۱۰۳نمونه در محیط RPMI ۱۶۴۰ کشت داده شد و ۶۳ نمونه تخلیص و بوسیله روش RFLP تعیین گونه شد ۵۸ نمونه ۹۲/۱درصد به عنوان لیشمانیا تروپیکا و ۵ نمونه ۷/۹درصد به عنوان لیشمانیا ماژور تشخیص داده شد. نتیجه گیری نهایی :نتایج این مطالعه نشان می دهد که شهر کاشان و حومه با وجود قرار گیری در استان اصفهان که یکی ار مهمترین کانونهای روستایی ZCL در ایران محسوب می گردد و همجواری با کانونهای روستایی آران و بیدگل نظنز و قم یک کانون شهری ACL می باشد . کلمات کلیدی : لیشمنیازیس جلدی، PCR-RFLP ، لیشمانیا تروپیکا، کاشان