عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
IR
۶۴ط
فارسی
IR
تخلیص آنزیم TAQپلیمر از نو ترکیب و بررسی خصوصیات بیوشیمیایی آن
[طرح تحقیقاتی]
/ دکتر عباس صمدی
؛ معاونت پژوهشی - دانشگاه علوم پزشکی کاشان
کاشان
، ۱۳۷۵.
۷۶ص.
:جدول.نمودار.۲ن
چاپی
آنزیم نو ترکیب Taq پلیمراز که در سلول کلی باسیل بیان شده است ، در روشهای متنوع واکنشهای زنجیره ای پلیمراز،PCR(Polymerase Chain Reaction) کاربرد دارد . این آنزیم از سلول اصلی خود ، Thermus aquaticus YT۱ جدا شده و در سلول کلی باسیل کلون سازی و بیان شده است . بیان آنزیم Taq پلیمراز توسط بعضی از واسطه های متابولیکی مانند IPTG القا شده و میزان قابل توجه ای آنزیم تولید می شود . جهت تعیین خصوصیات ملکولی آنزیم Taq پلیمراز ، این آنزیم به سه روش ساده ، رسوبی و ژل کروماتوگرافی از سلول نوترکیب استخراج شد و میزان ناخالصی بوسیله روش الکتروفورز SDS-PAGE ، در مجاور قرار دادن آنزیم Taq پلیمراز با DNA لامبدا به مدت یک شبانه روز جهت تعیین فعالیت آندونوکلئازی و اگزونوکلئازی و تعیین فعالیت پروتئازی بوسیله قرار دادن آنزیم به مدت یک شبانه روز در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد و تعیین فعالیت آنزیم انجام شد . مناسب ترین روش برای تخلیص آنزیم Taq پلیمراز از روش رسوبی است . آنزیم تولید شده با درجه خلوص مناسب برای انجام اغلب روشهای PCR قابل استفاده است . آنزیم Taq پلیمرازی که به این ترتیب تهیه شد فاقد فعالیت آندونوکلئازی و اگزونوکلئازی و پروتئازی است . آنزیم Taq پلیمراز حاصله دارای وزن ملکولی ۹۲ کیلودالتون است . از یک رشته پروتئین تشکیل شده است . این آنزیم فاقد گروههای کربوهیدرات و چربی است . حداکثر فعالیت آنزیم در دمای ۷۲ درجه سانتیگراد و PH ۷/۵-۹/۵ است . در بعضی از روشهای اختصاصی PCR مانند تعیین توالی DNA از آنزیم Taq پلیمراز خالصتر استفاده می کنند که می توان از آنزیم Taq پلیمراز که از طریق روش ژل کروماتوگرافی حاصل شده است و درجه خلوص بیشتری دارد استفاده نمود
آنزیمها- TAQ
آنزیمها - پلیمر ازنو ترکیب
آنزیمهای پلیمر از - کاشان
آنزیمها - خصوصیات بیوشیمیایی
آنزیمهای پلیمراز- P.C.R
پلیمراز - خصوصیات بیوشیمیایی
صمدی، عباس
اعرابی، محمدحسین ، همکار
رسا، حسن، همکار
ایران
ط۶۴،۱۳۷۸،۲
فهرستنویسی قبلی
p
XF
1
a
Y
