ساخت کانسراکت نوترکیبی همولوگ ژن گاما گلوبین حاوی GFP به منظور ایجاد سلول مدل K562 با جایگزینی GFP به جای ژن گاما گلوبین
[پایاننامه]
Design gamma globin gene homologous recombination construct containing GFP to create model cells containing by GFP knock in in gamma globin gene mediated homologous recombination through CRISPR-cas9 system
علوم بهزیستی و توانبخشی University of Social Welfare and Rehabilitation Sciences))
، ۱۳۹۵
ذ،۶۹ص.
چاپی
کارشناسی ارشد
ژنتیک انسانی Genetics Human
علوم بهزیستی و توانبخشی University of Social Welfare and Rehabilitation Sciences))
بتا-تالاسمی یکی از شایع ترین بیماری های خونی در سطح جهان و ایران می باشد .تا به امروز تلاش های زیادی انجام شده است تا اینکه راهکار مناسبی جهت تعدیل یا درمان کامل علائم بیماریهای بتا تالاسمی معرفی شود .از آنجایی که افزایش هموگلوبین جنینی منجر به بهبود قابل توجهی در وضعیت بالینی بیماران بتا تالاسمی شکل میشود ، شناخت ترکیباتی که قادر به تحریک مجدد فعالیت گاما گلوبین و متعاقب آن ایجاد هموگلوبین جنینی می باشند، از اهمیت بالایی برخوردار می باشد .در این رابطه، در دسترس بودن یک سیستم مدل برای سنجش و غربالگری سریع پتانسیل القاگر های HbF اهمیت زیادی دارد .رده سلولی K562 به عنوان یک سیستم بسیار مفید مدل برای شناسایی پتانسیل درمانی ترکیبات قادر به القای گاما گلوبین و همچنین به منظور مطالعه مکانیسم مولکولی تنظیم بیان ژن جنینی و رویانی گلوبین انسان پیشنهاد میشود . هدف ازین مطالعه ساخت کانسراکت نوترکیبی همولوگ ژن گاما گلوبین حاوی GFP به منظور ایجاد سلول مدل K562 با وارد کردن GFP در ژن گاما گلوبین از طریق نوترکبی همولوگ با واسطه سیستمcas9 - CRISPRمی باشد .در صورتی که بتوان این سلول مدل را ایجاد کرد ، می توان ازین سلول مدل برای اسکرین کردن با راندمان بالا HTS استفاده کرد و دیگر نیازی به به استخراج RNA و Real time PCR نیست .کلمات کلیدی :بتالاسمی ، هموگلوبین جنینی ، رده سلولیk562 ، نوترکیبی همولوگ
In this respect, the availability of a cellular model system for the rapid screening of potential HbF inducers could be of great interest. Among cellular systems available for the screening of drugs able to induce erythroid differentiation and possibly involved in reactivation of HbF production, the human erythroleukemia K562 cell line has been largely exploited. Beta-thalassemia is one of most common hematological disorders worldwide. To date, many efforts are made to find a suitable way to prevent or cure illnesses. Since the increase fetal hemoglobin leads to a significant improvement in the clinical condition of thalassemia patients, identification of compounds capable of stimulating HbF production is very important. The aim of the study was to design gamma globin gene homologous recombination construct containing GFP to create model cells containing by GFP knock in in gamma globin gene mediated homologous recombination through CRISPR-cas9 system. this cells can be used as models for screening with high efficiency HTS and no need for RNA extraction and Real time PCR. Keywords: Beta thalasmia, fetal hemoglobin, cell line k562, homologous recombination
ba
Design gamma globin gene homologous recombination construct containing GFP to create model cells containing by GFP knock in in gamma globin gene mediated homologous recombination through CRISPR-cas9 system