Characterization and biosynthesis of silver nanoparticles using date palm fruit extract (Phoenix dactylifera) and its anticancer efficacy.
Dissertation
Amal Jalil Hashem
Natural Sciences
1401
123p.
cd
M.S
Cellular and Molecular Biology
1401/07/30
The samples (All breast specimens) were collected all the time Between Decembers - June 2022. Were obtained from Al-Sadr Medical City - Cancer Center - Al-Najaf Al-Ashraf - Iraq, were samples were taken for 39 women. The work intensified in two directions in this study. The first direction was related to the synthesis of nanomaterials and their application to breast cancer cells, were, through green biological technology, AgNPs were synthesized by Phoenix dactylifera fruit extract, which is a quick, simple, non-toxic and cheap method and considered as a sustainable technology and an alternative to traditional methods (physical or chemical), where the properties of the AgNPs using ultraviolet visible spectroscopy (UV-vis), Fourier transform infrared (FT-IR), X-ray (XRD), Transmission Electron Microscopy (TEM), Energy Dispersive X-ray Spectroscopy (EDX) and Scanning Electron Microscopy (SEM). Further, phenotypic analysis in an inverted phase-contrast microscope.The cytotoxicity of human breast cancer cells (MCF-7) was evaluated with AgNPs. Through the results of FT-IR on AgNPs of date extract, it was shown that its molecules such as flavonoids, carbohydrates and phenolic acids have the ability to help cover and reduce silver nanoparticles, at wavelength 425 nm in a UV-vis spectrophotometer between surface plasmon resonance (SPR) of AgNPs. TEM micrographs showed that AgNPs diameter is ranged from 20 nm to 100 nm as spherical morphology, average size of AgNPs was 43nm as FCC structure.XIIMCF-7 was treated with AgNPs at different concentrations and many tests were conducted to evaluate its effects as MTT, NRU, ROS, MMP, oxidative stress markers, morphological changes, apoptosis/necrosis and cell cycle, where the results showed that cytotoxicity depends on AgNPs concentration and decreased The level of MMP and GSH while the level of ROS and LPO was clearly increased, the analysis of cell cycle experiment data also gave AgNPs induced SubG1 phase arrest and apoptosis/necrosis, thus can be suggested to be used for the treatment of human breast cancer.The second trend was related to gene expression in terms of molecular differences with the help of techniques shared between DNA microarrays and laser capture microdissection of the stages of human breast cancer. In this research, a special protocol was designed based on the combination of more than one method to achieve the highest and most accurate results in gene expression and it deals with all stages, pre-disease signs, pre-invasive, and late invasive stages of human breast cancer. Noted through the results that there are many similarities between the distinct stages of the disease at the level of transcription, changes in gene expression may allow the progression of the disease to the invasive stage, as it seems that some of them are latent in pre-intervention stages, unlike what was observed in the tumor stage which dependence on Distinguished gene expression signatures, and the analyzes showed that there are gene subgroups inherently related to the degree of tumor in a quantitative manner in terms of the transition from the primary growth stage to the invasive growth stage.
نمونهها (همه نمونههای پستان) در تمام مدت زمانی بین دسامبر تا ژوئن 2022 جمعآوری شدند. از شهر پزشکی الصدر - مرکز سرطان - النجف الاشرف - عراق، نمونهبرداری از 39 زن گرفته شد.در این مطالعه کار در دو جهت تشدید شد. اولین جهت مربوط به سنتز نانومواد و کاربرد آنها در سلول های سرطانی پستان بود که با استفاده از فناوری سبز بیولوژیکی، نانوذرات نقره توسط عصاره میوه Phoenix dactylifera سنتز شدند که روشی سریع، ساده، غیر سمی و ارزان است و در نظر گرفته شد. یک فناوری پایدار و جایگزینی برای روشهای سنتی (فیزیکی یا شیمیایی)، که در آن خواص نانوذرات نقره با استفاده از طیفسنجی مرئی فرابنفش (UV-vis)، تبدیل فوریه فروسرخ (FT-IR)، اشعه ایکس (XRD)، میکروسکوپ الکترونی عبوری (TEM)، طیف سنجی اشعه ایکس پراکنده انرژی (EDX) و میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM). علاوه بر این، تجزیه و تحلیل فنوتیپی در یک میکروسکوپ کنتراست فاز معکوس.سمیت سلولی سلولهای سرطان پستان انسانی (MCF-7) با AgNPs ارزیابی شد.از طریق نتایج FT-IR بر روی نانو ذرات نقره عصاره خرما، نشان داده شد که مولکولهای آن مانند فلاونوئیدها، کربوهیدراتها و اسیدهای فنولیک توانایی کمک به پوشش و کاهش نانوذرات نقره را در طول موج 425 نانومتر در طیفسنجی UV-vis بین سطح دارند. رزونانس پلاسمون (SPR) AgNPs. میکروگراف های TEM نشان داد که قطر نانوذرات نقره به عنوان مورفولوژی کروی از 20 نانومتر تا 100 نانومتر متغیر است، اندازه متوسط نانوذرات نقره به عنوان ساختار FCC 43 نانومتر بود.XIIMCF-7 با AgNPs در غلظتهای مختلف تیمار شد و آزمایشهای زیادی برای ارزیابی اثرات آن بهعنوان MTT، NRU، ROS، MMP، نشانگرهای استرس اکسیداتیو، تغییرات مورفولوژیکی، آپوپتوز/نکروز و چرخه سلولی انجام شد، که در آن نتایج نشان داد که سمیت سلولی بستگی به غلظت AgNPs و کاهش سطح MMP و GSH در حالی که سطح ROS و LPO به وضوح افزایش یافت، تجزیه و تحلیل دادههای آزمایش چرخه سلولی همچنین باعث توقف فاز SubG1 و آپوپتوز/نکروز ناشی از AgNPs شد، بنابراین میتوان برای درمان استفاده کرد. سرطان سینه انسانروند دوم مربوط به بیان ژن از نظر تفاوتهای مولکولی با کمک تکنیکهای مشترک بین ریزآرایههای DNA و ریزشکن کردن لیزر مراحل سرطان پستان انسان بود. در این تحقیق پروتکل ویژه ای بر اساس ترکیب بیش از یک روش برای دستیابی به بالاترین و دقیق ترین نتایج در بیان ژن طراحی شد و به تمامی مراحل، علائم پیش بیماری، مراحل پیش تهاجمی و اواخر تهاجمی می پردازد. سرطان سینه انسان با توجه به اینکه از طریق نتایج به وجود شباهت های زیادی بین مراحل متمایز بیماری در سطح رونویسی وجود دارد، تغییرات در بیان ژن ممکن است باعث پیشرفت بیماری به مرحله تهاجمی شود، زیرا به نظر می رسد برخی از آنها در مرحله پیش از بیماری نهفته هستند. مراحل مداخله، بر خلاف آنچه در مرحله تومور مشاهده شد که به امضاهای بیان ژن متمایز وابسته است، و تجزیه و تحلیل ها نشان داد که زیرگروه های ژنی وجود دارد که به طور ذاتی با درجه تومور به صورت کمی از نظر انتقال از مرحله رشد اولیه به مرحله رشد تهاجمی.
خصوصیات و بیوسنتز نانوذرات نقره با استفاده از عصاره میوه خرما (Phoenix dactylifera) و اثر ضد سرطانی آن