پ۲۸۹۱۱
per
ارزیابی بیان و الگوی متیلاسیون پروموتر ژن¬های ایمونولوژیک HLA-G و IL10R در بافت¬ جفت جنین های سقط شده
حوریه خانی
علوم طبیعی
۱۴۰۱
۱۳۶ص.
سی دی
دکتری
ژنتیک مولکولی
۱۴۰۱/۱۱/۲۳
زمینه و هدف: از دست رفتن مکرر حاملگی (RPL ) یا سقط مکرر شرایطی است که در آن دو و یا بیش از دو مورد سقط متوالی قبل از هفته¬ی 20 حاملگی رخ داده باشد که در حدود 1-2 % از کل زنان بارور را تحت تاثیر قرار می-دهد. اختلال سیستم ایمنی مادر در رد کردن جنین/جفت یکی از شایع¬ترین عوامل موثر در RPL است زیرا جنین-جفت یک نیمه- آلوگرافت با آنتی¬ژن¬های پدرانه و آلوژنیک می¬باشند و هرگونه نقص در فرآیند تحمل ایمونولوژیک در طول بارداری، می¬تواند منجر به سقط شود. هنگام بارداری، سلول¬های ایمنی متعددی نظیر سلول¬های NK ، Tregs ، DC ها و ماکروفاژها در Decidua ساکن هستند که برای حفاظت از جفت بسیار حیاتی هستند. با این حال این سلول¬ها می¬توانند جفت را به عنوان یک عامل ایمونولوژیک خارجی شناسایی کنند و موجب رد آن توسط سیستم ایمنی مادر شوند. مولکول HLA-G بیان شده بر روی سطوح تروفوبلاست¬های خارج ویلوسی (EVT ) از طریق اتصال به گیرنده¬های موجود بر روی این سلول¬ها، مانع از عملکرد سیتوتوکسیتی آن¬ها می¬گردد. به¬علاوه، اینترلوکین 10 (IL-10 ) یک سیتوکین ضد التهابی است که توسط بعضی سلول¬های ایمنی و نیز تروفوبلاست ترشح می¬شود و از طریق اتصال به IL-10R و فعال کردن مسیر پیام¬رسان JAK1/ STAT3 موجب مهار عملکرد سیتوتوکسیتی سلول¬های ذکر شده می¬گردد. با توجه به اهمیت عملکرد مولکول¬های ایمنی در RPL و همچنین متیلاسیون در تنظیم بیان ژن¬ها، هدف این مطالعه بررسی بیان و الگوی متیلاسیون پروموتر ژن¬های HLA-G و IL-10R در بافت¬های جفت سقط مکرر است.روش بررسی: نمونه های بافت جفت از 78 زن با سابقه حداقل دو سقط متوالی و 40 زن سالم بدون سابقه سقط جنین جمع آوری شد. بیان و الگوی متیلاسیون پروموتر ژن¬های HLA-G و IL10R در نمونه های بافت جفت به ترتیب با روش PCR کمی (qPCR ) و MS-HRM بررسی شد. همچنین، همبستگی بین سطح بیان این ژن ها و پارامترهای بالینی آسیب شناسی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.یافته ها: نتایج ما نشان داد که بیان HLA-G در بیماران سقط مکرر نسبت به افراد سالم کاهش یافته بود، در حالی که بیان IL10R در نمونه‌های بافت جفت بیماران RPL نسبت به افراد سالم افزایش نشان می دهد (05/0 > P). ما همچنین دریافتیم که سطح بیان mRNA HLA-G و IL10R در بافت جفت بیماران RPL با سن و تعداد سقط جنین همبستگی منفی دارد (05/0 > P).همچنین همبستگی مثبت و معنی داری بین سطوح بیان HLA-G و IL10R در زنان مبتلا به RPL مشاهده شد (05/0 > P). اما تفاوت معني داری در وضعیت متیلاسیون ژن HLA-G و IL10R بین نمونه های بافت جفت سقط مکرر و نمونه های بافت جفت سقط القایی از لحاظ آماری مشاهده نشد.نتیجه گیری: داده ها نشان می دهد که بیان تغییر یافته HLA-G و IL10R در بافت جفت ممکن است به پاتوژنز RPL کمک کند و بنابراین ممکن است به عنوان اهداف درمانی بالقوه برای پیشگیری از آن عمل کند.
AbstractBackground: Recurrent pregnancy loss (RPL) or recurrent miscarriage is a condition in which two or more consecutive miscarriages have occurred before the 20th week of pregnancy, which affects about 1-2% of all fertile women. Disturbance of the mother's immune system in rejecting the fetus/placenta is one of the most Effective factors affecting RPL, Because the fetus-pair is a semi-allograft with paternal and allogeneic antigens and any defect in the immunological tolerance process during pregnancy can lead to abortion. During pregnancy, multiple immune cells such as NK cells, Tregs, DCs, and macrophages reside in the decidua, which are crucial for the protection of the placenta. However, these cells can identify the placenta as a foreign immunological agent and cause it to be rejected by the mother's immune system. The HLA-G expressed on the extra-villous trophoblasts (EVT) prevents their cytotoxicity through binding to the receptors on these cells. In addition, interleukin 10 (IL-10) is an anti-inflammatory cytokine that is secreted by some immune cells and trophoblasts, and inhibits The cytotoxicity of the mentioned cells through binding to IL-10R and activating the JAK1/STAT3 signaling pathway. Regarding to the importance of the function of immune molecules in RPL as well as methylation in the regulation of gene expression, the aim of this study is investigation of the expression and methylation pattern of the HLA-G and IL-10R gene promoters in placental tissues of recurrent miscarriages.Methods: Placental tissues samples were collected from 78 women with a history of at least two consecutive miscarriages and 40 healthy women with no history of pregnancy loss. The expression and Methylation Pattern of HLA-G and IL10RB in placental tissue specimens was evaluated by the quantitative real-time PCR (qPCR) and MS-HRM methods. Moreover, the correlation between the expression levels of these genes and clinicopathological parameters was analyzed. Results: The results showed that the expression of HLA-G was down-regulated in placental tissues samples of RPL patients compared to healthy subjects, while the expression of IL10RB was up-regulated, but none of them was statistically significant (P > 0.05). The mRNA expression levels of HLA-G and IL10RB in placental tissue of RPL patients were negatively correlated with maternal age and number of miscarriages (P > 0.05). A significant positive correlation was observed between the expression levels of HLA-G and IL10RB in women with RPL (P < 0.05). However, no statistically significant difference was observed in HLA-G and IL10RB gene methylation status between recurrent abortion placenta samples and selective abortion placenta tissue samples.
Evaluation of expression and promoter methylation pattern of immunological HLA-G and IL10R genes in recurrent miscarriage placenta tissues
خانی،
حوریه
تهیه کننده
حسین پورفیضی،
صفرعلیزاده،
محسنی،
حقی،
محمد علی
رضا
جعفر
مهدی
استاد راهنما
استاد راهنما
استاد مشاور
استاد مشاور
تبریز
