پ۲۸۴۲۵
per
ارزیابی تاثیر داروهای شیمی درمانی رایج بر بیان ایمونوچک پوینت‌های PD-L1و CTLA-4 و VISTA در رده‌ی سلولی سرطان معده
زهرا نوردانش
علوم طبیعی
۱۴۰۱
۸۹ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
ژنتیک
۱۴۰۱/۱۱/۱۸
مقدمه : سرطان یک مشکل جدی بهداشتی و یکی از بیماری های اولیه است که منجر به عوارض و مرگ و میر در جهان می شود. سرطان معده یکی از چند سرطان مهم در جهان و در ایران است. شیمی درمانی در حال حاضر گزینه درمانی اولیه برای بیماران مبتلا به سرطان پیشرفته است اما به دلیل عوارض جانبی شدید و مقاومت دارویی می تواند محدود شود. بنابراین، توسعه روش های درمانی جدید برای غلبه بر معایب بسیار ضروری است. در سرطان معده (GC)، ایمونو چک پوینت هایی مانند CTLA-4، PD-1 و لیگاند آن PD-L1 وVISTA دچار افزایش می شوند. در حال حاضر به طور گسترده از مهار کننده های آنها در درمان سرطان استفاده می نمایند. استفاده از داروهای شیمی درمانی ممکن هست ایمونوچک پوینت ها را مورد تغییر قرار دهند. شواهد نشان می دهد که مهار PD-1 باعث ایجاد یک پاسخ ایمنی موثر در برابر سلول های سرطانی می شود. همچنین پاکلی تاکسل و دوستاکسل و5-فلورو اوراسیل در برابر طیف وسیعی از سرطان های انسانی از جمله سرطان معده کاربرد دارند.مواد و روش ها : در مطالعه حاضر، سلول هایAGS با استفاده از داروهای شیمی درمانی Paclitaxel ، docetaxel و 5-FU مورد تیمار قرار گرفت و تست MTT برای بررسی زنده ماندن سلول ها و سمیت سلولی داروها انجام شد. میزان بیان ژن های PD-L1 ، CTLA-4 و VISTA از طریق تکنیک qRT-PCR مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. همچنین تحقیقات فلوسایتومتری برای بررسی میزان القای آپوپتوز و نیز تجزیه و تحلیل چرخه سلولی با بهره گیری از رنگ آمیزی های Annexin V-FITC/PI و DAPI صورت گرفت.
Abstract:Introduction: Cancer is a serious health problem and one of the primary diseases that becomes one of the complications and deaths in the world. Stomach cancer is one of several important cancers in the world and in Iran. Chemotherapy is currently the primary treatment option for patients with advanced cancer, but severe side effects and drug resistance can be limited. Therefore, new therapeutic methods are very necessary to overcome the disadvantages. In gastric cancer (GC), immuno-checkpoints such as CTLA-4, PD-1 and its ligand PD-L1 and VISTA are increased. Currently, they are specifically using their abilities to treat cancer. Chemotherapy drugs may change immunocheck points. Evidence shows that PD-1 triggers an immune response against cancer cells. Also, paclitaxel, docetaxel and 5-F-uracil are active against a large number of human cancers, including stomach cancer.Materials and methods: In the present study, AGS cells were treated with chemotherapy drugs Paclitaxel, docetaxel 5-FU, and MTT test was performed to check cell viability and cytotoxicity of the drugs. The expression levels of PD-L1, CTLA-4 and VISTA genes were analyzed through qRT-PCR technique. Also, flow cytometry research was done to investigate the amount of apoptosis induction as well as cell cycle analysis using Annexin V-FITC/PI and DAPI dyes.Conclusion: The calculated IC50 is 75.23 μg/ml for 5-FU, 01.14 μg/ml for docetaxel, and 591.3 μg/ml for paclitaxel, which shows that paclitaxel is better than the two other drugs. It has an effect on AGS cells. In addition, the results of Annexin V/PI test showed that updated by chemotherapy drugs has a significant and significant difference with the control group. And it showed cell cycle arrest related to Paclitaxel and docetaxelra drugs in G2 phase. In addition, for this qRT-PCR data analysis showed that the expression of PD-L1, CTLA-4 and VISTA genes from the addition of drugs in the AGS cell group after finding the reverse effect of the drugs and the suppressive effect on the immune system The body is against. They have stomach cancer. Therefore, it is recommended to use immuno-checkpoint inhibitors at the same time as chemotherapy drugs.
Evaluation the effect of common chemotherapy drugs on the expression of PD-L1 and CTLA-4 and VISTA immune checkpoints in gastric cancer cell line
نوردانش،
زهرا
تهیه کننده
صفرعلیزاده،
حسینپور فیضی،
برادران،
رضا
محمدعلی
بهزاد
استاد راهنما
استاد راهنما
استاد مشاور
تبریز
