عنوان

بررسی اثر دارو های شیمی درمانی بر ایمونوچک پوینت ها در سرطان ملانوما

۲۸۲۰۸

per

بررسی اثر دارو های شیمی درمانی بر ایمونوچک پوینت ها در سرطان ملانوما

رقیه ربانی فرد

علوم طبیعی

۱۴۰۰

۶۷ص.

سی دی

کارشناسی ارشد

ژنتیک

۱۴۰۱/۱۱/۱۹

ملانوما یکی از خطرناک ترین انواع سرطان پوست است، که در سلول¬های ملانوسیت شروع می¬شود. این نوع سرطان از سرطان سلول بازالی (BCC) و سرطان سلول فلسی (SCC) کمتر شایع است ولی با این وجود به¬ دلیل داشتن توانایی سریع در پخش شدن به سایر ارگان¬¬¬ها¬ در صورت درمان نشدن درمراحل اولیه بیماری خطرناک¬تر است. تشخیص¬های اشتباه اولیه عامل بروز مشکلات درماتولوژی و پاتولوژی در بیماران ملانوما است که باعث کاهش شانس درمان می¬شود. در طول زمان پیشرفت¬های خوبی در زمینه دارو و درمان انجام شده است. ایمنی تراپی یکی از روش¬های نوین در درمان سرطان¬ها است که با استفاده از ایمونوچک پوینت¬ها برای درمان سرطان¬ها استفاده می شود. ایمونوچک پوینت¬ها بخش طبیعی از سیستم ایمنی است که از بروز واکنش¬های ایمنی شدید جلوگیری می کند. با مسدود کردن عملکرد ایمونوچک پوینت¬ها می توان باعث بروز پاسخ ایمنی در برابر سلول¬های سرطانی شد. مهارکننده¬های سیستم ایمنی یکی از ویژگی¬های محیطی متمایز است که باعث رشد و متاستاز تومور می¬شود. در حال حاضر ایمونوتراپی با مهارکننده¬های ایمونوچک پوینت¬ها فعالیت بالینی گسترده را در زمینه درمان انواع تومورها مثل ملانوما و ریه انجام شده است.در این پژوهش ابتدا سلول های A375 را کشت داده شد و اثر داروهای شیمی درمانی رایج در درمان ملانوما در ایران (وین بلاستین و داکاربازین و تموزلامید) بر روی ایمونوچک¬پوینت¬ها (VISTA, PD-L1, CTLA-4) و عملکرد آن¬ها بررسی شد. به این صورت که میزان بیان RNA سنجیده شد و بعد با استفاده از RNA ، cDNA سنتز شد. با استفاده از qRT-PCR میزان بیان ژن¬های PD-L1, CTLA-4 , VISTA وبرخی از ژن های آپوپتوز مثل CASP-8, CASP-3 CASP-9,BAX اندازه گرفته شد.در نهایت مشخص شد که تموزلامید و داکاربازین به طور موثری بیان CASP-3 را افزایش می¬دهند ولی در درمان با وین¬بلاستین تغییری در بیان CASP-3 رخ نداد. همچنین تغییر در بیان CASP-8 و CASP-9 در درمان ملانوما با تموزلامید و داکاربازین مشاهده شد. همچنین در این پژوهش مشخص شد که میزان بیان بلوکه کننده¬های ایمنوچکپوینت ها بعد از شیمی درمانی می¬توانند تغییر کنند. وین بلاستین تاثیری بر بیان CTLA-4 و VISTA ندارد اما بیان PD-L1 را افزایش می¬دهد. داکاربازین و تموزلامید تاثیری بر بیان VISTA ندارد اما بیان CTLA-4 و PD-L1 را کاهش می¬دهد. این نتایج نشان دهنده اهمیت ترکیب دو روش درمانی ایمنی تراپی به¬ وسیله مهارکننده ایمونوچکپوینت¬ها و شیمی¬درمانی است. به طور خلاصه بیان VISTA تغییر معناداری پیدا نمی کند اما PD-L1 در حضور سه دارو هم تغییر معناداری پیدا می کند وCTLA-4 هم فقط در حضور تموزلامید و داکاربازین تغییر معنادار پیدا می کند. با توجه به نتایج پژوهش انجام شده ، استفاده هدفدار از داروهای شیمی درمانی ، در راستای عدم بیان ایمونوچک پوینت¬ها ، باعث افزایش شانس بهبود بیمار می شود. اثر داروهای شیمی درمانی رایج در درمان ملانوما در ایران (وین بلاستین و داکاربازین و تموزلامید) بر روی ایمونوچک¬پوینت¬ها (VISTA, PD-L1, CTLA-4) و عملکرد آن¬ها مطالعه شود.

AbstractMelanoma is one of the most dangerous skin cancers. Melanoma is begun in melanocytes. Melanoma is less common than basal cell carcinoma and Squamous Cell carcinoma, more metastasis ability led to more death rate. Diagnose in wrong way caused to outbreak of dermatology and pathology problems which led to low treatment rate.Throughout the year’s treatment and medicine has been developed. Immunotherapy is one of new method which is used for treating patients with immune checkpoints.Immune checkpoints are natural part of immune system that block severe immune system response. In this research, A375 cells were first cultured and the effect of common chemotherapy drugs in the treatment of melanoma in Iran (vinblastine, dacarbazine and temozlamide) on immunocheckpoints (VISTA, PD-L1, CTLA-4) and function They were checked. In this way, the amount of RNA expression was measured and then using RNA, cDNA was synthesized. Using microarray, the expression level of PD-L1, CTLA-4, VISTA and some apoptosis genes such as CASP-8, CASP-3, CASP-9, BAX were measured.Finally, it was found that temozlamid and dacarbazine effectively increase the expression of CASP-3, but there was no change in the expression of CASP-3 in the treatment with vinblastine. Also, changes in the expression of CASP-8 and CASP-9 were observed in the treatment of melanoma with temozlamide and dacarbazine. Also, in this research, it was found that the expression level of immunocheckpoint blockers can change after chemotherapy. Vinblastine has no effect on the expression of CTLA-4 and VISTA, but increases the expression of PD-L1. Dacarbazine and temozalamide do not affect the expression of VISTA, but reduce the expression of CTLA-4 and PD-L1. These results show the importance of combining two methods of immunotherapy by immunocheckpoints inhibitor and chemotherapy. In short, the expression of VISTA does not change significantly, but PD-L1 changes significantly in the presence of three drugs, and CTLA-4 changes significantly only in the presence of temozlamid and dacarbazine.Immune checkpoint inhibitors prompt immune system response in front of cancer cells. According to the results of the research, the targeted use of chemotherapy drugs, in line with the lack of expression of immunocheck points, increases the chance of the patient's recovery.

Analysis impression of chemotherapy medicine on immune checkpoint inhibitors in Melanoma

‏‏ربانی فرد‏،

رقیه‏

تهیه کننده

خلج کندری

برادران،

محمد ‏

بهزاد‏

استاد راهنما

استاد مشاور

‏ تبریز