پ۲۴۸۸۸
per
بررسی اثر توام داروی Epirubicin و سرکوب بیان ژن HHLA2 بر رشد و مهاجرت سلول های استئوسارکومای انسانی
نورا کریم آهنگر
علوم طبیعی
۱۴۰۰
۶۶ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
زیست شناسی گرایش ژنتیک
۱۴۰۰/۰۶/۲۰
چكيده: استئوسارکوما یک بدخیمی نادر و تهاجمی استخوان است که عمدتا کودکان و نوجوانان را تحت تاثیر قرار می دهد. درمان فعلی برای استئوسارکوما شامل شیمی درمانی وعمل جراحی است. با این حال بیماران مبتلا به استئوسارکومای پیشرفته و متاستاتیک همچنان میزان بهبودی ضعیفی دارند. نرخ بقای ۵ ساله برای بیماران مبتلا به استئوسارکومای اولیه حدود ۶۵٪ و برای بیمارانی که دچار متاستاز شده اند کمتر از ۲۰٪ است. بنابراین با توجه به ناکارامد بودن استراتژی های درمانی موجود، ایجاد روش های درمانی نوین یک نیاز فوری است. بیان ژن HHLA2 در بسیاری سرطان ها از جمله استئوسارکوما، سرطان معده، سرطان ریه افزایش می یابد. این ژن ممکن است یک بیومارکر مفید در درمان بالقوه ی سرطان باشد. در مطالعه حاضر ، اثر درمان با Epirubicin و paclitaxel به تنهایی و همراه با HHLA2 siRNA بر سلولهای MG-63 ارزیابی شد. از روش MTT برای تعیین IC50 داروهای Paclitaxel و Epirubicin و همچنین تعیین زنده مانی سلول استفاده شد. سپس از فلوسایتومتری برای ارزیابی القای آپوپتوز از طریق Annexin V/PI و تعیین وضعیت چرخه سلولی استفاده شد. سطوح بیان ژن HHLA2 و ژنهای مربوط به آپوپتوز، از جمله BAX ، BCL-2 و Caspase-3، توسط qRT-PCR سنجیده شدند. در نهایت، از تست خراش و colony formation assay به ترتیب برای ارزیابی اثر مهاری HHLA2 siRNA به همراه داروی paclitaxel بر مهاجرت و توانایی سلول ها در تشکیل کولنی استفاده شد. نتایج به دست آمده نشان داد که HHLA2 siRNA به همراه Paclitaxel نقش مهمی در القای آپوپتوز و همچنین مهار رشد و مهاجرت در سلول های MG-63 دارند و می توانند به عنوان یک استراتژی درمانی جدید در درمان استئوسارکوما مورد بررسی بیشتری قرار گیرند.
Abstract: Osteosarcoma is a rare and invasive bone cancer that mainly affects children and Adolescents. Current treatment for osteosarcoma includes chemotherapy and surgery. However, patients with advanced and metastatic osteosarcoma still have a poor recovery rate. The 5-year survival rate is about 65% for patients with primary osteosarcoma and less than 20% for patients with metastasis. Therefore, due to the inefficiency of Existing treatment strategies, the development of new treatments is an urgent need. HHLA2 gene expression is increased in many cancers such as osteosarcoma, gastric cancer, lung cancer. This gene may be a helpful biomarker for cancer treatment. In the present study, the effect of Epirubicin and Paclitaxel treatment was evaluated alone and in combination with HHLA2 siRNA on the MG-63 cells. The MTT assay was used to determine the IC50 of Paclitaxel and Epirubicin drugs and also cell viability. Then Flow cytometry test was used to assess apoptosis induction through Annexin V/PI and determine cell cycle condition. The expression levels of HHLA2 and apoptosis-related genes, including BAX, BCL-2, and Caspase-3, were measured through qRT-PCR. Finally, wound healing and colony formation assays were used to assess the inhibitory effect of HHLA2 siRNA in combination with Paclitaxel on migration and the ability of cells to grow into colonies, respectively. The results showed that HHLA2 siRNA and Paclitaxel combination have an essential role in inducing apoptosis and also Inhibition of growth and migration in MG-63 cells and can be further investigated as a new therapeutic strategy in the treatment of osteosarcoma
Investigating the combined effect of HHLA2 gene suppression and Epirubicin on the growth and migration of human osteosarcoma cells
کریم آهنگر،
نورا
تهيه کننده
خلج کندری،
برادران،
مختارزاده،
محمد
بهزاد
احد
استاد راهنما
استاد راهنما
استاد مشاور
تبریز
