عنوان

بررسی تغییرات بیان ژن فاکتور محرک کلوني گرانولوسيت در سلولهاي چند هسته‌اي خون محيطي گاوهاي مبتلا به مرگ روياني

پ۲۷۳۹۳

per

بررسی تغییرات بیان ژن فاکتور محرک کلوني گرانولوسيت در سلولهاي چند هسته‌اي خون محيطي گاوهاي مبتلا به مرگ روياني

سالار فرشباف نوبريان

دامپزشکی

۱۴۰۱

۶۴ص.

سی دی

دکتری

دامپزشکی علوم درمانگاهی

۱۴۰۱/۰۶/۲۹

از دست دادن آبستنی در مراحل مختلف آبستنی می‌تواند به دلایل مختلفی اتفاق بیفتد اما افزايش ميزان مرگ و مير روياني در مراحل اوليه آبستني يکي از نگراني هاي صنعت گاو شيري در حال حاضر است. مطالعه فعلی تلاش برای کوتاه کردن روزهاي باز درگاوهای شیری با تشخیص آبستنی در مراحل اولیه آبستنی با استفاده از سايتوکاينها می¬باشد. محرک کلوني گرانولوسيتهاG-CSF)) یکی از سایتوکاین‌های‌ خونساز است که عمدتا توسط سلول¬های مونوسیت و ماکروفاژ تولید و موجب تکثیر و تمایز سلولهای خونساز میلوئیدی می‌شود. فرض بر اين است اين سايتوکاينها همزمان با توليد اينترفرون‌ها در رحم در خون محيطي افزايش مي‌يابند. لذا هدف از این پژوهش مقايسه تغييرات بیان این ژن در دامهاي آبستن و غيرآبستن دچار مرگ زودرس جنيني يا ديررس جنيني در گاو شيري است. برای این منظور از 30 راس گاو چند شکم زاییده و تلیسه نمونه خون EDTA دار در روزهای 15 تا 24 ، 25 تا 34 و 35 تا 44 پس از تلقیح اخذ شد. دامها به دو گروه عمده آبستن و غير آبستن بر اساس ميزان پروژسترون در روز 21 تقسيم شده سپس گاوهاي غیرآبستن نیز به دامهای با مرگ زودرس جنين (روز 1 تا26) و مرگ ديررس جنين (روز 26 تا 45) طبقه¬بندی شدند. سپس نسبت به استخراج نوتروفیل¬ها از نمونه خون اقدام و بیان ژن G-CSF و ISG 15 با استفاده از تکنیک Real-time PCR نيمه کمي اندازه¬گیری شد. نتایج نشان داد میزان پروژسترون در پلاسمای خون گاوهای آبستن در فاصله¬ی زمانی15 تا 24 ، 25 تا 34 و 35 تا 44 روز بعد از تلقیح بطور معناداری نسبت به گاوهای غیرآبستن بالاتر بود. بررسی میزان گلوگز در پلاسمای خون گاوهای آبستن در فاصله زمانی 15 الی 24)001/0 (P< بطور معناداری نسبت به میزان گلوگز پلاسمای خون گاوهای غیرآبستن بالاتر بود. میزان کلسترول در فاصله¬ی زمانی 25 الی 34 بعد از تلقیح در پلاسمای گاوهای آبستن اختلاف آماری معناداری) 05/0 P< (با میزان کلسترول در پلاسمای خون گاوهای غیرآبستن داشت. بررسی میزان تری¬گلیسرید در پلاسمای خون گاو آبستن در فاصله زمانی 15 الی 24، 25 الی 34 و 35 الی 44 روز بعد از تلقیح اختلاف آماری معناداری با میزان تری¬گلسیرید پلاسمای خون گاوهای غیرآبستن در همان روزها را نداشت. بیشترین میزان بیان ژن G-CSF3 در فاصله زمانی 15 الی 24 در نوتروفیل خون گاوهای آبستن مشاهده شد. بیشترین میزان بیان ژن ISG15 در فاصله زمانی 35 الی 44 روز بعد از تلقیح مشاهده شد. نتایج نشان داد این ژن¬ها می¬توانند به عنوان تشخیص مرگ زودرس جنینی و دیررس جنینی کاربرد داشته باشند.

Pregnancy losses at different stages of pregnancy can occur for various reasons, but the increase in embryonic mortality in the early stages of pregnancy is one of the concerns of the dairy industry at present. The current study is an attempt to shorten the open days of dairy cows by detecting pregnancy in the early stages of gestation using cytokines. Granulocyte colony stimulator (G-CSF) is one of the hematopoietic cytokines that is mainly produced by monocytes and macrophages and causes the proliferation and differentiation of myeloid hematopoietic cells. It is believed that these cytokines increase in peripheral blood simultaneously with the production of interferons in the uterus. The aim of this study is therefore to compare the changes in the expression of this gene in pregnant and non-pregnant animals with early and late fetal death in dairy cows. For this purpose, EDTA blood samples were taken from 30 multiparous cows and heifers on days 15 to 24, 25 to 34 and 35 to 44 after inoculation. Cattle were divided into two main groups, pregnant and non-pregnant, based on day 21 progesterone levels, then non-pregnant cows were classified into early fetal death (day 1-26) and late fetal death (day 26-45) animals. . Then, neutrophils were extracted from the blood sample, and gene expression of G-CSF and ISG 15 was measured using a semi-quantitative Real-time PCR technique. . The results showed that the amount of progesterone in the blood plasma of pregnant cows was significantly higher than that of non-pregnant cows at the time interval of 15-24, 25-34 and 35-44 days after insemination. Examination of blood plasma glucose levels of pregnant cows between 15 and 24 (P<0.001) was significantly higher than blood glucose levels of non-pregnant cows. The plasma cholesterol level of cows between 25 and 34 hours after inoculation of pregnant cows had a statistically significant difference (P<0.05) with the blood plasma cholesterol level of non-pregnant cows. Checking the amount of triglycerides in the blood plasma of pregnant cows at the time interval of 15-24, 25-34 and 35-44 days after inoculation. There was no significant statistical difference with the blood plasma triglyceride levels of non-pregnant cows on the same days. The highest level of G-CSF3 gene expression was observed in the blood neutrophils of pregnant cows between 15 and 24 days. The highest level of ISG15 gene expression was observed between 35 and 44 days. It was observed after inoculation. The results showed that these genes can be used to diagnose early and late fetal death.

Investigation of changes in granulocyte colony-stimulating factor gene expression in peripheral blood polymorphic nuclei cells of cows suffering from embryonic death

فرشباف نوبريان،

سالار

تهیه کننده

اسدپور،

فيروزامندي،

فيروزامندي،

رضا

معصومه

معصومه

استاد راهنما

استاد مشاور

استاد راهنما

‏ تبریز