عنوان

بررسی اثرات آنتی‌اکسیدانی عصاره‌ی الکلی گیاه باکوپا مونرو بر بهبود حافظه‌ی فضایی و کاهش استرس اکسیداتیو طی بیماری مالتیپل اسکلروزیس در موش‌های صحرایی نر

پ۲۷۰۱۸

per

بررسی اثرات آنتی‌اکسیدانی عصاره‌ی الکلی گیاه باکوپا مونرو بر بهبود حافظه‌ی فضایی و کاهش استرس اکسیداتیو طی بیماری مالتیپل اسکلروزیس در موش‌های صحرایی نر

سودا آقایی نوجه‌ده

علوم طبیعی

۱۳۹۵

۱۳۱ص.

سی دی

کارشناسی ارشد

زیست‌شناسی گرایش فیزیولوژی

۱۳۹۵/۰۶/۱۳

مقدمه و بیان مسئله: بیماری مالتیپل اسکلروزیس (MS) نوعی بیماری سیستم عصبی مرکزی است که در آن میلین رشته‌های عصبی تخریب می‌شوند. مکانیسم‌های بروز بیماری مالتیپل اسکلروزیس (MS) هنوز به‌طور کامل شناخته‌نشده است ولی تحقیقات انجام‌شده بیانگر این است که این بیماری اساس ایمونوپاتولوژیک دارد و عوامل ژنتیکی و محیطی نیز در بروز آن مؤثر می‌باشند. استرس اکسیداتیو و به دنبال آن آپوپتوز از دیگر عواملی هستند که در پاتوژنز بیماری مالتیپل اسکلروزیس (MS) مطرح‌شده‌اند. استرس اکسیداتیو ناشی از یک عدم تعادل بین تولید گونه‌های باز فعال اکسیژن (ROS) و توانایی سیستم زیستی برای سم‌زدایی این واسطه‌های فعال است. استرس اکسیداتیو سبب القای آسیب اکسیداتیو در هیپوکامپ و آسیب سلول‌های هرمی می‌شود. هیپوکامپ بالغین یک مرکز حیاتی برای فرآیندهای یادگیری و حافظه است که به‌شدت نسبت به بیماری‌های نورولوژیک نظیر MS آسیب‌پذیر است. قشر مغز، آمیگدال و بخصوص هیپوکامپ نقش اساسی در تشکیل و ذخیره‌سازی حافظه‌ی فضایی دارند.باکوپا مونرو گیاهی از خانواده‌ی میمونیان است. مطالعات نشان داده‌اند که عصاره‌ی باکوپا مونرو فعالیت‌های یادگیری و حافظه را تحت تأثیر قرار می‌دهند و دارای محدوده‌ی وسیعی از فعالیت‌ها شامل اثرات ضد تشنج، ضدافسردگی، ضد میکروبی و آنتی‌اکسیدانی بوده و به‌عنوان گیرنده‌ی رادیکال‌های آزاد عمل می‌کند.هدف پژوهش حاضر بررسی اثرات عصاره‌ی باکوپا مونرو بر حافظه‌ی فضایی و پارامترهای استرس اکسیداتیو طی بیماری مالتیپل اسکلروزیس است. ازاین‌رو در این پایان‌نامه اثر ریز تزریق کوتاه‌مدت و بلندمدت عصاره‌ی الکلی باکوپا مونرو با دو دوز متفاوت بر روی حافظه فضایی و میزان پارامترهای استرس اکسیداتیو در هیپوکامپ مدل‌های تجربی مالتیپل اسکلروزیس موردبررسی قرار گرفت.مواد و روش: 70 سر رت نر نژاد ویستار با محدوده وزنی (50±250) گرم به‌صورت تصادفی به ده گروهادامه چکیده پایان‌نامههفت‌تایی شامل گروه کنترل، گروه شاهد، گروه عصاره‌ی باکوپا مونرو با غلظت μg/rat5، گروه عصاره‌ی باکوپا مونرو با غلظت μg/rat10، گروه MS کوتاه‌مدت، گروه MS بلندمدت، گروه MS با تیمار کوتاه‌مدت عصاره‌ی باکوپا مونرو μg/rat5، گروه MS با تیمار کوتاه‌مدت عصاره‌ی باکوپا مونرو μg/rat10، گروه MS با تیمار بلندمدت باکوپا مونرو 5μg/rat و گروه MS با تیمار بلندمدت باکوپا مونرو 10μg/rat تقسیم شدند. القای MS با تزریق مستقیم اتیدیوم بروماید0/01 % به ناحیه CA1 هیپوکامپ انجام گرفت. گروه‌های تیمار یک هفته پس از القای MS عصاره‌ی الکلی باکوپا مونرو را به مدت 3 و 7 روز و با دو دوز 5μg/rat و μg/rat10 دریافت نمودند. بعد از اتمام دوره‌های تیمار، از حیوانات تمامی گروه‌ها آزمون ماز آبی موریس به عمل آمد. در خاتمه، نمونه‌برداری از هیپوکامپ انجام گردید و میزان پارامترهای استرس اکسیداتیو در این ناحیه با استفاده از روش‌های FRAP، MDA و آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی CAT و SOD سنجش گردید. تجزیه‌وتحلیل اطلاعات حاصله به روش آنالیز واریانس یک‌طرفه انجام شد.یافته‌ها: نتایج این بررسی نشان داد که تیمار کوتاه‌مدت و بلندمدت عصاره الکلی باکوپا مونرو به‌طور معنی‌داری حافظه فضایی در مدل‌های تجربی MS را بهبود بخشید (P <0/001). همچنین میزان پارامترهای استرس اکسیداتیو در گروه‌های MS با تیمار عصاره الکلی باکوپا مونرو کاهش معنی‌داری را نسبت به گروه‌های شاهد MS نشان داد (P <0/001).بحث: عصاره باکوپا مونرو حاوی باکوسیدها است که قادرند با گرفتن و پاک کردن گونه‌های باز فعال اکسیژن، وضعیت ردوکس سلولی و متابولیسم انرژی را حفظ نموده و بدین‌سان اثرات حفاظتی خود را اعمال نمایند؛ بنابراین می‌توان نتیجه‌گیری نمود که ریز تزریق عصاره الکلی باکوپا مونرو از طریق کاهش بار اکسیداتیو و تعدیل مارکرهای استرس اکسیداتیو در هیپوکامپ، حافظه فضایی در رت‌های نر مبتلا به MS را به‌طور معنی‌داری بهبود می‌بخشد.

AbstractMultiple sclerosis is a disease of the central nervous system in which the myelin of nerve fibers is damagd. Mechanisms of multiple sclerosis disease is still not fully understood. Research has shown that the disease has immunopathologic basis. But genetical and environmental factors also influence it. Oxidative stress and subsequent apoptosis are other factors that are effective in multiple sclerosis Pathogenesis. Oxidative stress results from an imbalance between the production of reactive oxygen species and a biological system's ability to detoxify the reactive intermediates. Oxidative stress Induce oxidative damage in the hippocampus and pyramidal cells. Adult hippocampus is a vital center for learning and memory processes that are highly vulnerable to neurological diseases such as multiple sclerosis. Cortex, amygdal and particularly hippocampus have crucial role in formation and storage of spatial memory. Bacopa monniera is a plant of the family scrophulariaceae. Studies have shown that extracts BM activities affect learning and memory, and a wide range of activities including the effects of anticonvulsants, antidepressants, anti-microbial and anti-oxidant and acts as a free radicals reseptor. The aim of this research is to investigate the effect of Bacopa monniera extract on spatial memory and oxidative stress parameters during multiple sclerosis. Accordingly, in this thesis the effect of short-term and long-term microinjection of ethanolic extract of Bacopa monniera with two different doses on spatial memory and levels of oxidative stress parameters in the hippocampus of experimental models of MS was investigated.Material and methods: 70 adult male Wistar rats weighting 250±50g were randomly divided into ten main groups (n=7): control, saline (0.9%), Bacopa monniera extract 5μg/rat, Bacopa monniera extract 10μg/rat, EB (0.01%) or lysion group (3 and 7) days, four Bacopa monniera treated groups which was treated by Bacopa monniera extract (5μg/rat and 10μg/rat) for 3 and 7 consecutive days, one week after MS induction. Characteristic of learning and spatial memory was assessed using Morris Water Maze for 5 consecutive days following the treatment period. After termination of behavioral testing days, animals were decapitated and the bilateral hippocampi dissected to measure levels of oxidative stress parameters using method FRP, MDA and antioxidant enzymes such as SOD and CAT. Statistical analysis was performed using analysis of variance (ANOVA).Results: Results showed that short-term and long-term treatment with ethanolic extract of Bacopa monniera significantly improved spatial memory in experimental models of MS(P< 0.001). Also, the level of oxidative stress parameters in the MS groups treated with Bacopa monniera extract was significantly lower than those of control MS groups (P< 0.001).Discussion: Bacopa monniera extract contains a variety of coumarins such as bacosids which are able to scavenge reactive oxygen species and maintain cellular redox status and energy metabolism; thus exert their protective effects. So it can be concluded that microinjection of ethanolic extract of Bacopa monniera significantly ameliorates learning and spatial memory, through reduction of oxidative stress and modulation of oxidative stress markers in the hippocampus of male rats stricken with MS.

Study of the Anti-Oxidant Effect of Bacopa monniera Extract on the Ricovery of Spatial Memory and Oxidative Stress during Multiple Sclerosis in Male Rats

آقایی نوجه‌ده،

سودا

تهيه کننده

حاتمی نعمتی،

ملک احمدی،

‏‏بانان‌خجسته‌،

حمیرا

محمد

سید مهدی

استاد راهنما

استاد مشاور

استاد مشاور

تبریز