۱۴۱۰۸پ
per
بررسی تاثیر ضد سرطانی مخلوط آرتمیزینین آهن و میکونازول بر روی سلولهای لاین)۴T۱ سرطان پستان موش (با تاثیر و بدون تاثیر لیپوپلی ساکارید باکتری سالمونلا تیفی موریوم
/مهرداد رنجبران
: دامپزشکی
، ۱۳۹۲
، راشدی
چاپی
دکتری
دامپزشکی
۱۳۹۲/۰۶/۱۳
تبریز
جهت پیشگیری از عوارض مصرف داروهای شیمیایی می توان از جایگزین گیاهی این داروها استفاده کرد .آرتمیزینین یکی از این داروها است که از گیاهی بنام درمنه استخراج می شود .آرتمیزینین در واکنش با آهن تولید رادیکال های آزاد می کند .این رادیکال های آزاد باعث آپوپتوز و مرگ سلولی می شوند .میزان آهن در سلول های سرطانی نسبت به سلول های طبیعی به مراتب بیشتر است، بنابراین این سلول ها به صورت انتخابی نسبت به آرتمیزینین حساس تر هستند .در مطالعات مختلف نیز تاثیر آرتمیزینین روی انواع مختلفی از سرطان گزارش شده است .اسید های چرب با زنجیر کوتاه مانند بوتیریک اسید در پیشگیری انواعی از سرطان موثر بوده اند .در مطالعات اخیر نیز نشان داده شده است که میکونازول می تواند تکثیر سلولی را در انواعی از سرطان مهار کند .هدف از این مطالعه بررسی تاثیر ضد سرطانی آرتمیزینین، آهن، میکونازول، بوتیریک اسید و نیز لیپوپلی ساکارید باکتری سالمونلا تیفی موریوم و بررسی اثر تقویتی این ترکیبات روی اثر ضد سرطانی آرتمیزینین و نیز یافتن ترکیبی از این مواد بود که بدون ایجاد نکروز باعث توقف رشد سلول های توموری گردد .رده سلولی مورد استفاده نیز رده سرطان پستان موش (۴T۱) بود که از لحاظ خصوصیات توموری شباهت زیادی به سلول های سرطان پستان انسان دارد .در این مطالعه از ۱۸ گروه کشت سلول استفاده شد که یک گروه به عنوان گروه کنترل بود و ۱۷ گروه تیمار که غلظت های مختلفی از آرتمیزینین(۱۵/۰ ،۳/۰ ، ۶/۰ و ۲/۱) و غلظت های ثابت میکونازول، بوتیریک اسید، آهن و LPS را دریافت کردند که برای بررسی تاثیر هر کدام از این ترکیبات یک گروه اختصاص داده شده بود و جهت بررسی اثر تقویتی هر کدام بر روی سایر ترکیبات، در بقیه گروه ها ترکیب‌های مختلفی از این مواد به همراه هم مورد استفاده قرار گرفته بود ۳۶ .ساعت پس از اضافه کردن داروها، از محیط کشت و بخشی از سلول ها جهت آزمایش های بیوشیمیایی نمونه برداری گردید و بقیه سلول ها با هماتوکسیلین-ائوزین رنگ آمیزی شد و ضایعات آن زیر میکروسکوپ نوری مورد بررسی قرار گرفت .میزان LDH و MDA نیز توسط دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری گردید .تغییرات سطح آنزیم LDH ، به عنوان معیار تخریب و مرگ سلولی مورد ارزیابی قرار گرفت .یکی دیگر از تغییرات ایجاد شده در طول تخریب سلول، افزایش سطح مالونیل دی آلدئید در اثر واکنش اسید های چرب غشای سلولی با رادیکال های آزاد است، بنابراین می تواند نشان دهنده تخریب غشا و آسیب سلولی باشد، که در این مطالعه نیز اندازه گیری گردید .نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که آرتمیزینین به همراه آهن و نیز به همراهLPS ، میزان LDH و MDA در سلول و محیط کشت را به طور چشمگیری افزایش می دهد ولی بوتیریک اسید و میکونازول باعث افزایش کمی در میزان آن ها می شود .یافته های پاتولوژیک نیز این نتایج را تایید می کند .با توجه به این نتایج، آرتمیزینین به صورت وابسته به دوز باعث القای آپوپتوز در رده سلولی ۴T۱ شد و مخلوط آن با آهن، میکونازول و بوتیریک اسید باعث افزایش آپوپتوز گردید .ولی مرگ سلولی ایجاد شده توسط LPS و میکونازول بیشتر متمایل به نکروز بود تا آپوپتوز
Herbal drugs can be used as an alternative for chemical drugs in order to prevent their side effects. Artemisinin is one of these herbal drugs that is extracted from a plant named Artemisia annua. Artemisia has been used for centuries in traditional medicine of Iran and China for treating malaria and controling fever and diarrhea. Artemisinin is a sesquiterpene lactone peroxide containing an endoperoxide bridge, which forms free radicals when it reacts with iron and these free radicals can lead to cell death and apoptosis of the cells. Cancer cells have higher rates of iron uptake and are thus selectively more susceptible to the cytotoxicity of the artemisinin. Artemisinin is reported to be effective against various types of cancer. Short chain fatty acids have been proposed to be useful for the prevention of some cancer. Recent studies demonstrated that miconazole could terminate cell proliferation in a wide variety of tumor cells. It acts through different pathways such as induction of apoptosis, dysfunction of ion pumps and disrupting the function of free radical neutralizing enzymes in order to terminate tumor cells. There are some studies that combination of butyric acid with artemisinin and also the combination of miconazole with artemisinin have been used against tumor cell lines, but effect of the combination of all these drugs together have not been studied till now. So in this study we used Artemisinin, miconazole, butyric acid and salmonella typhymoriums lypopolysaccharide alone and in combination with each other on 4T1 cell line (murine breast cancer cell line) and analyzed the biochemistry and pathologic results in order to detect their anticancer effect and any synergy between them. When a cell faces injury, cell membrane and organell membranes become permeable to macromolecules like enzymes, so the level of LDH enzyme rises up in cell and also its peripheral environment. So we measured the changes of LDH level as an indicating factor for cell injury and death. One of the other changes that occurs in cell injury, specially in an injury that is caused by free radicals, is reaction of the membranes fatty acids with free radicals and Malonyl Dialdehyde is on of the major end products of this reaction. So a rise in the level of Malonyl Dialdehyde can show membrane injury and disfunction. In this study artemisinin (0.6 gr/ml) caused apoptosis in 4T1 cell line in a dose dependent manner and its combination with Iron (1 gr/ml), Miconazole (55mol) and Butyric acid (3 mol) promoted apoptosis. The cell death caused by LPS was rather necrosis than apoptosis
رنجبران، مهرداد
شهباز فر،امیر علی، استاد راهنما
زارع، پیمان، استاد مشاور
طایفی نصر آبادی، حسین، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
