بررسی تاثیر انتخابی ویتامین ث بر روی رده سلولی LS174T به عنوان مدل توموری در ژن KRAS جهش یافته
سارا اکبرزاده
علوم طبیعی
۱۳۹۹
۹۴ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
ژنتیک
۱۳۹۹/۰۶/۱۹
سابقه و هدف : سرطان کلورکتال (CRC) یکی از شایع¬ترین سرطان¬ها در ایران و جهان است که در 20-30% موارد جهش در ژن KRAS رخ¬ می¬دهد. پروتوانکوژن KRAS پروتئین 21 کیلودالتونی Ras را کد می¬کند که به GDP/GTP متصل می¬شود و از طرفی با غشای پلاسمایی در ارتباط است. وقوع جهش در ژن KRAS با حذف فعالیت GTPase فعالیت پیوسته پروتئین را در مسیر پیام رسانی القا می¬کند. از طرفی ویتامین ث بطور انتخابی سلول¬های KRAS جهش یافته را در سرطان کلورکتال از بین می¬برد. مطالعه ما در راستای ارزیابی تیمار رده سلولی LS174T بعنوان مدل توموری دارای جهش KRAS با ویتامین ث انجام شده است.مواد و روش پژوهش: در این مطالعه cDNA لاین سلولی LS174T بعنوان نمونه سرطان کلورکتال حاوی جهش ژن KRAS سنتز شد سپس cDNA حاصل با استفاده از روش Real time PCR تکثیر شد و تاثیر انتخابی ویتامین ث بر روی این رده سلولی در غلظت¬های 0،5،10،15 میلی مولار از ویتامین ث در سه زمان 24،48 و 72 ساعت مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته¬ها: نتایج حاصل ازپژوهش نشان میدهدکه غلظت¬های بالای ویتامین ث نقش بیشتری درکشتن سلول-های حاوی KRAS جهش یافته ایفا می¬کندومدت زمان قرارگرفتن درمعرض تیمار چندان موثر نیست.نتیجه¬گیری: با توجه به تاثیر ویتامین ث در کشتن سلول¬های توموری، این ویتامین می¬تواند بعنوان عامل درمانی در سرطان مورد استفاده قرار گیرد.
Background and purpose: Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers in Iran and in the world that 20-30% of mutations occur in the KRAS gene. The KRAS proto-oncogene encodes the 21 kDa Ras protein, which binds to GDP/GTP and binds to the plasma membrane. Mutations in the KRAS gene induce continuous protein activity in the messaging pathway by deleting GTPase activity. On the other hand, vitamin C selectively kills mutant KRAS cells in colorectal cancer. Our study was performed to evaluate the treatment of the LS174T cell line as a tumor model with KRAS mutation with vitamin C. The aim of this study is to evaluate the effect of this vitamin in culture medium containing mutated cell lines in the KRAS gene. Materials and Methods: In this study, LS174T cell line cDNA was synthesized as a sample of colorectal cancer containing KRAS gene mutation and amplified using Real-time PCR method and the selective effect of vitamin C on this cell line at concentrations of 0, 5, 10, 15 mM of vitamin C was evaluated at three times 24, 48 and 72 hours. Results: The results of the study show that high concentrations of vitamin C play a great role in killing cells containing mutated KRAS and also the effect of high concentrations on killing is more than the time of exposure with vitamin C. Conclusion: Due to the effect of vitamin C in killing tumor cells, this vitamin can be used as a therapeutic agent in cancer.
Evaluation of the selective effect of vitamin C on the LS174T cell line as a tumor model in the mutated KRAS gene