۱۰۴۴۷پ
per
بررسی میزان رشد، تکثیر و پیری سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی (MSCs) رت در حضور ال-کارینتین و نیز پتانسیل تمایزی این سلولهابه استخوان و چربی
/حلیمه مبارک
: دامپزشکی
چاپی
دکترای حرفه ای
دامپزشکی
۱۳۹۴/۰۴/۲۵
تبریز
سلولهای بنیادی، سلولهای غیر تمایزیافته‌ای هستند که توانایی تقسیم مداوم و پتانسیل رژنره کردن نواقص بافتی حین پیوند را دارند و در صورت شرایط محیطی مناسب In vivo یا In vitro می‌توانند تمایزهای چندگانه به سلولهای فیبروبلاست، استئوبلاست، کندروسیت، آدیپوسیت و هپاتوسیت پیدا کنند .یکی از مشکلات اصلی در سلول درمانی، پیری و از دست دادن سرعت رشد و بقای سلول‌صها است .از آنجائی که تولید رادیکال‌های آزاد در روند پیری مؤثر است، استفاده از ترکیبات آنتی‌اکسیدانی کمک شایانی در مهار این رادیکال‌ها و در نتیجه جلوگیری از پیری سلولی می‌کند .آنتی‌اکسیدان‌ها می‌توانند سیستم‌های بیولوژیک را در مقابل رادیکال‌های آزاد و اثرات گونه‌های فعال اکسیژن حفاظت کنند و پیشرفت بسیاری از بیماری‌های مزمن، پراکسیداسیون لیپیدها و پیری را به تأخیر بیاندازند . هدف از این مطالعه بررسی اثر ال-کارنیتین بر رشد، تکثیر و پیری سلولهای بنیادی در سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی رت (rADSC) است .در این مطالعه rADSCs از ناحیه مغابنی جدا و کشت داده شد .از لحاظ بیان نشانگرهای سطحیCD۹۰ ،CD۷۳ ، CD۳۴ و CD۴۵ مورد ارزیابی قرار گرفتند .این سلول‌ها به دو رده سلولی چربی و استخوان تمایز داده شدند و سپس پتانسیل تمایزی به بافت استخوان و چربی به روشPCR - RT مورد ارزیابی قرار گرفت rADSCs .با غلظت‌های۱/۰ ، ۲/۰ و ۴/۰ میلی مولار ال-کارنیتین در سه زمان۲۴ ، ۴۸ و ۷۲ ساعت تیمار شدند و درصد سلولهای زنده با روش MTT و تریپان بلو مشخص شد و پیری این سلول ها با روش رنگ‌آمیزی بتاگالاکتوزیداز ارزیابی گردید .آنالیز آماری نتایج به کمک تست ANOVA با سطح اطمینان ۹۵ درصد ارزیابی گردید .بر طبق نتایج این مطالعه در غلظت‌های۱/۰ ، ۴/۰ و مخصوصا ۲/۰ میلی مولار ال-کارنیتین در زمان ۴۸ ساعت، بیشترین درصد بقای سلولی مشاهده شد که معنی‌دار می-باشد .(>(۰۵/۰P به‌علاوه کاهش در پیری rADSCs تحت تیمار با غلظت‌های مختلف ال-کارنیتین مشاهده شد .با توجه افزایش درصد سلول‌صهای زنده، افزایش تکثیر و رشد و کاهش پیری rADSCs تحت تیمار با غلظت‌های۱/۰ ، ۴/۰ و مخصوصا /۰ ۲ میلی مولار ال-کارنیتین می‌صتوان از ال-کارنیتین در محیط کشت سلول‌صهای rADSCs در جهت بهینه کردن شرایط کشت استفاده کرد که می‌صتواند در زمینه سلول درمانی کمک‌کننده باشد
Stem cells are undifferentiated cells that have the ability to divide continuously and tissue regeneration potential in defected tissues during the transplantation and thay can differentiated into multiple cells such as fibroblast, osteoblast, Chondrocyte, adipocyte and hepatocyte in enviromental conditions in vitro or in vivo. One of the main problems in cell therapy is aging and loss of growth and survival of cells. Since the production of free radicals in the aging process is effective, the use of antioxidant compounds help in scavenging free radicals and preventing the aging of cells. Antioxidant can protect biological systems against free radicals and the effects of Reactive Oxygen Species and also can delay the development of many chronic diseases, lipid peroxidation and aging. The aim of this study is evaluate the effects of L-carnitine on growth, proliferation and aging of stem cells in rat adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (rADSC). rADSCs in the inguinal region was isolated and cultured. In terms of the expression of surface markers CD90, CD73, CD34 and CD45 were evaluated. These cells were differentiated into bone and fat cells. rADSCs were treated with 0.1, 0.4, and especially 0.2 mM concentrations of L-carnitine in 24, 48 and 72 hours and viability of living cells was determined by MTT and Trypan-blue; then differentiation potential to bone and fat tissue were evaluated by RT- PCR. rADSCs aging was evaluated by Beta-galactosidase staining. Statistical analysis using ANOVA test was assessed at 95 percent. According to the results of this study at concentrations of 0.1, 0.4 and 0.2 mM L-Carnitine, especially at 48 hours, the highest percentage of cell survival was observed that it was significant )P< 0.05). In addition, the decline in the rADSCs aging treated with different concentrations of L-carnitine was observed. Considering increase in the percentage of live cells, increased proliferation and growth and reduce the aging of L-carnitine at a concentration of 0.1, 0.4, and especially 0.2 mM L-carnitine, we can be used in rADSCs cells culture in order to optimize the culture conditions that can be helpful in the field of cell therapy
مبارک، حلیمه
فتحی، عزت اله، استاد راهنما
ضرغامی، نصرت اله، استاد راهنما
جوانمردی، سارا، استاد مشاور
فرحزادی، راحله، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
