بررسی همراهی چندشکلی های rs1710 و rs9380142 پایین دست ژن HLA-G با اختلال سقط مکرر در جمعیت شمالغرب ایران
مریم قاسمی
پردیس دانشگاه تبریز
۱۳۹۹
۶۹ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
زیست شناسی گرایش ژنتیک
۱۳۹۹/۱۱/۲۹
سقط مکرر شایع ترین عارضه بارداری است که در 1 الی 2 درصد از بیماران در طول سالهای باروری رخ میدهد ﺑﺮﺧﯽ از دﻻﯾﻞ ﻋﻤﺪه RPL ﻧﻘﺎﯾﺺ آﻧﺎﺗﻮﻣﯿﮏ رﺣﻤﯽ، ﻋﻔﻮﻧﺖ ﻫﺎ، ﻓﺎﮐﺘﻮرﻫﺎي ژﻧﺘﯿﮑﯽ، اﯾﻤﻨﯽ و ﻣﺤﯿﻄﯽ ﻣﯽ ﺑﺎﺷﻨﺪ. ﺑﺎ اﯾﻦ وﺟﻮد، در ﺑﺴﯿﺎري از ﻣﻮارد علت RPL نامشخص است. HLA-G داراي ﻳﻚ ﻧﻘﺶ کلیدی ﻣﻬـﻢ در ﻻﻧـﻪ ﮔﺰﻳﻨـﻲ ﺟﻨـﻴﻦ و اﻳﺠـﺎد تحمل اﻳﻤﻨﻮﻟـﻮژي در دوران ﺑـﺎرداري اﺳـﺖ HLA-G در ﺳـﻄﺢ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي ﺗﺮوﻓﻮﺑﻼﺳﺖ ﻛﻪ به درون ﻻﻳﻪ دﺳﻴﺪواي رﺣﻤﻲ ﻧﻔﻮذ ﻣﻲ ﻛﻨﺪ ﺑﻴﺎن میﺷﻮد وﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻳﻚ عامل اﻳﺠﺎدﻛﻨﻨﺪه ﺗﺤﻤـﻞ ﻣـﺎدري ﺟﻨﻴﻨـﻲ ﻣﻌﺮﻓـﻲ ﺷﺪه اﺳﺖ.هدف : مطالعه حاضر , جهت بررسی ارتباط پلیمورفیسم rs1710 و rs9380142 پایین دست ژن HLA-G با اختلال سقط مکرر خود به خودی در جمعیت شمالغرب ایران انجام گرفت.روشها : این مطالعه موردی-شاهدی روی 55 زن بیمار مبتلا به سقط مکرر 59فرد سالم مراجعه کننده به بیمارستان ولیعصر و مرکز آموزشی الزهرا انجام شد.بعد از تهیه نمونه های خونی و استخراج DNA , قطعه 3´UTR ژن HLA-G در هر دو گروه با PCR تکثیر و تعیین توالی شد. پس از توالی یابی ,ژنوتیپ افراد به وسیله نرم افزار Chromas مشخص شدند و سپس اختلاف فراوانی های ژنوتیپی و اللی در دو گروه به وسیله آزمون آماری t-test و نرم افزار SPSS انجام شد.تجزیه و تحلیل آماری داده ها و آزمون K2 در نرم افزار P-value Calculator انجام گردید.یافته ها : برای پلیمورفیسم rs1710 در این مطالعه فراوانی ژنوتیپ های GG , GC , CC در گروه بیمار به ترتیب 22(40%) , 7(12.7%) , 26(47.31%) و در گروه کنترل به ترتیب 26(47.3%) , 8(14.5%) , 21(38.2%) می باشد.و P-value محاسبه شد به ترتیب 0.564 , 0.441 , 1.00 می باشد که تفاوت معنی داری بین دو گروه مشاهده نشد. برای پلیمورفیسم rs9380142 در این مطالعه فراوانی ژنوتیپ های AA , AG , GG در گروه بیمار به ترتیب 37(67.3%) , 14(25.5%) , 4(7.3%) و برای گروه کنترل به ترتیب 35(60%) , 11(20%) , 11(20%) می باشد و P-value محاسبه شده به ترتیب 0.552 , 0.650 , 0.093 می باشد .بنابراین اختلاف معنی داری بین دو گروه مقایسه شده بیمار و کنترل مشاهده نشد.نتیجه گیری : در این پروژه پلیمورفیسم های rs1710 و rs9380142 پایین دست ژن HLA-G با بیماری سقط مکرر با علل نامشخص در جمعیت شماغرب ایران همراهی مثبت نشان ندادند.
Recurrent miscarriage is the most common complication of pregnancy, occurring in 1 to 2% of patients during the reproductive years. Some of the major causes of RPL are uterine anatomical defects, infections, genetic, immune and environmental factors. The cause of RPL is unknown at any time.HLA-G play an important role in embryo implantation and immunological tolerance during pregnancy. The HLA-G is expressed on the surface of trophoblast cells that penetrate into the uterine fibroid layer and has been identified as a factor in maternal-embryonic tolerance.Objective : The aim of the present study was to investigate between rs1710 and rs9380142 polymorphism downstream of the HLA-G gene with recurrent miscarriage in northwestern Iran.Methods : This case-control study was performed on 55 female patients with recurrent spontaneous miscarriage and 59 normal fertility patients referred to Valiasr Hospital and Alzahra Hospital . After preparing blood samples and extracting the DNA , the 3´UTR of the gene was amplified by PCR and sequenced in both groups. After sequencing, the genotypes of the individuals were determined by Chromas software and then the difference in genotypic and allelic frequencies between the two groups was done by t-test and SPSS software. Statistical analysis of data and K2 test were performed in P-value Calculator software.Result : For polymorphism of rs1710 in this study, the frequency of GG, GC, CC genotypes in the patient group were 22 (40%), 7 (12.7%), 26 (47.31%) and in the control group respectively 26 (47.3%), 8 (14.5%) , 21 (38.2%) and P-values were calculated to be respectively 0.564, 0.441, and 1.00, , with no significant difference between the two groups.For polymorphism of rs9380142 in this study, the frequency of AA, AG, GG genotypes in the patient group was 37 (67.3%), 14 (25.5%), 4 (7.3%) and for the control group respectively 35 (60%), 11 (20%), 11 (20%) and the calculated P-values are respectively 0.552, 0.650, 0.093. Therefore, no significant difference was observed between the two groups of patient and control.Conclusion : In this study , polymorphism of rs1710 and rs9380142 downstream of HLA-G gene did not show a positive association with recurrent miscarriage with unknown causes in Northwestern Iranian population.
Association analysis of the HLA-G downstream polymorphisms rs9380142 and rs1710 with the recurrent spontaneous abortion in women from northwestern of Iran