پ۲۵۴۹۰
per
اثر هیدروکسی تیروزول خالص و نانو کپسول با PLGA-PAA بر بیان ژن COLCA1 در رده سلولی HT-29
مسعود حیدری
علوم طبیعی(پردیس)
۱۳۹۹
۷۱ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
ژنتیک مولکولی
۱۳۹۸/۰۴/۲۹
مقدمه: سرطان روده بزرگ سومین سرطان شایع دنیا می¬باشد و از لحاظ مرگ و میر چهارمین سرطان است. یکی از عوامل و موانع بروز سرطان، نوع تغذیه می باشد. روغن زیتون که دارای ترکیبات فنولی از جمله هیدروکسی تیروزول می باشد، می¬تواند باعث القای آپوپتوز، تمایز سلولی، کاهش بقای سلولی، تعدیل مسیرهای چرخه¬ سلولی و اثر ضد رگ زایی در سلول¬های سرطانی کولون شود. روش¬ها : رده سلولی HT-29 سرطان کولون در محیط کشت سلولی RPMI1640 کشت داده شدند. سپس سلول¬ها تحت تیمار با هیدروکسی تیروزول خالص و نانوکپسوله با PLGA-PAA قرار گرفتند. برای بررسی اثرات ضد تکثیری و ضد توموری هیدروکسی تیروزول خالص و نانوکپسوله با PLGA-PAA روی سلول های سرطانی، از تست MTT استفاده شد. پس از استخراج RNA توتال گروه¬های کنترول و تیمار و سنتز cDNA آن¬ها با استفاده از آنزیم Reverese Trans¬criptase، بیان ژن های هدف با Real-Time PCR سنجیده شد. داده¬های حاصل از Real-Time PCR در گروه¬های کنترول و تیمار با هم مقایسه شده و تفاوت بیان ژن¬های مورد مطالعه مشخص گردید.نتایج : یافته¬¬های حاصل از تست MTT نشان می¬دهد که اثر سیتوتوکسیک هیدروکسی تیروزول در حالت نانوکپسوله بیشتر از حالت خالص است. همچنین نتایج Real-Time PCR نشان داد که هیدروکسی تیروزول نانوکپسوله باعث کاهش بیان ژن Colca1 نسبت به هیدروکسی تیروزول خالص داشته است. این نتایج، ویژگی¬های رهایش موثر و بهتر نانوذره هیدروکسی تیروزول کپسوله با PLGA-PAA را تایید می¬کند و قادر است به طور موثر برای سلول¬های سرطانی HT-29 مورد استفاده قرار گیرد.نتیجه گیری: به طور کلی می¬توان نتیجه گرفت که داروی هیدروکسی تیروزول از طریق القاء فرایند آپوپتوز می¬تواند موجب مرگ سلول¬های HT-29 سرطانی کولون شود. همچنین ساختار نانوکپسوله این دارو با PLGA-PAA می¬تواند کشندگی سلول¬های سرطانی را به طور چشمگیری افزایش دهد.
AbstractBackground: Colorectal cancer is the third most common cancer and fourth cancer causing deathin the world. Nutrition is one of the most important factors in the incidence of cancer. Olive oil,which contains phenolic compounds, including hydroxytyrosol, can induce apoptosis, celldifferentiation, decrease cell survival, modulate cell cycle pathways, and anti-angiogenesis effectsin colorectal cancer cells .Objective: The aim of present study was to compare the effect of free and PLGA-PAAnanocapsules hydroxytyrosol on expression of Colca1 genes in colorectal cancer HT-29 cell line.Materials and methods: The HT-29 cell line was cultured in RPMI1640 medium. The cells weretreated with free and PLGA-PAA nanocapsule hydroxytyrosol. MTT assay was used to evaluatethe anti-proliferative and anti-tumor effects of free and nanocapsele hydroxytriazole on HT-29cells line. After total RNA extraction from control and treated groups, and cDNA synthesis usingRevere transcriptase enzyme, expression of target genes was measured using Real-Time PCRmethod. The obtained data from real-time PCR were compared between control and treated groupsand difference in expression of target genes was evaluated .Results: The obtained results from MTT assay show that the cytotoxic effect of hydroxytyresol innanocapsule form is more than free hydroxytyresol. The obtained results from Real-Time PCRshowed that nanocapsule hydroxytrylosol increased expression of Colca1 (p<0.0001), more thanfree form (p<0.01). These results confirm the effects and better release of encapsulatedhydroxytrylosel with PLGA-PAA and can be used for HT-29 cancer cells .Conclusion: In general, it can be concluded that the hydroxytrylosol can cause death of colorectalcancer HT-29 cell line through induction of apoptosis. Also, the nanocapulate form of this drugwith PLGA-PAA can dramatically increase death of cancer cells
Comparison of pure and PLGA-PAA nano-encapsulated of hydroxytyrozol effects on COLCA1 gene expression in HT-29 colon cancer cell line
حیدری،
مسعود
تهيه کننده
صفرعلیزاده،
حسین پورفیضی،
رضا
محمد علی
استاد راهنما
استاد راهنما
تبریز
