عنوان

امکان سنجی فاژتراپی در کنترل عفونت های زخم با استفاده از مدل موشی

‭۱۲۸۸۲پ‬

per

امکان سنجی فاژتراپی در کنترل عفونت های زخم با استفاده از مدل موشی

/رعنا رحمانی

: دانشکده علوم طبیعی

‮‭۸۹‬ص‬

چاپی

کارشناسی ارشد

در رشته زیست شناسی گرایش میکروبیولوژی

‮‭۱۳۹۲/۱۱/۲۵‬

دانشگاه تبریز

مقدمه :باکتریوفاژها ویروس‌صهایی هستند که به باکتری‌صها حمله و آن‌صها را با روشی کارآمد و ویژه لیز می‌صکنند .این دشمنان طبیعی باکتری‌صها قبل از ظهور آنتی بیوتیک‌صها به عنوان عوامل درمانی مطرح شدند .در حال حاضر، با گسترش سریع باکتری های مقاوم به چند دارو، فاژ درمانی می تواند یک درمان جایگزین موثر برای باکتری های مقاوم در برابر آنتی بیوتیک باشد .در این مطالعه اثر باکتریوفاژها در از بین بردن ‮‭E. coli‬ بیمارستانی مقاوم به آنتی بیوتیک در موش سوری بررسی شده است .مواد و روش‌صها :نمونه های مختلف از زخم بستر و زخم پا در بیماران مبتلا به دیابت گرفته شد .سویه‌صهای ‮‭E. coli‬ جداسازی شده و با روش‌صهای استاندارد شناسایی شدند .آنتی بیوگرام سویه‌صها به روش انتشار دیسک کربی بائر با ده آنتی بیوتیک تهیه شد .باکتریوفاژها از نمونه‌صهای آب های محیطی جداسازی شدند .آن‌صها با استفاده از روش آگار دولایه ( ‮‭(DLA‬ برای به دست آوردن پلاک با باکتری میزبان کشت یافتند .واکنش کراسینگ فاژها روی سویه‌صهای باکتری جداسازی شده برای تعیین گستره اثر فاژها انجام شد .فاژی که طیف گسترده تری داشت برای مطالعه حیوانی انتخاب شد .موش‌صها به پنج گروه هفت‌صتایی گروه تقسیم شدند و در پشت آن‌صها زخم ایجاد شد .گروه ‮‭۱‬ به عنوان گروه کنترل، گروه ‮‭۲‬ گروه دریافت کننده باکتری‮‭E. coli‬ ، گروه ‮‭۳‬ که فقط فاژ دریافت کرد تا عفونت‌صزایی فاژ مورد ارزیابی قرار گیرد، گروه ‮‭۴‬ که ‮‭E. coli‬ دریافت کرد و تحت درمان با جنتامیسین قرار گرفت و گروه ‮‭۵‬ که پس از دریافت باکتری تحت درمان با فاژ قرار یافت .نتایج :ده سویه ‮‭E. coli‬جداسازی شدند که ‮‭E. coli M۱‬ تا ‮‭E. coli M۱۰‬ نام گرفتند .الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی آن‌صها مقاومت بالا در برابر آنتی بیوتیک های استفاده شده را نشان داد .باکتریوفاژهای اختصاصی برای هر سویه، به نام ‮‭TPR۱‬ تا ‮‭TPR۱۰‬ جداسازی شدند .با توجه به نتایج واکنش کراسینگ فاژ ‮‭TPR۷‬ برای مطالعه حیوانی انتخاب شد .در گروه ‮‭۳‬ که فقط باکتری دریافت کردند، چهار موش در روز سوم مردند و بقیه تا روز هفتم در نمونه گیری‌صها باکتری ‮‭E. coli‬ نشان دادند .در گروه ‮‭۴‬ و ‮‭۵‬ نمونه برداری از زخم از روز سوم هیچ ‮‭E. coli‬ نشان ندادند .جنتامایسین و فاژ ‮‭TPR۷‬ توانستند در ‮‭۴۸‬ ساعت عفونت را حذف کنند .فاژ توانایی بالقوه برای از بین بردن باکتری همانند جنتامیسین داشت .بحث :با توجه به نتایج پژوهش، باکتری‌صهای بیمارستانی نسبت به آنتی بیوتیک‌صهای مختلف مقاوم هستند و فاژهایی که راحت و کم هزینه جداسازی می‌صشوند می‌صتوانند این باکتری‌صها را بکشند .این نتایج هم راستا با نتایج تحقیق محققان دیگر است که آن‌صها افزایش مقاومت به آنتی بیوتیک در باکتری‌صهای مختلف را مشاهده کرده‌صاند و با جداسازی فاژهای مختلف اثر مثبت آن‌صها در از بین بردن عفونت در شرایط برون تن و درون تن را منتشر کرده‌صاند

spectrum phages. The most broad range phage was chosen for animal trial. Mice were divided to five groups each containing seven mice and a wound on their back was injured. Group 1 was assigned as control, Group 2 infected with E. coli, Group 3 non infected and received only phage preparation to assess whether phage initiates infection, Group 4 infected with E. coli, once the infection was treated with gentamicin phages and Group 5 infected E. coli and challenged with phage. Results: Ten E. coli strains were isolated from hospital samples, called E. coli M1 to E. coli M6. Their antibiotic resistance pattern showed high resistance to used antibiotics. An effective bacteriophage was isolated for each strain, called TPR1 to TPR10. According to cross reaction results TPR7 was selected for animal trial. In group 3 which have received only bacteria, four mice died in third day and there was E. coli on plate sampling in other members of this group until seventh day. In group 4 and 5 sampling of the wound did not show E. coli from third day. Gentamicin and the TPR7 phage could remove infection in 48 hours. Phage has the potential to kill bacteria as well as gentamicin. Discussion: According to this research results, hospital bacteria are resistant to different antibiotics and cheaply and easily isolated phages can kill these bacteria. These results were like other researchers published data in which they found increased resistance to antibiotics in different bacteria and have isolated phages which had positive effects in removing infections in vitro and in vivo -layer agar technique (DLA) to observe plaques. Cross reaction of the phages on test E. coli strains was performed to determine broader-resistant clinical E. coli in Mice. Material and methods: Different samples were taken from bed sore and foot ulcer in diabetic patients. E. coli strains were isolated and identified by standard methods. The antibiogram were ascertained using Kirby Bauer disc diffusion method for ten antibiotics. The bacteriophages were isolated from environmental water samples. They were exposed to the host bacteria by double-drug resistant bacteria, phage therapy can be an effective alternative treatment for antibiotic resistant bacteria. This study evaluated the effectiveness of bacteriophages in removing antibiotic-Background: Bacteriophages are viruses which attack bacteria and lyse them with an efficiency and highly specific manner. These natural enemies of bacteria were purposed to therapeutic agents before advent antibiotics. Currently, with rapid spreading of multi

رحمانی، رعنا

زرینی، غلامرضا، استاد راهنما

شیخ زاده حصاری، فرزام، استاد راهنما

آقامحمدزاده، ناصر، استاد مشاور

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی