۱۲۸۷۶پ
per
بررسی فعالیت آنزیم لیپاز در دستگاه گوارش کرم قوزه پنبه Helicoverpa armigera Hb. (Lep., Noctuidae)
/مسعود چمنی
: دانشکده کشاورزی
۱۰۰ص
چاپی
کارشناسی ارشد
در رشته حشره شناسی کشاورزی
۱۳۹۱/۱۱/۲۵
تبریز
کرم قوزهصی پنبه Helicoverpa armigera یکی از آفات مهم گیاهان زراعی در جهان و کشور ما می باشد که سالانه خسارات زیادی به کشاورزان تحمیل می کند .بررسی ویژگی آنزیمهای گوارشی یکی از موضوعات مهم در فیزیولوژی حشرات میباشد .آنزیم لیپاز که در اندامهای مختلف بدن جانوران و گیاهان وجود دارد، یکی از آنزیمهای گوارشی است که لیپیدها را به اسیدهای چرب آزاد و گلیسرول تجزیه میکند و نقش بسیار مهمی در متابولیسم چربیهای گیاهان و جانوران بر عهده دارد به طوریکه بسیاری از حشرات برای تامین انرژی مورد نیاز خود وابستگی زیادی به این آنزیم دارند .شناخت ویژگیهای آنزیم اولین گام در مطالعات بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی است تا بتوان گامهای موثرتر بعدی را در امر کنترل آفات با استفاده از ترکیباتی که فعالیت عادی آنزیم را بهم میزنند برداشت .یکی از ابزار های مفید برای درک ارتباطات غذایی حشرات بررسی آنزیم های گوارشی آنها است .بهصدست آوردن ویژگی های آنزیم های گوارشی اولین گام موثر در گسترش روش های کنترلی بر پایه فیزیولوژی میصباشد .در این پژوهش برخی ویژگیهای آنزیم لیپاز کرم قوزه پنبه مورد بررسی قرار گرفت.پرورش این حشره در یکی از واحدهای گلخانه ای گروه گیاهپزشکی در دمای۲۶ ۲درجه سانتی گراد، رطوبت نسبی ۵۰ درصد و دوره نوری ۱۶:۸ (L:D) ساعت انجامصشد .حشرات سه نسل بر روی ماده غذایی مصنوعی خالص-سازی شدند و از نسل چهارم برای آزمایشات مورد استفاده قرار-گرفتند .فعالیت آنزیم لیپاز با استفاده از کیت لیپاز ساخت شرکت Randox انگلستان اندازهصگیریصشد .آزمایشات دارای ۱۴ تیمار بود که در سه تکرار و در قالب طرح کاملا تصادفی صورت گرفت .نمونه ها پس از تشریح و قرار گرفتن در بافر فسفات سرد،به مدت یک دقیقه هموژنه شده وسپس به مدت ۱۰ دقیقه در ۱۰ هزار دور سانتریفیوژگردید .بررسی میزان فعالیت آنزیم و سایر تیمارها توسط روش اسپکتروفتومتریک و اتوآنلایزر صورت گرفت .نتایج نشانصداد بین مراحل مختلف نشو و نمایی سن ششم لاروی بیشترین فعالیت آنزیم لیپاز را داشت .بین فعالیت آنزیم در دماهای مختلف مورد بررسی، اختلاف معنیصداری وجود داشت و بیشترین فعالیت آنزیم در دمای ۴۰ درجهصی سانتیصگراد مشاهدهصشد pH .بهینهصی فعالیت آنزیم لیپاز در این حشره برابر ۹.۵ بهصدستصآمد .در دمای زیر۲۰ - درجهصی سانتیصگراد، فعالیت آنزیم در هفتهصی هشتم به ۱۷درصد مقدار آن در هفتهصی اول رسید در حالیکه در دمای۴ - درجهصی سانتیصگراد فعالیت آنزیم پس از پنج هفته، ۶ درصد مقدار آن در هفتهصی اول بود و پس از آن کاملا متوقفصگردید .نتایج مربوط به بررسی میزان فعالیت آنزیم در زمانصهای مختلف گرسنگی لاروها نشانصداد که پس از ۴ روز گرسنگی، فعالیت آنزیم کاهش پیداصکرده و تقریبا ۹ درصد مقدار آن در حشرات تغذیهصکرده بود .فعالیت آنزیم در طی ساعات مختلف شبانه روز متفاوتصبود و در ساعت ۱۲ ظهر و ۶صبح به ترتیب بیشترین و کمترین میزان فعالیت آنزیم مشاهده شد .فعالیت آنزیم توسط اتانول ۹۶درصد، غلظتصهای۳ ، ۴ و ۵ میلیصمولار NaCl و غلظتصهای۳ ، ۴ و ۵ میلیصمولار CaCl۲ و غلظتصهای مختلف SDS کاهش و به وسیلهصی غلظت ۱و ۲ میلیصمولار NaCl و غلظت ۵ میلیصمولار فسفات پتاسیم افزایش یافت .غلظتصهای مختلف Tris و EDTA و غلظتصهای تا ۴ میلیصمولار فسفات پتاسیم و نیز غلظت ۲۵ درصد اتانول تاثیری روی فعالیت آنزیم نداشتند
C for 5 weeks the enzyme activity was 6 percent of its rate in first week and then ceased entirely. After 4 days starvations, the enzyme activity was about 9 percent of its rate in nutrition condition. During the night and day, the enzyme activity was different and at hours 12 and 6 had maximum and minimum activity respectively. The enzyme activity decreased by 96 ethanol, 3, 4, 5mM of NaCl, CaCl2 and various densities of SDS, and increased by 1, 2mM of NaCl and 5mM potassium phosphate. Various densities of Tris and EDTA, densities up to 4mM of potassium phosphate, and also densities 25 of ethanol had no effect on enzyme activity4-C for 8 weeks the enzyme activity decreased to 17percent of its rate for first week, while after incubation on 20-C. Its optimum pH was 9.5. After incubation on C, relative humidity of 50 and light period of 16:8 (L:D) h. in the growth chamber located in plant protection department of Tabriz university. Larvae were reared on artificial diet for 3 generations after then were used for rest of assays. The activity of lipase enzyme measured by the diagnostic kit of Randox and also the total protein index was used for comparing different treatments. During the different developmental stages of larva 6th instars had the maximum activity. There was significant differences between enzyme activities on the different reaction temperatures at probability level of 5 , and maximum activity of enzyme was observed on 402Cotton boll worm, (Helicoverpa armigera) is one of the most important pests of annual crops in the world and our country that imposes a lot of damage to farmers. Features of digestive enzymes is one of the most important issues in insect physiology. Lipase enzyme exists in various organ of plant and animal is one of the digestive enzymes that break down lipids into free fatty acids and glycerol and has been Important role in the metabolism of fats in plants and animals, so many insects to supply its energy needs are largly dependent to this enzyme. Characteristics, physiological and biochemical studies of the enzyme is the first topest control based on using compounds that disrupt enzyme natural activity. Characteristics of digestive enzymes are the first step in the developmnet control methods based on the physiology. In this study some of the Characteristics of Lipase enzyme of cotton boll worm were inspected. rearing of insects were carried out in controlled condition of 26
چمنی، مسعود
فرشباف پورآباد، رضا، استاد راهنما
ولیزاده، مصطفی، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایهسازی قبلی
