عنوان

ردیابی و مطالعه بیماری های فیتوپلاسمایی درختان مثمر وغیر مثمر باغ های تبریز و حومه

‭۱۲۳۸۴پ‬

per

ردیابی و مطالعه بیماری های فیتوپلاسمایی درختان مثمر وغیر مثمر باغ های تبریز و حومه

/اباصلت حاجی زاده

: دانشکده کشاورزی

‮‭۱۱۳‬ص‬

چاپی

کارشناسی ارشد

در رشته بیماری شناسی گیاهی

‮‭۱۳۹۲/۰۹/۲۵‬

تبریز

فیتوپلاسماها پروکاریوت‌صهای غیر قابل کشت، فاقد دیواره سلولی و متعلق به ردهء مولیکوت‌صها می باشند که در گیاهان بسیاری ایجاد بیماری می‌صکنند .در سال‌صهای ‮‭۱۳۹۰‬ و‮‭۱۳۹۱‬ علایمی شبیه علایم بیماری فیتوپلاسمایی از قبیل زرد شدن برگ‌صها، ریزبرگی، کاهش فاصله میانگره‌صها و جاروک در تعدادی از گیاهان در شهرستان تبریز مشاهده شد .از گیاهان مشکوک به آلودگی فیتوپلاسمایی و از گیاهان بدون علایم به طور جداگانه، دی ان ای کل با روش ‮‭CTAB‬ استخراج گردید . .سپس نمونه‌صهای دی ان ای گیاهی از نظر آلودگی به فیتوپلاسما با آزمون‌صهای ‮‭PCR‬ با استفاده از جفت آغازگرهای ‮‭P۱/Tint‬ و ‮‭Nested PCR‬ با استفاده از جفت آغازگرهای) ‮‭P۱/Tint‬ دور اول (و) ‮‭R۱۶F۲/R۱۶R۲‬ دور دوم (مورد بررسی قرار گرفتند .عوامل فیتوپلاسمایی در ‮‭۲۸‬ جدایه از نمونه‌صهای دارای علایم بیماری ردیابی شدند .ولی دی ان ای فیتوپلاسمایی از نمونه‌صهای گیاهان سالم تکثیر نگردید .براساس الگوهای چند شکلی طول قطعات حاصل از هضم محصول پی سی آر دو مرحله‌صای ‮‭(Nested PCR RFLP)‬ پس از هضم جداگانه با پنج آنزیم برشی‮‭(AluI, TaqI, MspI, HinfI, EcoRI)‬ ، تنوع ژنتیکی در فیتوپلاسماهای همراه با میزبان‌صهای بادام و سنجد در استان آذربایجان شرقی مشاهده گردید .به منظور تعیین جایگاه فیلوژنتیکی، فیتوپلاسماهای ردیابی شده با آغازگرهای ‮‭R۱۶F۲/R۱۶R۲‬ تکثیر شدند و سپس تعیین توالی گردیدند .با استفاده از نرم افزار‮‭Mega‬ صص‍ ‮‭۵‬ ترادف نوکلئوتیدی به دست آمده از جدایه های ‮‭P۲۲, P۲۵‬ با ترادف‌صهای هم ناحیه سایر فیتوپلاسماهای موجود در بانک ژن هم ردیف شدند .با آنالیز فیلوژنتیکی، فیتوپلاسمای همراه با جاروک سنجد جداسازی شده از محوطه دانشگاه تبریز ‮‭(P۲۲)‬ در گروه زردی گل مینا ‮‭(AY)‬ طبقه بندی شد .همچنین این آنالیز، فیتوپلاسمای همراه با جاروک بادام جدا شده از کنارگذر پاسدارن ‮‭(P۲۵)‬ را در گروه جاروک نخود کبوتر ‮‭(PPWB)‬ قرار داد .این جدایه ‮‭(P۲۵)‬ بیشترین شباهت با فیتوپلاسمای عامل جاروک بادام لبنان ‮‭(LAlmWB)‬ داشت .براساس علائم بیماری، انتقال با پیوند و قلمه، واکنش مثبت در آزمون های ‮‭PCR‬ و‮‭PCR- Nested‬، تعیین توالی نوکلئوتیدی و آنالیز‮‭RFLP- PCR‬، بیماری های جاروک سنجد، بادام، هلو، زردآلو، آلو، درخت‌صتبریزی و جاروک کاهوی وحشی ماهیت فیتوپلاسمایی دارد .این اولین گزارش از وجود بیماری های جاروک درختان سنجد، بادام، هلو، زردآلو، آلو، درخت تبریزی و جاروک کاهوی وحشی از استان آذربایجان شرقی می باشد .ضمنا براساس این بررسی برای اولین بار بیماری جاروک درخت تبریزی از ایران گزارش می گردد

broom disease of Poplar tree is reported for the first time from Iran in current study- TPI) were classified into Pigeon Pea Witches, broom (PPWB, 16SrIX group). Based on disease symptoms, graft and cutting transmission, positive reaction in Nested PCR and RFLP analysis, and the sequence information from the Nested PCR amplified 16SrRNA, Witches broom disease of Russion olive, Almond, Peach, Apricot, and witches broom disease of Wild lettuce are Phytoplasmas nature. This is the first report of a Phytoplasma disease from East Azarbaijan Province Phytoplasma Witches -TU) placed in Aster Yellow group (AS). The results also showed that the Phytoplasmas associated with Almond Witches, broom isolate collected from Tabriz PasdaranI area (AlmWB- Bank nucleotide database. The results of Phylogenetic analysis showed that the Phytoplasmas strain which isolated from Russian Olive trees with Witches, broom symptom collected from Tabriz University area (ROWB-2013 growing season, many orchards were surveyed and suspected plants with symptoms similar to those caused by phytoplasmas including severe reduction of leaf size, yellowing of leaves, witches, broom and shortening of internodes were collected and transferred to the lab. Total DNA was extracted separately from tissues of symptomatic and asymptomatic collected plants and shrubs using protocol based on CTAB. The samples were examined by direct PCR using P1/Tint primers Pair and nested PCR using phytoplasma universal 16SrRNA gene primer pairs P1/Tint (first round) andR16F2/R16R2 (second round) that amplify fragment of 1600bp and 1200bp, respectively. Phytoplasmas were detected in symptomatic samples (28 Samples) but no products were amplified in the symptomless plants. On the basis of restriction fragment length Polymorphism patterns performed on Nested PCR products by using five restriction enzymes (AluI, TaqI, MspI, HinfI, EcoRI), genetic diversities were measured. For phylogeneyic classification of the detected phytoplasmas, rDNA products which amplified by the primer set of R16F2/R16R2 were sequenced. Sequences of the isolates P22 and P25 were aligned using Mega5 program with corresponding sequences of other phytoplasmas available in Gen-Fruit trees in Tabriz and suburb orchards due to their noticeable damages and lack of information about their dispersion in the area. During 2012-less prokaryotes of the class Mollicutes that cause disease in several hundred plant species. This study was conducted for identification of Phytoplasma diseases of Fruit and non-Phytoplasmas are non culturable, wall

حاجی زاده، اباصلت

خاک ور، رضا، استاد راهنما

سخندان بشیر، نعمت، استاد راهنما

باغبان کهنه روز، بهرام، استاد مشاور

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی