عنوان

بررسی نقش سیستم نیتریک اکساید بر حافظه‌ی فضایی و استرس اکسیداتیو طی بیماری مالتیپل اسکلروزیس در موش های صحرائی نر

‭۱۱۵۲۱پ‬

per

بررسی نقش سیستم نیتریک اکساید بر حافظه‌ی فضایی و استرس اکسیداتیو طی بیماری مالتیپل اسکلروزیس در موش های صحرائی نر

/زاهده رحیملوی مرجانی

: دانشکده علوم طبیعی

‮‭۱۲۳‬ص‬

چاپی

کارشناسی ارشد

در رشته زیست شناسی گرایش فیزیولوژی جانوری

‮‭۱۳۹۲/۰۶/۲۵‬

تبریز

زمینه و اهداف :مالتیپل اسکلروزیس از دسته بیمار های خود ایمنی مزمن سیستم عصبی مرکزی با اتیولوژی ناشناخته است .در بیماری مالتیپل اسکلروزیس به دلایل نامشخصی سیستم ایمنی بر علیه برخی از اجزاء پروتئینی سلول های عصبی از جمله میلین تحریک شده و منجر به ضایعات بافتی می گردد .در بیماری مالتیپل اسکلروزیس ‮‭(MS)‬ میلین رشته های عصبی تخریب می شوند .از لحاظ بافت شناسی مشخصه ی برجسته ی مالتیپل اسکلروزیس ‮‭(MS)‬ ایجاد پلاک های متعدد در سیستم اعصاب مرکزی ‮‭(CNS)‬ است .علائم و نشانه های مالتیپل اسکلروزیس ‮‭(MS)‬ بسته به اینکه پلاک ها کجا تشکیل شوند، بسیار متنوع است .مکانیسم های بروز بیماری مالتیپل اسکلروزیس ‮‭(MS)‬ هنوز بطور کامل شناخته نشده است ولی تحقیقات انجام شده بیانگر این است که این بیماری اساس ایمونوپاتولوژیک دارد و عوامل ژنتیکی و محیطی نیز در بروز آن موثر می باشند .استرس اکسیداتیو و به دنبال آن آپوپتوز از دیگر عواملی هستند که در پاتوژنز بیماری مالتیپل اسکلروزیس ‮‭(MS)‬ مطرح شده اند .استرس اکسیداتیو عامل اصلی دژنراسیون در تعدادی از بیماری های نورودژنراتیو مانند ایسکمی، پارکینسون، آلزایمر و مالتیپل اسکلروزیس می باشد .استرس اکسیداتیو ناشی از یک عدم تعادل بین تولید گونه های باز فعال اکسیژن ‮‭(ROS)‬ و توانایی سیستم زیستی برای سم زدایی این واسطه های فعال می باشد .استرس اکسیداتیو سبب القای آسیب اکسیداتیو در هیپوکمپ و آسیب سلول های هرمی می‌صشود .هیپوکمپ بالغین یک مرکز حیاتی برای فرآیندهای یادگیری و حافظه می باشد که به شدت نسبت به بیماری های نورولوژیک نظیر ‮‭MS‬ آسیب پذیر می باشد .قشر مغز، آمیگدال و بخصوص هیپوکمپ نقش اساسی در تشکیل و ذخیره سازی حافظه ی فضایی دارند .یادگیری و حافظه ی فضایی از رفتارهای پیچیده ی مغزی محسوب می شوند .در مقیاس های مورفولوژیک رمیلیناسیون در بسیاری از مدل های حیوانی و نیز در سیستم عصبی انسان بخوبی نشان داده شده است .استرس اکسایشی یکی از گذرگاه های مهمی است که منجر به مرگ سلولی نورونی القاء شده توسط ‮‭NO‬ می گردد .نیتریک اکسید رادیکالی آزاد با پیچیدگی بیوشیمیایی قابل توجه است که درگیریش در مالتیپل اسکروزیس به اثبات رسیده است با این حال میزان مشارکت ‮‭NO‬ در ‮‭MS‬ هنوز مشخص نشده است .این وضعیت بخشی به علت نقش های مخالفی است که ‮‭NO‬ به مدت طولانی به عنوان عامل اصلی التهاب شدید در ‮‭CNS‬ در نظر گرفته می شد اما یافته ها نشان دادند که ‮‭NO‬ از یک طرف عمل پیش التهابی دارد و از طرفی دیگر به کنترل فرایند های پاسخ ایمنی کمک می کند و نقش ضد التهابی دارد ‮‭NO‬ .می‌صتواند به عنوان فعال کننده مرگ سلولی یا بازدارنده مرگ سلولی عمل کند که این وضعیت وابسته به محیط بیولوژیکی یعنی حضور یا عدم حضور سیگنالهای بازدارنده یا تحریکی است .با توجه به نقش های متضاد‮‭NO‬ ، هدف پژوهش حاضر بررسی اثرات تحریک یا مهار سیستم نیتریک اکساید در حافظه فضایی موش های صحرائی نر طی بیماری مالتیپل اسکلروزیس ‮‭(MS)‬ با تکیه بر استرس اکسیداتیو می باشد .مواد و روش‌صها ‮‭۵۶‬ :سر موش صحرایی نر نژاد ویستار با محدوده وزنی‮‭۲۵۰) (۵۰‬گرم به صورت تصادفی در ‮‭۸‬ گروه ‮‭۷‬ تایی شامل گروه کنترل، شاهد،‮‭Arginine (g/rat۱/۱۵)-L‬،‮‭NAME (g/rat ۳/۱۵)- L‬،‮‭Arginine (g/rat ۱/۱۵)- L+ EB (L/rat ۳)‬،)‮‭NAME (g/rat ۳/۱۵)- L+ EB (L/rat۳‬، ‮‭EB (L/rat ۳)‬ و گروه دریافت کننده توام‮‭(L/rat ۳).EB +NAME (g/rat ۳/۱۵) -L+Arginine (g/rat۱/۱۵) -L‬ القای مدل ‮‭MS‬ با تزریق مستقیم اتیدیوم بروماید ‮‭۰۱/۰‬ به ناحیه ‮‭CA۱‬ هیپوکامپ انجام گرفت .گروه های تیمار شده یک هفته بعد از القای‮‭MS‬ ، اثرات تحریک یا مهار سیستم ‮‭NO‬ مورد بررسی قرار گرفت .بعد از دوره تیمار، از حیوانات تمامی گروه ها آزمون ماز آبی موریس به عمل آمد .در پایان، نمونه برداری از ناحیه هیپوکامپ انجام گردید و میزان پارامتر های استرس اکسیداتیو در این ناحیه شامل ‮‭MDA‬ و آنزیم های آنتی اکسیدانی شامل ‮‭GPx, SOD, CAT‬ سنجش گردید .تجزیه و تحلیل اطلاعات حاصله به روش آنالیز واریانس یک طرفه انجام گردید .یافته ها :تجویز ‮‭EB‬ به عنوان القا کننده بیماری ‮‭MS‬ سبب تخریب حافظه فضایی شد .تجویز‮‭Arginine - L‬ علاوه برافزایش میزان یاد گیری و حافظه در رت های سالم باعث بهبود حافظه فضایی در رت های مبتلا به ‮‭MS‬ گردید .(>‮‭(۰۵/۰p‬ تجویز‮‭NAME - L‬میزان یاد گیری و حافظه فضایی را در رت های سالم و مدل ‮‭MS‬ کاهش داد .(>‮‭(۰۵/۰p‬ بحث ‮‭NO‬ :به عنوان یک مولکول دووجهی زمانی که با مسیر هایی التهابی همراه نباشد به عنوان یک آنتی اکسیدان عمل می‌صکند ‮‭NO‬ .با کاهش پارامترهای استرس اکسیداتیو و عوامل آنتی اکسیدانی ناشی از تزریق اتیدیوم بروماید) به عنوان القا کننده مدل ‮‭MS)‬ باعث بهبود حافظه فضایی در رت های مدل ‮‭MS‬ می گردد .علاوه بر این ‮‭NO‬ با فعال سازی مسیر پیامبر های داخل سلول سبب تقویت حافظه در رت های سالم نیز می شود

NAME prescribing reduced spatial learning and memory in healthy and MS rats (p< 0/05). Discussion: NO as a double sidedan molecule acts as an antioxidant,when the inflammatory pathways has not been activated. NO with reducing oxidative stress parameters and antioxidantagents [which were by ethidium bromide (as an induced of MS model)] can improve spatial memory in MS rats. In addition NO by activating intracellular second messenger pathways potentiates the spatial memory in healthy rats -Arginine Prescribing increased the learning and memory in normal rats also improved spatial memory in MS rats (p< 0/05). L- way ANOVA. Results: EB treatman as a MS inducer impaired the spatial memory. L- EB (3L / rat). Model of MS was induced with direct injection of 0/01 of ethidium bromide to CA1 hippocampus area. On week after the induction of MS disease, the effects of stimulation and inhibition of nitric oxide system had been investigated.After the treatment period, the Morris water maze test was performed for all groups of animals. Finally, samples were taken fram hippocampus and oxidative stress parameters including of MDA and antioxidant enzymes such as GPx, SOD, and CAT were measured. Data analysis was performed using one+NAME(15/3 g / rat) - L+Arginine(15/1g/rat)-NAME (15/3g / rat), EB (3 L / rat) and the group receiving combined L- L+Arginine (15/1 g / rat), EB (3 L / rat) - L+ NAME (15/3 g / rat), EB (3 L / rat) -Arginine (15/1g/rat), L- 50) g were randomly divided into 8 groups of 7 rats in each group: control, sham, L inflammatory action and helps to control immune process. NO can act as an activator of cell death or inhibition of cell death, which depends on the biological status of the presence or absence of inhibitor or stimulator signals. According to the contrasting roles of NO, the aim of this study is the investigating of stimulation and inhibition of nitric oxide on spatial memory in MS rat with Lean on oxidativ stress. Material and methods: 56 male Wistar rats with a weight range (250 -Background and Objective : Multiple sclerosis is one type of chronic autoimmune disease of central nervous system with unknown etiology . In MS patients for unknown reasons, the immune system against some of protein components of the nerve cells are stimulated and leads to tissue lesions . In multiple sclerosis (MS)disease myelinated nerve fibers are destroyed. Histologically, the prominent feature of multiple sclerosis (MS) is buildup several plaque in central nervous system (CNS). Signs and symptoms of multiple sclerosis (MS) depending on the plaques form position are very diverse.Mechanisms of multiple sclerosis (MS) disease are not fully known, but investigations indicate that the disease has immunopathologic basis and the geneticand environmental factors may also affect the incidence of it. Oxidative stress and subsequent apoptosis are the other factors that Multiple sclerosis have been proposed in the pathogenesis of MS. Oxidative stress is a major factor in a number of neurodegenerative diseases, such as ischemia, Parkinson, Alzheimer and multiple sclerosis. Oxidative stress is results from an imbalance between the production of active oxygen species (ROS) and a biological system's ability for detoxify these active intermediates. Oxidative stress caused oxidative damage in the hippocampus anddamaged pyramidal cells. The adult hippocumus isa vital center for learning and memory processes and is highly vulnerable to neurological disorders such as MS. Cortex, amygdala and in particular hippocampus have a key role in the formation and storage of spatial memory. Spatial learning and memory in the brain are complex behaviors. In morphological scale remyelination in many animal models and the human nervous system has been proved. Oxidative stress is one of the major pathways leading to neuronal cell death that is induced by NO. Nitric oxide is a free radical with significant biochemical complexity that its interferencein multiple sclerosis has been proven. Yet the level of NO participation in MS pathogenesis is unknown part of this situation is because of the opposite roles of NO. For the long time NO had been considered as a sever inflammatory agent in CNS. But findings showed that NO on the on hand have the preinflammatory action and the other hand has the anti

رحیملوی مرجانی، زاهده

حاتمی نعمتی، حمیرا، استاد راهنما

علی همتی، علی رضا، استاد راهنما

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی