پ۲۵۷۹۳
per
تأثیر اسید سالیسیلیک بر رونوشت‌برداری ژن DREB در شرایط تنش شوری در گیاه صبر زرد
مهسا زمانی
کشاورزی
۱۳۹۶
۵۹ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
۱۳۹۶/۰۶/۲۰
صبر زرد گیاهی پر اهمیت و با سابقه مصرف طولانی برای انسان است که قدمت استفاده از آن به قبل از میلاد مسیح برمی گردد. این گیاه معمولاً در نواحی گرم و خشک کشت و کار می‌گردد که در موارد بسیاری دارای مشکل شوری نیز می‌باشند. یکی از مهم‌ترین ساز وکارهای گیاهان مختلف از جمله صبر زرد برای مقابله با آسیب‌های ناشی از تنش، تقویت سیستم آنتی اکسیدانی گیاه است. فاکتور رونوشت‌برداری DREB با هماهنگ‌سازی بیان ژن‌های مربوط به سیستم آنتی‌اکسیدانی، نقش قابل توجهی در ایجاد پتانسیل مقابله با تنش و نیز تعدیل اثرات سوء تنش‌های گوناگون را دارد. مطالعات گوناگون نشان داده است، در گیاهان مختلف بیان ژن DREB در شرایط تنش ناشی از کم‌آبی افزایش قابل توجهی می‌یابد که پروتئین تولید شده توسط آن در هماهنگ‌سازی بیان ژن‌های آنتی‌اکسیدان نقش اساسی را بر عهده دارند. از طرفی مطالعات متعددی نشان داده‌اند که DREB در پاسخ به هورمون اسید سالیسیلیک نیز بیان می‌گردد. با توجه به اهمیت گیاه صبر زرد و نظر به این که عمدتاً کشت و کار این گیاه در شرایط تنش شوری و خشکی انجام می‌پذیرد، تحقیق حاضر به منظور ارزیابی اثر اسید سالیسیلیک در تعدیل تنش شوری در گیاه صبر زرد و ارزیابی ساز و کار احتمالی ژن DREB و برهم‌کنش آن با اسید سالیسیلیک در شرایط تنش انجام شد. به این منظور گیاهچه‌های درون شیشه‌ای صبر زرد به تعداد کافی پرورش داده شد و در نهایت تیمارهای شوری در 4 سطح 0، 1/0، 2/0 و 3/0 مولار و اسید سالیسیلیک با 4 غلظت 0، 5- 10× 5/2، 5- 10× 5 و 4- 10 مولار در یک آزمایش فاکتوریل و با طرح پایه کاملاً تصادفی به این گیاهان درون شیشه‌ای اعمال شد. یک هفته پس از انتقال ریزنمونه‌ها به محیط‌های دارای هورمون و نمک، پایداری غشا از طریق ارزیابی نشت الکترولیت‌ها، سنجش پراکسیداسیون لیپیدهای غشاء با اندازهگیری میزان مالون‌دی‌آلدئید و غلظت سدیم و پتاسیم به روش نشر شعله‌ای و با کمک دستگاه فلیم فتومتر انجام شد. ضمناً بررسی میزان رونوشت‌بردای از ژن DREB با روش RT-PCR نیمه‌کمی و با استفاده از ژن رفرنس actin گیاه صبر زرد انجام شد. نتایج ارزیابی‌های فوق نشان داد که تیمارهای شوری با افزایش غلظت، آسیب فیزیکی نسبت زیادی را به غشاها وارد نموده‌اند که منجر به نشت الکترولیت زیاد و تولید مالون دی آلدهید قابل توجه شده است. از طرفی بررسی‌ها نشان داد در طی مدت یک هفته مقدار قابل توجهی سدیم جذب گیاه شده است ولی تغییر محسوسی در جذب پتاسیم رخ نداده است. این موضوع منجر به افزایش نسبت سدیم به پتاسیم در تیمارهای دارای سدیم شده است. نتایج حاصل از مطالعات مربوط به رونوشت برداری از ژن DREB نیز نشان داد که بیان رونوشت‌های این ژن در غلظت 3/0 مولار NaCl نسبت به سایر گیاهان افزایش محسوس یافت، ضمن این که تمامی غلظت‌های اسید سالیسیلیک رونوشت برداری از ژن DREB را افزایش دادند. با جمع بندی نتایج این آزمایش می‌توان استنتاج کرد که احتمالاً اسید سالسیلیک دارای نقش قابل توجه در فعال سازی رونوشت برداری از ژن DREB در شرایط تنش در گیاه صبر زرد می‌باشد.
AbstractAloe vera is the important plant that has a long antecedent for human that usage archaism of this plant hark back to the anno domini. This plant generally cultivation in the warm and dry areas that most involve the salinity difficult. One of the course of the Aloe vera for the contrast white the damage of stress is the plant Antioxidant system invigoration DREB duplication with gene expression harmonization anent antioxidant system have a considerable role in conterview potential with stress and bad effects regulation of different stress. The different research showed that DREB gene expression in the stress condition emanation of aridity accretion in the different plants that producted proteins with this gene emprise a basal role in antioxidant gene expression organization. Beside, umpteen research showed that breed DREB answerback to salicylic acid hormone. By advertency to the Aloe vera emphasis and by contemplate that culture of this plant is effectuation in the dryness and salinity condition, so this research done for salicylic acid effect evaluation in the salinity stress adjustment in Aloe vera and DREB gene probabilistic mechanism and that interaction with salicylic acid in stress condition evaluation. Because of this experiment needful amount of Aloe vera in vitro seedlings improved and after that salinity treatments in 4 level 0, 0.1, 0.2 and 0.3 molar salicylic acid with 4 density 0, 2.5 × 10-5, 5×10-5 and 10-4 molar enforcement in a factorial experiment and whit absolutely coincidental basis plan to this plants. One week after the seedlings transfer to the medium with salt and hormone done, membrane resistance by electrolyte leak valuation, membrane lipids peroxidation assay with malondialdehyde mount measurement and potassium and sodium density with flame transpiration and with help of the flame photometry machine. Incidentally check the amount of duplication from DREB gene done with RT-PCR and use from actin reference gene of Aloe vera. Evaluation result showed that with increase the density of salinity treatment get the bad physical damage to the membranes that conduce high electrolyte leak and product a noticeable malondialdehyde and the other way revisions showed that during one week absorbency a noticeable amount of sodium to the plant but no bechance showed in the absorbancy of the potassium. This topic trepan increase the sodium to potassium proportion in treatments with sodium. The effects outcome from DREB gene duplication observation showed that this gene duplications expressions of this gene in 0.3 molar density NACL than other plants. Connotative duplication of the DREB gene increased in the all of the salicylic acid densities. With polarization the results of this experiments we can deduction that possibly salicylic acid has a considerable role in activation the DREB gene duplication in Aloe vera at stress condition.
Effect of Salicylic Acid on Transcription of DREB Gene under Salinity Stress in Aloe Vera
زمانی،
مهسا
تهيه کننده
زارع نهندی،
مطلبی آذر،
علی‌زاده سالطه،
فریبرز
علی‌رضا
سعیده
استاد راهنما
استاد راهنما
استاد مشاور
تبریز
