بررسی شیوع و تنوع ژن های ESBL PER) ،TEM ،VEB ، SHV) و IS/AmpC در ژنوتیپ های آسینتوباکتر بومانی جدا شده از عفونتصهای بیمارستانی و تعیین ارتباط آن ها با سطح MIC سفتازیدیم و سفپیم
/دلسوز رضایی
: دانشکده علوم طبیعی
۹۷ص
چاپی
کارشناسی ارشد
رشته ی زیست شناسی گرایش میکروبیولوژی
۱۳۹۲/۰۶/۲۵
تبریز
افزایش جهانی در مقاومت چند دارویی در A. baumannii مشکلات گستردهصای را برای درمان بیماران بخش مراقبتصهای ویژه و بخش سوختگی ایجاد کرده است . در این مطالعه شیوع و تنوع ژن های ESBL PER) ،TEM ،VEB ، SHV و) IS/AmpC در ژنوتیپصهای A. baumannii جدا شده از عفونتصهای بیمارستانی و تعیین ارتباط آن ها با سطح MIC سفتازیدیم و سفپیم بررسی گردید .آزمون-های استاندارد بیوشیمیایی برای شناسایی ایزولهصها استفاده شد گونه ژنومی Acinetobacter با (Amplified ribosomal DNA restriction (ARDRA تأیید شد .محصولات PCRژن ۱۶S rDNA با آنزیمصهای محدودالاثرAluI ، MboI و HhaI برش داده شدند .روش انتشار از طریق دیسک برای ارزیابی حساسیت به عوامل ضدمیکروبی استفاده شد .میزان MICسفتازیدیم و سفپیم با نوارهایtest - Eمشخص شد. تشخیص فنوتیپی ESBLبا روش دیسک ترکیبی مورد تأیید قرار گرفت PCR .تحت شرایط استاندارد، برای تکثیر ژنصهایPER ،TEM ،VEB ، SHV و IS/ampCانجام گرفت .تیپصبندی مولکولی ایزولهصها نیز با روشPCR -REPانجام شد .تست حساسیت ضدمیکروبی نشان داد که بیشترین مقاومت در برابر آنتیصبیوتیکصهای آزترئونام( (۰۹۷ ، سفتازیدیم( (۹۳ ، سفپیم( (۹۳ ، تیکارسیلین( (۹۳ ، سیپروفلوکساسین ( (۹۳ و آمپیصسیلین-سولباکتام ( (۹۳ بوده در حالی که بیشترین حساسیت را به ترتیب در برابر آنتیصبیوتیکصهای تایجیسایکلین( (۶۸ ، توبرامایسین( (۳۲ ، آمپی-سیلین-سولباکتام( (۲۸ ، آمیکاسین ( (۲۱ و کارباپنمصها ( (۱۵ مشاهده گردید .علاوه بر این، ۹۳ و ۸۶ از نمونهصها سطح MICبالا (۲۵۶ میکروگرم/میلیصلیتر (برای سفتازیدیم و سفپیم نشان دادند .از ایزولهصهای A. baumannii ۷/۱۰ مولدی ESBL بودند و ۳/۱۳ ، ۷/۲۶ و ۶۴ از ایزولهصها به ترتیب ژنصهایTEM ، PER و IS/ampC را حمل میصکردندPCR -. REPدر ایزولهصهای A. baumannii مقاوم نشان داد که کلاسترهای Aو Bدر ایزولهصهای مولد ESBL غالب است .ژنصهای TEM وPER ، شایعصترین ESBLsشناسای شده در ایزولهصهای A. baumannii مقاوم بودند .علاوه بر این، حضور IS در بالادست ژن ampC در ایزولهصهای A. baumannii سبب افزایش بیش از حد بیان AmpC شده و در نتیجه مقاومت به سطح سفتازیدیم و سفپیم بالا میصرود
level ceftazidime resistance-expression of AmpC, resulting in high-producing isolates. TEM and PER was the most prevalent ESBLs genes among multi resistant A. baumannii isolates. Moreover, presence of an insertion sequence upstream of ampC in A. baumannii clinical isolates has the potential to cause over-PCR in resistant of A. baumannii isolates showed clusters A and B were predominant among ESBL-1 and IS/ampC, respectively. The REP-sulbactam (n = 21, 28 ), amikacin (n = 16, 21 ), and carbapenems (n = 11, 15 ). In addition, 93 and 86 of isolates showed a high MIC level (256 g/ml) for ceftazidim and cefepime, respectively. 10.7 of isolates were found to be ESBLs producer. 13.3 , 26.7 and 64 of isolates carried TEM, PER-sulbactam (93 ), ciprofloxacin (93 ) and ticarcillin (93 ) too, the lowest resistance rate was against tigecycline (n= 51, 68 ), followed by tobramycin (n=24, 32 ), ampicillin-PCR. Antimicrobial susceptibility testing showed that the highest resistance rate was against azteronam (97 ), ceftazidim (93 ), cefepime (93 ), ampicillin-test strips. The ESBL phenotype was confirmed by means of the double disk diffusion method. Under standard PCR conditions, amplification of PER, TEM, VEB, SHV and IS/ampC genes were performed. Molecular typing of isolates was determined by REP-lactamase genes (PER, TEM, VEB, SHV) and IS/AmpC among A. baumannii genotypes isolated from nosocomial infections using phenotypic and PCR methods and their correlation with the level of ceftazidime and cefepime MIC values. Standard biochemical tests were used for identification of isolates. Genomic species of Acinetobacter spp. were confirmed by Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis (ARDRA). PCR products of 16S rRNA were digested with AluI, MboI and HhaI restriction enzymes. The disk diffusion method was employed to evaluate susceptibility to the antimicrobial agents. MIC values of the ceftazidime and cefepime were determined by E- The global increase in multidrug resistance of A. baumannii has created widespread problems in the treatment of patients in intensive care units (ICUs) and burn unit. In this study prevalence and diversity of extended spectrum beta