بررسی ارتباط بین فعالیت آنزیم مرکاپتو پیروات سولفور ترانسفراز، هیدروژن سولفید و تیول تام منی با ویژگی های اسپرم در گاو
فائزه شکور
دامپزشکی
۱۴۰۰
۹۷ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
دامپزشکی بیوشیمی بالینی
۱۴۰۰/۰۶/۱۷
امروزه ناباروری به یکی از مشکلات بزرگ اجتماعی – بهداشتی تبدیل شده است و آمار افراد مبتلا به این عارضه در کشورهای در حال توسعه رو به رشد است. یکی از عوامل اصلی ایجاد ناباروری پدیده استرس اکسیداتیو می باشد. با توجه به حساس بودن اسپرم در برابر استرس اکسیداتیو و رادیکال های آزاد طبیعتا اثرات مخرب شدیدی حاصل از افزایش استرس اکسیداتیو موجب ناباروری می شود. آنزیم مرکاپتوپیروات سولفور ترانسفراز (MPST) از آنزیم های خانواده سولفور ترانسفراز با 2 .1 .8 .2 EC می باشد. این آنزیم به دلیل نقشی که در تولید هیدروژن سولفید دارد می تواند در تحریک فسفریلاسیون اکسیداتیو و تولید انرژی در سلول ها ایفای نقش نماید. در این تحقیق هدف بررسی ارتباط فعالیت آنزیم MPST با هیدروژن سولفید و تیول تام و ارتباط آن ها با شاخص های اسپرمی از جمله حرکت اسپرم، تعداد اسپرم، مورفولوژی اسپرم و زنده مانی اسپرم در گاو می باشد. جهت این عمل 5 راس گاو سالم 5-2 ساله نژاد هلشتاین و آماده جفت گیری به عنوان نمونه مورد استفاده قرار گرفت. 5 نمونه مایع منی از هرگاو با فاصله زمانی دو بار در هفته به وسیله واژن مصنوعی گرفته شد. پس از جمع آوری نمونه ها پارامترهای اسپرمی از جمله حرکت اسپرم، غلظت اسپرم، درصد زنده مانی اسپرم و مورفولوژی اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین پس از جداسازی سمینال پلاسما، فعالیت آنزیم MPST ، میزان تیول تام و میزان سولفید هیدروژن اندازه گیری گردید. سپس از تست پیرسون برای بررسی ارتباط بین فعالیت آنزیم، تیول تام و سولفید هیدروژن با شاخص های اسپرمی استفاده گردید. برای بررسی تفاوت پارامترهای اسپرمی بین گاو ها از آنالیز یک طرفه ANOVA و تست توکی با نرم افزار SPSS16 استفاده گردید. نتایج این تحقیق نشان داد که: متوسط میزان فعالیت آنزیم MPST، میزان تیول تام و سولفید هیدروژن در پلاسمای منی گاو به ترتیب برابر با U/mg prot 0.029 ± 0.004 ، nmol/mg prot 2.69±0.36و M 23.84 ± 3.7 می باشد. همچنین بین میزان فعالیت آنزیم MPST با میزان سولفید هیدروژن پلاسمای منی و میزان حرکت اسپرم همبستگی مثبت و معنی داری بترتیب در حدود (048/0=, p 369/0= r) و (046/0=, p 402/0= r) مشاهده شد. بین فعالیت آنزیم MPST پلاسمای منی با غلظت اسپرم و زنده مانی اسپرم همبستگی مثبت و با مورفولوژی غیر طبیعی اسپرم همبستگی منفی ولی غیرمعنی دار مشاهده شد (p<0.05). همچنین بین سطح سولفید هیدروژن با میزان حرکت اسپرم و میزان تیول تام پلاسمای منی همبستگی مثبت و معنی داری به ترتیب در حدود (001/, p< 781/0= r) و (049/0=, p 370/0= r) مشاهده شد. این نتایج بیانگر این نکته است که وجود آنزیم MPST و محصول آن یعنیH2S جهت حرکت اسپرم در گاو بسیار مهم و حیاتی است.
Nowadays, infertility has become a major socio-health problems all over the world and the number of people with this complication is growing in developing countries. Oxidative stress is one of the main causes of the infertility. Sperms are very sensitive to the oxidative stress and free radicals that can lead to destructive effects and infertility. Mercaptopyruvate sulfurtransferase enzyme (MPST; EC 2.8.1.2) belongs to the transferase family. Due to its role in the production of hydrogen sulfide, this enzyme can play a main role in stimulating oxidative phosphorylation and energy production in cells. The main objective of the present study was to investigate the relationship between MPST enzyme activity with hydrogen sulfide and total thiol and also, their relationship with sperm parameters such as sperm motility, count, morphology and survival in caw. For this purpose, 5 healthy and Holstein cows ready for mating were used as samples. 5 semen samples were taken from each cow twice a week by using an artificial vagina. After collecting the samples, sperm parameters such as motility, concentration, survival percentage and morphology were evaluated. Then, the seminal plasma was separated and the activity of MPST enzyme and total thiol and hydrogen sulfide contents were measured. Subsequently, Pearson test was used to investigate the relationship between enzyme activity, total thiol and hydrogen sulfide contents with sperm parameters. In order to investigate the differences in sperm parameters between 5 studied cows, one-way ANOVA analysis and Tukey test were performed by using SPSS16 software. The obtained results of this study showed that the average activity of MPST enzyme, total thiol and hydrogen sulfide contents in bovine seminal plasma are equal to 0.029 ± 0.004 U/mg prot, 2.69±0.36 nmol/mg prot and 23.84 ± 3.7 μM, respectively. Also, a positive and significant correlation was observed between MPST enzyme activity with hydrogen sulfide content in seminal plasma and sperm motility which were about (p=0.048, r=0.369) and (p=0.046, r=0.402), respectively. On the other hand, there was a positive correlation between MPST enzyme activity in seminal plasma with sperm concentration and sperm viability and a negative but non-significant correlation with abnormal sperm morphology (p <0.05). Also, between hydrogen sulfide level and sperm motility and total thiol level of seminal plasma a positive and significant correlation was observed to be (r = 0.781, p <0.001) and (r = 0.370, p = 0.049), respectively. These results indicated that the presence o
The relationships between semen mercaptopyruvate Sulfurtransferase activity, hydrogen sulfide and total thiol with spermatological parameters in bulls