عنوان

بررسی ارتباط بین فعالیت آنزیم رودنیز و تیول تام مایع منی با ویژگیهای اسپرم در گاو

پ۲۵۸۵۳

per

بررسی ارتباط بین فعالیت آنزیم رودنیز و تیول تام مایع منی با ویژگیهای اسپرم در گاو

صغرا کیماسی

دامپزشکی

۱۴۰۰

۹۰ص.

سی دی

کارشناسی ارشد

بیوشیمی بالینی

۱۴۰۰/۰۳/۳۰

ناباروری یکی از جدی‌ترین مشکلات اجتماعی-پزشکی-بیولوژیکی است که، در سراسر جهان برای اکثر کشورها به وجود آمده است. مطالعات نشان داده است که، فاکتور‌های مردانه از جمله نقص در اسپرماتوژنز و عملکرد اسپرم در حدود نیمی از موارد ناباروری را شامل می‌شود. مطالعات بر روی ویژگی‌های اسپرم و ارتباط آن با عواملی همچون مواد معدنی، ویتامین‌ها، برخی هورمون‌ها و آنزیم‌ها به اثبات رسیده است. رودنیز یک آنزیم فراگیر است که، در همه موجودات زنده از باکتری تا انسان وجود دارد و عملکرد‌های بیولوژیکی مختلف از جمله، نقش در سم‌زدایی یون سیانید، شکل‌گیری مراکز آهن-گوگرد، متابولیسم انرژی و تولید ATP، بیوسنتزتیامین، تاثیر بر فعال‌سازی آنزیم‌هایی مانند سوکسینات‌دهیدروژناز وNADH-دهیدروژناز، تقویت و انتقال سیگنال‌های سلولی، حفظ استخر‌های سولفان، تولید سولفید هیدروژن و عمل به عنوان تیوردوکسین‌ اکسیداز را ایفا می‌کند. با توجه به نقش‌های متعدد و مهم آنزیم رودنیز در سیستم‌های زیستی، هدف از این تحقیق بررسی فعالیت آنزیم رودنیز و تیول تام مایع منی و ارتباط آن با پارامتر‌های اسپرمی در گاو می‌باشد. جهت این عمل از تعداد 6 راس گاو نر هلشتاین و آماده جفت گیری با فواصل زمانی 2 بار در هفته به میزان 5 بار نمونه‌گیری منی انجام گردید و سریعا پارامتر‌های اسپرمی از جمله تحرک اسپرم، غلظت اسپرم، درصد زنده‌مانی و مورفولوژی اسپرم در آنها بررسی گردید. همچنین فعالیت آنزیم رودنیز، میزان تیول تام و پروتئین تام پلاسمایی منی به ترتیب از روش‌های رنگ‌سنجی سوربو، رنگ‌سنجی المن و روش لوری اندازه‌گیری گردید. از تست پیرسون برای بررسی ارتباط بین فعالیت آنزیم رودنیز و تیول تام با پارامتر‌های اسپرمی استفاده گردید. برای بررسی تفاوت پارامتر‌های اسپرمی و فعالیت آنزیم رودنیز و میزان تیول تام از آنالیز یک طرفه ANOVA و تست Tukey از نرم افزار 16 SPSS استفاده شد. نتایج نشان داد که، میزان متوسط فعالیت آنزیم رودنیز و تیول تام پلاسمای منی گاو در این مطالعه به ترتیب برابر با U/mg prot 013/±0 08/0 و nmol/mg prot38/0 71±/2 می‌باشد. همچنین 1- یک همبستگی مثبت و معنی‌داری در حدود (043/0p= ، 372 /0 r =) بین رودنیز پلاسمای منی و تیول‌ تام پلاسمای منی در نمونه‌های منی گاو وجود دارد. 2 - یک همبستگی مثبت و معنی‌داری در حدود(011/0p= ، 458/ 0 r =) بین رودنیز پلاسمای منی و تحرک اسپرم در نمونه‌های منی گاو وجود دارد. 3- یک همبستگی مثبت و قوی و معنی‌داری در حدود (003/0p= ، 527/ 0 r =) بین رودنیز پلاسمای منی و غلظت اسپرم در نمونه‌های منی گاو وجود دارد. 4- یک همبستگی مثبت و معنی‌داری در حدود (010/0p= ، 465/ 0 r =) بین رودنیز پلاسمای منی و درصد زنده‌مانی اسپرم در نمونه‌های منی گاو وجود دارد. 5- در این مطاالعه یک همبستگی منفی بین فعالیت آنزیم رودنیز پلاسمای منی و اسپرم غیر طبیعی مشاهده شد اگر چه معنی‌دار نبود(274/0p= ، 207/ 0- r =). همچنین ارتباط معنی‌داری بین تیول تام و شاخص‌های اسپرمی در این تحقیق مشاهده نگردید. این نتایج به طور مشخص نشان می‌دهد که، ارتباط قابل توجه و معنی‌داری بین فعالیت آنزیم رودنیز و شاخص‌های اسپرمی در گاو وجود دارد، لذا می‌توان از طریق اندازه‌گیری فعالیت آنزیم رودنیز به عنوان یک معیار در بررسی کیفیت منی در گاو استفاده نمود

Infertility is an important worldwide socio-demographic and medical-biological problem for most countries. Studies have shown that male factors, including defects in spermatogenesis and sperm function, account for about half of all infertility cases. Studies on the characteristics of sperm and its association with factors such as minerals, vitamins, some hormones and enzymes have been proven.The enzyme rhodanese is an ubiquitous enzyme present in all living organisms from bacteria to man and has a variety of biological functions, including its role in cyanide detoxification, formation of iron–sulfur centers, participation in energy metabolism and ATP production, thiamin biosynthesis, affects activates of enzymes like succinate dehydrogenase and NADH dehydrogenase, transduction and amplification of cellular signals, maintenance of the sulphane pools, hydrogen sulfide production and function as a thioredoxin oxidase. Considering the numerous and important roles of rhodanese enzyme in biological systems, the aim of this study was to investigate the activity of rhodanese enzyme and total thiol of semen and its relationship with sperm parameters in bull. The direction of this action, semen samples were taken from 6 Holstein bulls ready for mating at intervals of 2 times a week at the rate of 5 times and sperm parameters such as sperm motility, sperm concentration, viability percentage and sperm morphology were immediately evaluated. Also, rhodanese enzyme activity, total thiol level and total plasma semen protein were measured by Sorbo colorimetric, Ellman colorimetric and Lowry method, respectively. Pearson test was used to evaluate the relationship between rhodanese enzyme activity and total thiol with sperm parameters. One-way ANOVA analysis and Tukey test using SPSS 16 software were used to investigate the differences between sperm parameters and rhodanese enzyme activity and total thiol level .The results showed that the mean activity of rhodanese enzyme and total thiol of plasma of semen of bull in this study were equal to 0.08 ± 0.013 U/mg prot and 2.71 ± 0.38 nmol/mg prot, respectively. Also 1-A positive and significant correlation was observed (r=0.372, p=0.043) between seminal plasma rhodanese activity and seminal plasma total thiol in bull semen samples. 2-A positive and significant correlation was observed (r=0.458, p= 0.011) between seminal plasma rhodanese activity and sperm motility in bull semen samples. 3-A positive and strong and significant correlation was observed (r=0.527, p=0.003) between seminal plasma rhodanese activity and sperm concentration in bull semen. 4-A positive and significant correlation was observed (r=0.465, p=0.010) between seminal plasma rhodanese activity and sperm viability in bull semen samples .5- In this study, it was observed that there was a negative correlation between seminal plasma rhodanese activity and abnormal sperm ,although this was not significant (r=-0.207, p=0.274). Also, no significant relationship was observed between total thiol and sperm parameters in this study. These results clearly show that there is a remarkable and significant relationship between rhodanese enzyme activity and sperm parameters in bull. Therefore, it can be used by measuring the activity of rhodanese enzyme as a criterion in assessing the quality of semen in bull.

The relationships between semen rhodanese activity and total thiol and spermatological parameters in bulls

‏کیماسی،

‏‏صغرا

تهيه کننده

‏ طایفی نصرآبادی،

‏اسد پور،

‏حسین

رضا

استاد راهنما

استاد مشاور

‏ تبریز