عنوان

بررسي اثرات محافظتي وراپامیل و هیدروکورتیزون و ترکیب آنها بر آسیب کلیوی ناشي از ایسکمي-رپرفیوژن در رت

پ۲۵۳۶۹

per

بررسي اثرات محافظتي وراپامیل و هیدروکورتیزون و ترکیب آنها بر آسیب کلیوی ناشي از ایسکمي-رپرفیوژن در رت

سید امیر حسینی

دامپزشکی

۱۴۰۰

۷۴ص.

سی دی

دکتری

دامپزشکی

۱۴۰۰/۰۶/۲۸

چکیده: اکسيژن رسانی بهينه بافت براي عملكرد طبيعی آن ضروري است. اکسيژن رسانی کمتر از حد مطلوب یا ایسكمی یک بافت باعث هایپوکسی سلول هاي آن بافت ميشود. پس از ایسكمی طولانی مدت، محصولات متابوليكی سلول ها در داخلشان تجمع یافته و باعث اسيدوز متابوليک می شوند. وقتی خونرسانی دوباره برقرار شود، التهاب موضعی و توليد گونه هاي اکسيژن واکنش پذیر( ROS) افزایش می یابد و منجر به آسيب ثانویه می شود. آسيب ناشی از ایسكمی -رپرفيوژن (IRI) کليه ممكن است در موارد مختلف بالينی به دنبال افت گذرا در جریان خون در کليه مثلا بدنبال پيوند کليه، نفرکتومی نسبی، آنژیوپلاستی شریان کليه، باي پس قلبی ریوي و جراحی باي پس آئورت رخ دهد. به نظر می رسد که افزایش کلسيم داخل سلولی، افزایش رادیكال هاي آزاد اکسيژن و توليد واسطه هاي التهابی توسط لوکوسيت ها جزو مكانسيم هاي مهم آسيب سلولی باشد که می تواند موجب آسيب ناشی از رپرفيوژن شود. بنابراین داروهاي بلوک کننده کانال کلسيم مانند وراپاميل 3 و همچنين داروهاي گلوکوکورتيكوئيدي مانند هيدروکورتيزون 4 هر یک با مكانيسم جداگانه اي می توانند باعث حفاظت بافت هاي بدن عليه آسيب ناشی از ایسكمی –رپرفيوژن شوند. ولی تاکنون ميزان اثر محافظتی وراپاميل و هيدروکورتيزون در ترکيب با هم بخصوص در آسيب ناشی از ایسكمی –رپرفيوژن کليه بررسی نشده است. درمطالعه حاضر تعداد 30 سر رت نر نژاد ویستار در پنج گروه مساوي شش تایی 1-گروه ساختگی یا sham 2- گروه ایسكمی-رپرفيوژن 3-گروه وراپاميل (1.25mg/kg IP) 4-گروه هيدروکورتيزون (mg/ IP kg50) 5- گروه ترکيب وراپاميل و هيدروکورتيزون (با دوزهاي اشاره شده) مورد مطالعه قرار گرفتند. رت ها پس از بیهوشی استنشاقی با هالوتان اسکراب شدند و دسترسی به محوطه ی بطنی و کلیه ها با رهیافت پاراکاستال انجام شد. ایسکمی کلیوی دوطرفه با مسدود کردن عروق کلیه به مدت 30 دقیقه و رپرفیوژن بمدت24 ساعت انجام شد. تجویز دارو در گروه های درمان پس از اتمام مدت ایسکمی و قبل از برداشت کلامپ ها انجام شد. پس از تمام شدن مدت رپرفیوژن رت ها مجددا بیهوش شدند و نمونه خونی و بافتی تهیه شد. نمونه سرم برای اندازه گیری اوره (BUN)، کراتینین سرم (SCr) آلانین ترانس آمیناز(ALT)، آسپارتات ترانس آمیناز(AST) و مالون¬دی آلدهید (MDA) و همچنین نمونه گیری بافتی برای اندازه گیری میزان آنزیم های مربوط به استرس های اکسیداتیو من جمله مالون دی آلدهید(MDA) و میزان آنتی اکسیدان سوپر اکسید دسموتاز(SOD) به آزمایشگاه ارسال شد. در همه-ی گروه های درمان، سطح اوره و کراتینین سرم نسبت به گروه I/R کاهش یافت. هرچند برخلاف گروه های دیگر درمان، در گروه درمان با وراپامیل، این کاهش معنی دار نبود. در هیچکدام¬یک از گروه های درمان، سطح AST وALT سرم تغییر معنا داری نسبت به گروه I/R نداشت. در همه¬ی گروه های درمان سطح MDA نسبت به گروه I/R کاهش معنا داری یافت. در همه¬ی گروه های درمان سطح سوپراکسید دسموتاز(SOD) نسبت به گروه I/R افزایش یافت. هرچند که در گروه درمان با ترکیب وراپامیل و هیدروکورتیزون این کاهش معنی دار نبود. تفاوت بین گروه های درمان ترکیبی وراپامیل و هیدروکورتیزون با گروه های دیگر درمان به غیر از غلظت بافتی MDA، در بقیه شاخص ها معنی دار نبود. و برای آنالیز داده ها از نرم¬ افزارهای SPSS وExcel استفاده ¬شد.یافته های اين مطالعه بيانگر آن بود كه وراپامیل و هیدروکورتیزون در صورتی که پس از شروع ایسکمی کلیوی تجویز شوند، اثرات مطلوبی در محافظت از کلیه در مقابل آسیب ناشی از ایسکمی-رپرفیوژن بترتیب بمدت 30 دقیقه و24 ساعت خواهند داشت. و همچنین مشخص شد که اثرات ترکیب این دو دارو نسبت به استفاده جداگانه از هرکدام از آنها تفاوت قابل توجهی نداشت.

Abstract: Optimal oxygenation of the tissue is essential for its normal functioning. Under-oxygenation or ischemia of a tissue causes hypoxia of the cells of that tissue. After prolonged ischemia, the metabolic products of the cells accumulate inside them, causing metabolic acidosis. When blood flow is restored, local inflammation and the production of reactive oxygen species (ROS) increase, leading to secondary damage .Ischemia-reperfusion (IR) damage to the kidney may occur in a variety of clinical cases following a transient decrease in blood flow to the kidney, such as following a kidney transplantation, partial nephrectomy, renal artery angioplasty, and aortic bypass surgery. Increases of intracellular calcium, increases of oxygen free radicals, and the production of inflammatory mediators by leukocytes appear to be important mechanisms of cell damage that can cause reperfusion damage. Therefore, calcium channel blockers such as verapamil as well as glucocorticoid drugs such as hydrocortisone, each with a separate mechanism can protect body tissues against ischemia-reperfusion injury. However, the protective effect of verapamil and hydrocortisone in combination with each other, especially in ischemic-reperfusion injury, has not been investigated. In the present study, 30 male Wistar rats in five equal groups of six: 1- Dummy group or sham 2- Ischemia-reperfusion(I/R) group 3- Verapamil group (1.25 mg / kg IP) 4- Hydrocortisone group (50 mg / kg IP) 5- Group The combination of verapamil and hydrocortisone (at the indicated doses) will be studied. Rats were scrubbed after inhalation anesthesia with halothane and access to the peritoneal cavity and kidneys was done using a paracostal approach. Bilateral renal ischemia was performed by blocking renal vessels for 30 minutes and reperfusion for 24 hours. The drug was administered to the treatment groups after the end of the ischemia period and before the clamps were removed. At the end of the reperfusion period, the rats were anesthetized again and blood and tissue samples were taken. Serum samples for measurement of urea (BUN), serum creatinine (SCr) alanine transaminase (ALT), aspartate transaminase (AST) and malondialdehyde (MDA) as well as tissue sampling to measure stress enzymes Oxidants such as malondialdehyde (MDA) and the amount of antioxidants such as superoxide dismutase (SOD) will be sent to the laboratory. In all treatment groups, serum urea and creatinine levels decreased compared to the I / R group. However, unlike other treatment groups, this reduction was not significant in the verapamil treatment group. In none of the treatment groups, serum AST and ALT levels did not change significantly compared to the I / R group. In all treatment groups, the level of MDA significantly decreased compared to the I / R group. In all treatment groups, superoxide dismutase (SOD) levels increased compared to the I / R group. However, in the treatment group with the combination of verapamil and hydrocortisone, this reduction was not significant. The difference between verapamil and hydrocortisone combination therapy groups with other treatment groups except for tissue MDA concentration was not significant in other indicators. SPSS and Excel software will be used to analyze the data. This study indicates that verapamil and hydrocortisone, if administered after renal ischemia, have favorable effects in protecting the kidney against ischemia (30 minutes) and reperfusion (24 hours) injury. It was also found that the effects of the combination of these two drugs are not significantly different from the separate use of each of them.

Assessment of protective effects of Verapamil and Hydrocortisone alone and in combination against Renal Ischemia-Reperfusion Injury in rat

‏حسینی،

‏ سید امیر

تهيه کننده

‏جارالمسجد،

‏شبستری،

‏سید حسین

‏سید علی

استاد راهنما

استاد مشاور

‏ تبریز