۸۴۹۱پ
per
مطالعه اثرات ضد سرطانی کاربنوکسولون(Carbenoxolone) در رده‌صهای سلولی سرطان خون
/سروش مؤسس غفاری
تبریز:دانشگاه تبریز،دانشکده علوم جانوری،گروه بیوشیمی
۱۰۱ص.
چاپی
کارشناسی ارشد
بیوشیمی
۱۳۸۹/۱۱/۲۵
تبریز:دانشگاه تبریز،دانشکده علوم جانوری،گروه بیوشیمی
لوسمی یک بیماری بدخیم است که در اثر رشد کنترل نشده‌صی سلول‌صهای بنیادی/پیش ساز خونی ایجاد می‌صشود .انواع مختلفی از لوسمی گزارش شده است که در این میان می توان به لوسمی میلوئید حاد (AML) و لوسمی میلوئید مزمن (CML) اشاره نمود .اگرچه تاکنون داروهای مختلفی برای درمان لوسمی پیشنهاد شده‌صاند، اما هیچ کدام منجر به بهبودی کامل بیماری نگردیده است .از اینرو تلاش‌صهای بسیاری برای یافتن داروصهای جدید که اثرات جانبی کمتر و توانائی القاء آپوپتوزی بیشتری دارند، در جریان است .اخیرا اثرات ضد سرطانی یک داروی ضد التهاب به نام کاربنوکسولون(CBX) [Carbenoxolon[ ، در چند رده‌صی سلولی سرطانی گزارش شده است .در این پایان نامه، برای اولین بار اثرات آنتی لوسمیک کاربنوکسولون در رده های سلولی K۵۶۲ و NB۴ به ترتیب به عنوان مدل های آزمایشگاهی برای CML ولوسمی پرومیلوسیتیک حاد( APL - زیر نوع AML M۳) مورد بررسی قرار گرفت .به این منظور، سلول‌صهایK۵۶۲ و NB۴ انسانی پس از کشت، تحت تأثیر کاربنوکسولون در غلظت ها و زمان های مختلف۱۲ - (۴۸ساعت (قرار گرفت .به منظور بررسی درصد مهار رشد و زیستایی به ترتیب از آزمون دفع رنگ تریپان بلو وآزمون نمک تترازولیوم (MTT) و برای بررسی آپوپتوز از میکروسکوپ فلورسنس و الکتروفورز استفاده شد .اثرات کاربنوکسولون بر بیان ژنSurvivin و واریانت های آن با استفاده از تکنیکPCR - RTنیمه کمی بررسی شد .نتایج بدست آمده نشان داد که ۱) :کاربنوکسولون سبب مهار رشد سلول‌صهای K۵۶۲ و NB۴ به صورت وابسته به زمان و غلظت می‌صشود ۲) .کاربنوکسولون سبب القاء آپوپتوز در هر دو رده ی سلولی به صورت وابسته به زمان و غلظت می‌صگردد ۳) .کاربنوکسولون (۱۵۰ میکرو مولار (سبب کاهش بیان ژن Survivin و واریانت پیرایشی ضد آپوپتوزیEx۳ - Survivinپس از ۲ و ۴ ساعت در سلول‌صهایK۵۶۲ شده، در حالیکه با افزایش زمان تیمار (۶و۱۲ساعت (و با وقوع فرآیندآپوپتوز بیان این ژن‌صها( تا سطح بیان آن‌صها در سلول‌صهای کنترل) افزایش می‌صیابد .با توجه به اثر کاربنوکسولون دراثرات مهار رشدی، القاء آپوپتوزی و نیز کاهش بیان ژن Survivin وEx۳ -Survivinاین دارو می‌صتواند به عنوان یک کاندیدای بالقوه برای مطالعات بیشتر در درمانCML و APL مورد بررسی قرارگیرد
Leukemia is a malignant disease caused by uncontrolled proliferation of blood stem/progenitor cells. Several types of leukemia such as acute myeloid leukemia (AML) and chronic myeloid leukemia (CML) have been described. Although, different drugs for the treatment of leukemia have been proposed, complete remission is not seen. Then, many efforts are in progress to find new drugs witch has less side effects and more apoptotic activity. Recently, it has been reported that an anti-inflammatory drug, named Carbenoxolone (CBX), has anti-tumor effects in several cancer cells. In this thesis, the growth inhibitory and apoptotic effects of CBX in human leukemia K562 and NB4 cell lines as experimental models of CML and acute promyelocytic leukemia (APL-M3 subtype of AML) respectively, have been investigated. In this context, K562 and NB4 cells were cultured and treated by different concentrations of CBX for various time intervals (12-48 h). Growth inhibitory and cytotoxic effects of CBX were assayed by trypan blue dye exclusion and MTT test, respectively. Apoptosis was detected by fluorescent microscope and DNA fragmentation assay. Effects of CBX on expression level of Sunvivin and Survivin-?Ex3 has been studied in K562 cells by semiquantative RT-PCR. Our results were shown that (1) CBX induces growth inhibition in K562 and NB4 cell lines in a dose and time dependent manner. (2) CBX induces apoptosis in both of cell lines. (3) CBX (150 M) down regulated of Survivin and Survivin-?Ex3 in K562 cells, after 2-4 h treatment times. However, the expression level of Survivin and Survivin-?Ex3 were increased (to level of control cells) after longer treatment times (6-12 h). Attain to growth inhibitory, apoptotic and down-regulatory effects of CBX on Survivin and Survivin-?Ex3 expression, the drug can be effort as a potential candidate for further studies in CML and APL treatment.
Apoptosis
Carbenoxolone
Leukemia
Growth inhibition
مؤسس غفاری،سروش
موسوی،محمدامین، استادراهنما
اسدی،مسعود، استادمشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
