هیستوپاتولوژی و بررسی بیان ژن TLR4 در گربه های مبتلا به درماتوفیتوزیس در شهر تبریز
علیرضا سلیمی
دامپزشکی
۱۴۰۰
۱۲۱ص.
سی دی
دکتری
دامپزشکی
۱۴۰۰/۰۹/۰۳
بیماری های قارچی پوست محدود به درماتوفیت ها نیستند ولیکن درماتوفیتوزيس مهم ترین بیماری قارچی پوست است. با این حال با توجه به اهمیت و گستردگی این بیماری هنوز نقش ایمنی ذاتی در درماتوفیتوزيس بطور کامل مشخص نیست. معمولا در برخورد با عوامل پاتوژن رسپتور های خاصی که روی سلول ها قرار دارند و مربوط به ایمنی ذاتی هستند این عوامل را شناسایی میکنند و طیف وسیعی از سیتوکین ها را تولید می نمایند. گیرنده های TLR خصوصاTLR4 گیرنده اصلی در بین سلول های فاگوسیتی است که اجزای قارچ را تشخیص می دهد. اگر این مکانیزم ها برای جلوگیری از تهاجم قارچ ناکافی باشند، سیستم ایمنی اکتسابی فعال می شود. بنابراین، این مطالعه برای بررسی بیان ژن TLR-4 در گربه های مبتلا به درماتوفينوزيس انجام گرفت و همچنین فراوانی عفونت درماتوفیتوزیس در گربه های شهر تبریز بررسی شد. از میان گربه های ارجاعی به کلینیک های دامپزشکی تبریز تعداد 60 گربه مشکوک به قارچ بودند که از آن ها نمونه برداری به عمل آمد و در20 مورد از موارد مشکوک وجود قارچ تایید شد. بعد از آزمایشهای میکروسکوپی و کشت قارچ، ناحيه ITS1-5.8S-ITS2 از rDNA از گونههای مرجع متفاوت درماتوفیت با استفاده از پرایمرهای قارچی عمومی ITS1 و ITS4 تکثیر شد. محصولات PCR به منظور تعیین توالی مورد مطالعه قرار گرفتند. همچنین از نواحی آلوده به قارچ در گربه ها دو پانچ پوستی گرفته شد که یکی برای تهیه لام پاتولوژی و از دیگری برای انجام Real-time PCR و مطالعه بیان ژن TLR4 استفاده شد. بصورت عملی مشخص شد که ITC-PCR همراه با تعیین توالی، روشی مفید برای شناسایی و تفکیک گونه های مختلف بیماری زا بوده و می توان از آن حتی برای تشخیص سریع گونه های درماتوفیت استفاده کرد. همچنین افزایش بیان ژن TLR-4 در نمونه های آلوده ی قارچی نسبت به سالم مسیر ایمنی ذاتی در مقابله با درماتوفیتوزيس را تا حدی برای ما روشن ساخت.
AbstractObjectives: Dermatophytosis is a common skin disease in cats and there are few studies on the role of innate immune response in dermatophytosis. Fungal pathogens are detected by specific receptors on cells from the innate immune system. The recognition of pathogen fungal structures by pattern recognition receptors (PRRs) leads to the secretion of pro-inflammatory cytokines by immune cells. Toll-like receptors (TLRs) 4 is the main PRRs that recognize fungal components.The aim of this study was to evaluate the expression of TLR-4 in feline dematophtosis lesions.Materials & Methods: A total of 60 cats with skin lesions were examined. Hair and skin samples were examined by microscopy with 20% KOH and cultured on SCC. Also two skin biopsies were taken by sterile, single use biopsy punch from margins of annular lesions for pathology and Real-time PCR studies.Results: Dermatophytes species were found in 20 (33.33%) samples and Microsporum canis were isolated from cultures. based on sequencing of the ITS1-5.8S-ITS2 fragment type Microsporum canis (n: 20) were dermatophytes isolated in the study. Also in Pathology lams study we find favus exoterix and endotrix form of dermatophytosis. Real time PCR showed the increase of TLR-4 mRNA levels in skin biopsies of cats with dermatophytosis. Conclusion: Increased expression of TLR-4 mRNAs in feline skin biopsies suggests that these receptors are involved in the host immune response through the recognition of dermatophytosis.
Histopathology and a survey on TLR-4 gene expression in feline dermatophytosis in Tabriz