۵۵۷۸پ
per
بررسی پلی‌مورفیسم ژن spa در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از نمونه‌های دامی در تبریز
/مهدی طهماسبی
: علوم طبیعی
، ن.ا
۱۲۵ ص
چاپی
فاقد اطلاعات کامل
کارشناسی ارشد
زیست‌شناسی
۱۳۹۰/۰۶/۲۵
تبریز
استافیلوکوکوس اورئوس در سطح پوست و غشاهای موکوسی به خصوص در بخش فوقانی لوله‌ی تنفسی و گوارشی حیوانات یافت می‌شود .پروتئین A یکی از مهمترین فاکتورهای بیماری‌زایی استافیلوکوکوس اورئوس می‌باشد .این پروتئین سطحی، متصل به پپتیدوگلیکان بوده و جزء فاکتورهای بیماری‌زای تولید شده در فاز اول بیماری است .رابطه‌ای بین سطح بیان پروتئین A در ایزوله‌های طبیعی و مقاومت آن‌ها نسبت به فاگوسیتوز وجود دارد .ویژگی اصلی پروتئین A توانایی اتصال انتخابی به بخش Fc از ایمونوگلوبولین (IgG) Gو آزاد گذاشتن جایگاه اتصال به آنتی‌ژن می‌باشد .ژن کد کننده‌ی پروتئین (spa) A دارای توالی پلی‌مورفی به نام ناحیه‌ی Xr می‌باشد که از تعداد متغیری از ۳ تا ۱۵ تکرار متوالی واحدهای bp ۲۴ ای تشکیل شده است .تعداد تکرارها با قدرت شیوع استافیلوکوکوس اورئوس رابطه دارد .سوش‌های با بیش از هفت تکرار در ناحیه‌ی Xr تمایل به اپیدمیک بودن دارند در حالی که سوش‌های با تعداد تکرار کمتر یا برابر هفت، سوش‌های غیر اپیدمیک هستند .در این مطالعه ۲۰ نمونه استافیلوکوکوس اورئوس از شیر دام‌های با ورم پستان بالینی، تحت‌بالینی و سالم با روش‌های مرسوم و تست‌های بیوشیمیایی جداسازی گردید .به منظور ارزیابی پلی‌مورفیسم تعداد تکرار در ناحیه Xr ژن spa نمونه‌های جدا شده، از روش PCR استفاده شد .سپس مقدار مقاومت نمونه‌های جدا شده نسبت به چهار آنتی‌بیوتیک رایج به روش استاندارد انتشار دیسک ارزیابی گشت .در مجموع پنج دسته‌ی پلی‌مورف شناسایی شد و بزرگ‌ترین آن‌ها با طول bp ۳۶۵ توالی‌یابی گردید .فراوانی گروه‌های پلی‌مورف مختلف متفاوت می‌باشد و بیشترین فراوانی متعلق به گروه با ده تکرار و پس از آن گروه با هفت تکرار است .در مجموع ۸۰ سوش‌ها با بیش از هفت تکرار در ناحیه‌ی Xr ژن spa و ۲۰ سوش‌ها دارای هفت تکرار بود که این داده‌ها با یافته‌های پیشین مطابق است .به دلیل این که پلی‌مورفیسم‌های حاشیه‌ای یعنی تعداد تکرارهای۶ - ۲و همچنین۱۲ - ۱۵دیده نشد، چنین می‌توان گفت که پلی‌مورفیسم‌های در محدوده‌ی متوسط۷) - (۱۱به طور مستقیم هدف انتخاب قرار می‌گیرند .نتایج تست آنتی‌بیوگرام نشان می‌دهد که مقاومت آنتی‌بیوتیکی سوش‌های جدا شده ارتباطی به نوع پلی‌مورفیسم آن‌ها ندارد و سوش‌های مقاوم و حساس در تمام پنج تایپ جداشده‌ی ژن spa به طور تصادفی حضور دارند .نمونه‌های مطالعه شده حداقل نسبت به یکی از آنتی‌بیوتیک‌های معمول حساس می‌باشند و برای کنترل بیماری می‌توان از آنتی‌بیوتیک مورد نظر استفاده کرد
Staphylococcus aureus is found in skin and mucous membranes, especially in the upper respiratory and digestive tube in animals. Protein A is one of the most important pathogenic factors in Staphylococcus aureus. This surface protein bound to peptidoglycan and among pathogenic factors produced in the first phase of the disease. In natural isolates there is a relationship between the level of protein A expression and resistance to phagocytosis. The major characteristic of protein A is capability of selectively binding to the Fc part of immunoglobulin G (IgG) and leaving antigen-binding site free. The gene that encoding protein A (spa) has Xr polymorphic sequence that composed of the variable number of ۳ to ۱۵ repeats of ۲۴ bp units. Prevalence of Staphylococcus aureus is associated with the number of repeats. Strains with more than seven repeat in Xr tend to epidemic whereas strains with less than or equal to seven repeat are non-epidemic. In this study ۲۰ samples of Staphylococcus aureus from milk of animals with clinical mastitis, subclinical mastitis and without mastitis was isolated by conventional methods and biochemical tests. In order to assess the number of repeat polymorphism in the Xr region of the spa gene PCR method was used. Then resistance of isolates to four common antibiotics was evaluated by the standard disc diffusion method. In total five polymorphic categories was detected and sequencing of their greatest length with ۳۶۵ bp was performed. Frequency of different groups is diverse and most frequency belongs to groups with ten and seven repeats. In total, ۸۰ of strains have more than seven repeats in the Xr region of the spa gene and ۲۰ of strains have seven repeats that this data is consistent with previous findings. Because the number of repetitions ۲-۶ and ۱۲-۱۵ marginal polymorphisms were not observed, it can be said that polymorphisms in the intermediate range (۷-۱۱) are directly selected. Antibiogram test results show that antibiotic resistance of isolated strains has no relation to the type of polymorphism and both resistant and susceptible strains randomly present in all five types of the spa gene. Studied samples are sensitive to at least one of the common antibiotics and therefore we can use effective antibiotic for disease management
طهماسبی، مهدی
حسین پور فیضی،محمدعلی، استاد راهنما
زرینی،غلامرضا، استاد راهنما
شیخ زاده حصاری،فرزام، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
