عنوان

ارائه روش اسپکتروفلوریمتری برای اندازه گیری آلبومین سرم انسانی با استفاده پروب تربیوم-دفراسیروکس یا پروب های دیگر

‭۵۳۴۶پ‬

per

ارائه روش اسپکتروفلوریمتری برای اندازه گیری آلبومین سرم انسانی با استفاده پروب تربیوم-دفراسیروکس یا پروب های دیگر

/امیر رمضانی مقدم

تبریز: دانشگاه تبریز ، دانشکده شیمی ، گروه تجزیه

‮‭۹۴‬ص‬

چاپی

کارشناسی ارشد

شیمی تجزیه

‮‭۱۳۹۰/۱۰/۲۵‬

تبریز: دانشگاه تبریز ، دانشکده شیمی ، گروه تجزیه

کمپلکس‌صهای لانتانیدی) مخصوصا کمپلکس های تربیوم (به علت داشتن خواص ویژه از جمله جابجایی استوکس زیاد، زمان زوال طولانی، حساسیت بالا، دقت خوب، پایداری خوب و گزینش پذیری نسبی می توانند برای اندازه گیری ترکیبات آلی، داروها، اسید های نوکلئیک، پروتئین‌ص ها و آثار یون های خاک نادر در محیط های پیچیده ی بیولوژیکی مورد استفاده قرار گیرند .در این روش لیگاند کمپلکس شده به لانتانید باعث انتقال مؤثر انرژی به تراز برانگیخته ی یون لانتانید شده و فلوئورسانس آن را تشدید می کند .در روش مستقیم آنالیت به عنوان لیگاند عمل می کند که شدت فلوئورسانس متناسب با غلظت آن است .در روش غیر مستقیم شدت فلوئورسانس کمپلکس لانتانیدی)پروب (با افزایش غلظت آنالیت افزایش یا کاهش می‌صیابد که میزان فلوئورسانس افزایش یافته یا کاهش یافته متناسب با غلظت آنالیت است در این مطالعه یک روش اسپکتروفلوریمتری جدید برای اندازه گیری آلبومین سرم انسانی ‮‭(HSA)‬و هپارین با استفاده از تربیوم-دانوفلوکساسین به عنوان پروب فلوئورسانس ارائه شده است).پروب تربیوم-دفراسیروکس نتایج رضایت بخشی بدست نداد (.آزمایش‌ها نشان دادند که در حضور ‮‭HSA‬ وهپارین شدت فلوئورسانس پروب تربیوم-دانوفلوکساسین افزایش می‌یابد .میزان فلوئورسانس افزایش یافته در طول موج تحریک ‮‭nm ۳۴۷‬ و طول موج نشر ‮‭nm ۵۴۵‬ متناسب با غلظت ‮‭HSA‬ و هپارین است .تأثیر‮‭pH‬ ، غلظت بافر، نوع بافر، غلظت تربیوم، غلظت دانوفلوکساسین، دما، ترتیب افزایش معرف ها، زمان، اثر بعضی از حلال های آلی و سوفکتانت‌صهای مختلف بررسی شد و تحت شرایط بهینه، محدوده‌ی خطی‮‭۲/۰-۱۰-M۶-۳/۱-۱۰- M ۶‬وحد تشخیص‮‭۷/۸ -۱۰-M ۸‬، محدوده‌ی خطی‮‭۲/۰ -۱۰-M۶-۴/۱-۱۰ M ۶‬وحد تشخیص‮‭۲/۶-۱۰-۸‬، محدوده‌ی خطی‮‭۲/۰ -۱۰-M۶-۱-۱۰- M ۶‬وحد تشخیص‮‭۱/۸ -۱۰- M۸‬به ترتیب برای‮‭( BSA‬آلبومین سرم گاوی (، ‮‭HSA‬ و ‮‭HSA‬در پلاسما بدست آمد از این روش برای اندازه گیری ‮‭HSA‬ در نمونه ی استاندارد و پلاسمای انسانی استفاده شد . همچنین تحت شرایط بهینه محدوده ی خطی و حد تشخیص‮‭۱/۰ - ppb ۵/۱‬و ‮‭ppb ۶۲/۲۴‬ به ترتیب برای اندازه‌گیری هپارین بدست آمد .از روش پیشنهاد شده برای اندازه گیری هپارین در نمونه استاندارد استفاده شد وهمچنین امکان اندزه گیری آن در نمونه تزریقی بررسی شد

The lanthanide complexes (specially terbium and europium) possessing properties including large stokes shift, long decay times, high sensitivity, good stability, good accuracy and relative selectivity could be used for the determination of organic components, drugs, nucleic acids, proteins and trace amount of rare earth ions in aqueous solutions and biological matrices. In this method the ligand that is complexed with lanthanide ion causes the effective energy transfer to the excited state of lanthanide ion and increases the fluorescence intensity of the lanthanide ion. In the direct assay, the fluorescence intensity is proportional to the analyte's concentration. In the indirect assay, at the presence of analyte the fluorescence intensity of lanthanide complex (probe) increases or decreases with the increased analyte concentration. The enhanced or quenched fluorescence intensity is proportional to the concentration of analyte. In this work a new spectrofluorimetric method was proposed for the determination of Human Serum Albumin (HSA) and Heparin using the terbium-danofloxacin (Tb3+-Dano) complex as a fluorescence probe (The results of the terbium-deferasirox were not satisfied). The experiments indicated that the fluorescence intensity of Tb3+-Dano in the presence of HSA and Heparin increases (enhancement). The enhanced fluorescence intensity at ?ex/?em= 347/545 nm is proportional to the concentrations of HSA and Heparin respectively. The influences of pH, buffer concentration, type of buffer, concentration of terbium, danofloxacin concentration, temperature, time, addition order of the reagents, influence of some organic solvents and various surfactants were investigated and under the optimum conditions the calibration graphs for standard solutions of BSA, HSA and plasma samples of HSA were linear in the range of 0.2-10-6-1.3-10-6 mol L-1, 0.2-10-6-1.4-10-6 mol L-1 and 0.2-10-6-1-10-6 mol L-1 respectively. The detection limits (S/N =3) for BSA, HSA and plasma sample of HSA were 8.7-10-8 mol L-1, 6.2-10-8 mol L-1 and 8.1-10-8 mol L-1, respectively. This method was successfully applied for the determination of HSA in standard sample, human serum plasma. Also under the optimum conditions the linear range and limit of detection of 0.1-1.5 ppb and 24.62 ppb was obtained for the determination of Heparin by the developed method. The proposed method was applied for the determination of Heparin in standard and injection samples

Terbium sensitized luminescence

Danofloxacin

Human serum Albumin

Heparin

رمضانی مقدم، امیر

منظوری، جمشید، استاد راهنما

جویبان، ابوالقاسم، استاد راهنما

امجدی، محمد، استاد مشاور

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی