۱۹۴۱پ
per
اثر تیمارهای هورمونی در کشت لایه نازک سلولی (TCL) یونجه (Medicago sativa) رقم کریساری
/عامر محمدی نسب
تبریز:دانشگاه تبریز
۸۰ص.
:مصور،نمودار۷جدول۳۰*۲۹س.م+لوح فشرده
چاپی
واژه نامه بصورت زیرنویس
کتابنامه ص.:۷۲-۸۷
کارشناسی ارشد
علوم گیاهی سلولی- تکوینی
۱۳۸۸/۰۸/۲۵
تبریز:دانشگاه تبریز
این تحقیق جهت بررسی پاسخ های ریخت زایی لایه نازک سلولی ( TCL)تهیه شده از هیپوکوتیل یک رقم یونجه) کاریساری (به غلظتهای متفاوت۲,۴ - Dو kin انجام گرفت .بذور استریل روی محیط کشت SH کشت شدند .پس از یک هفته قطعات هیپوکوتیل بدست آمده زیر لوپ به ضخامت ۱/۰ - ۵/۰میلیمتر برش داده شدند و به محیط کشت SHحاوی ترکیبات مختلف۲,۴ - Dو) kin با غلظت های صفر، ۵/۰ ، ۰/۱ ، ۵/۱ و ۰/۲ میلی گرم در لیتر (منتقل گردیدند .کال‌های حاصل پس از انتقال به محیط کشت القاء جنین(۲,۴ - Dبالا، kin پائین (بمدت یک هفته، سپس به محیط کشت BOi۲Y منتقل شدند .در نهای کال هاحاوی جنین به محیط کشتMS و حاوی ۵/۰ میلی گرم در لیتر GA۳فیلترشده برای رشد بهتر جنین ها منتقل گردیدند .با توجه به اینکه در تمامی تیمارها، کالزایی ۱۰۰ درصد بود بنابراین کالزایی از TCL هیپوکوتیل از غلظتهای مختلفD- ۲,۴و kinمتاثر نشد .از طرف دیگر، اثر غلظتهای مختلف۲,۴ - D، kin و اثر متقابل بین آنها بر قطر کال معنی داری نبود (<(۰۵/۰p و رشد کالها مستقل از ترکیب هورمونی بخوبی انجام شد .همچنین تعداد جنین در هر کال از نوع هورمون و غلظتهای آن متاثر نشد .(<(۰۵/۰p بر اساس نتایج بدست آمده تفاوت معنی داری بین غلظتهای مختلف۲,۴ - Dو kin از نظر درصد جنین زایی وجود داشت (>(۰۱/۰p بطوریکه حداکثر درصد جنین زایی سوماتیکی در ۵/۱ میلی گرم در لیتر۲,۴ - Dمشاهده شد .با افزایش مقدار kin از درصد جنین زایی سوماتیکی کاسته شد و بنابراین حداکثر درصد جنین زایی سوماتیکی در غلظت صفر kin مشاهده شد .اثر متقابل این دو هورمون بر درصد جنین زایی معنی دار نبود و نشان داد که هر کدام از این هورمونها بطور مستقل درصد جنین زایی سوماتیکی را تحت تاثیر قرار می دهند .اختلاف معنی داری بین غلظتهای مختلف۲,۴ - Dو kin از نظرتعداد جنین سوماتیکی تولیدی در هر تیمار وجود داشت (>(۰۱/۰p بطوریکه تعداد جنین سوماتیکی در تمامی تیمارهای حاوی۲,۴ - Dبطور معنی دار بیشتر از محیط کشت فاقد این هورمون بود .همچنین در غلظت صفر kin حداکثر تعداد جنین سوماتیکی مشاهده شد و با بکار گیری تیمارهای kin از تعداد جنین ها بطور معنی دار کاسته شد .(>(۰۱/۰p با توجه به نتایج حاصل به نظر می‌رسد که نیازهای هورمونی برای کالزایی از ریز نمونه های TCL هیپوکوتیل یونجه متفاوت از جنین زایی سوماتیکی می باشد همچنین برای القاء جنین زایی سوماتیکی از TCl نیازی به kin وجود نداشت و حداکثر جنین زایی سوماتیکی در غلظت ۵/۱ میلی گرم در لیتر۲,۴ - Dحاصل شد.
MS medium supplemented by GA3 (0/5 mg/l1-) for better growth and development of embryos. In all treatments, callus induction was 100 percent, so callus induction from hypocotyl TCLs was not affected by different concentrations of 2,4-D and kin. On the other hand, the effect of different concentrations of 2,4-D and kin as well as their interaction on callus diameter was not significant (p> 0.05) and callus growth was well performed independent of hormone combinations. Also number of embryos per callus was not affected by the type and concentrations hormones (p>0.05). Based on results obtained, significant difference between different concentrations of 2,4-D and kin embryogenesis was observed (p<0.01) so that the maximum percentage of somatic Embryogenesis occurred with 1.5 mg/l 2,4-D. With the increases of kin concentration, the percentage of somatic embryogenesis declined and the maximum percentage of somatic Embryogenesis was achieved in the media without kin. The interaction of these two hormones on percent Embryogenesis was not significant showing that each of these hormones independently affect percent Embryogenesis somatic. Significant difference between different concentrations of 2,4-D and kin on the number of somatic embryogenesis was seen in all treatments (p<0.05) and so the number of somatic embryogenesis in all treatments containing 2,4-D were significantly more than that in the medium without it. The maximum number of somatic embryo was observed in no kin and applying kin significantly reduced it (p <0.05). The results apperantly showed that hormonal requirements for callus induction from hypocotyl TCL are different from those for embryogenesis in alfalfa. In conclusion, for induction of somatic embryos from TCl of hypocotyls there is no need for excessive kin and the maximum somatic embryogenesis can be obtained in concentration of 1/5 mgl-1 2,4-D among the tested concentration. In addition, when small to medium-induced samples were transferred to call calluogenesis was well. The somatic embryogenesis in SH medium and plant regeneration medium BOi2Y occurred.╜ This research carried out for to evaluate of morphogenesis responses of thin cell layer (TCL) cultures from alfalfa (Medicago sativa cv. Kaysary) Hypocotyls to different concentrations of 2,4-D and kin. Sterile seeds were grown on SH medium. After a week Hypocotyl were cut to obtained TCL (0.1- 0.5 mm). Prepared TCLs were transferred to SH medium containing various combinations of 2,4-D and kin (0, 0.5 , 1, 1.5 and 2 mg/L) for callus induction. Produced callus were inocubated on medium Embryogenesis (2,4-D high and kin low) for onr week and then were transferred to BOi2Y medium. Finally calluses bearing embryos, were subculture to
Alfalfa
Callus induction
Embryogenesis
Hypocotyl
kin
Thin layer cell, 2,4-D
محمدی نسب، عامر
مطلبی آذر، علیرضا، استاد راهنما
موافقی،علی، استاد راهنمای همکار
دادپور، محمد رضا، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
