بررسی اسپکتروفتومتری فعالیت و پایداری آنزیم گزانتین اکسیداز در مخلوط حلالهای آلی- آبی
/فاطمه طاهرزاده
تبریز :دانشگاه تبریز، دانشکده شیمی ، گروه شیمی تجزیه
۵۶ص.
:جدول ،نمودار۳۰*۲۹س.م- +لوح فشرده
چاپی
واژه نامه بصورت زیرنویس
کتابنامه ص.:۵۱-۵۴
کارشناسی ارشد
شیمی
۱۳۸۵/۱۲/۲۵
تبریز :دانشگاه تبریز، دانشکده شیمی ، گروه شیمی تجزیه
امروزه کاربرد آنزیمها در انواع زمینه های زیستی و صنعتی بسیار گسترده است .از جمله عوامل موثر بر فعالیت آنزیمها، محیط انجام واکنش، بویژه نوع حلال میباشد .با توجه به برخی محدودیتها در استفاده از محیط آبی برای فعالیت آنزیمی، مطالعه فعالیت آنزیمی در محیط های غیرآبی مورد توجه ویژه ای قرار گیرد .گزانتین اکسیداز، یک آنزیم اکسیدوردوکتاز حاوی مولیبدن است که در متابولیسم ترکیبات متعددی، از جمله پورینها مشارکت دارد .علاوه بر این، امروزه بیوسنسورهای حاوی گزانتین اکسیداز بصورت تجارتی در بازار در دسترس میباشد .در تحقیق حاضر سعی شده است، تاثیر برخی از حلالهای آلی بر روی فعالیت و پایداری آنزیم گزانتین اکسیداز بررسی شده و به موازات این عمل، تاثیر دما و pH به عنوان عوامل عمومی موثر در فعالیت این آنزیم در کنار حلالهای آلی مورد مطالعه قرار گیرد .تاثیرات حلالها بر روی پارامترهای سینتیکی مورد بررسی قرار گرفته است .فعالیت این آنزیم در حضور حلالهای آلی کاهش و علیرغم کاهش فعالیت، این آنزیم پایداری خوبی در حضور حلالهای آلی از خود نشان داده است .با افزایش دما فعالیت آنزیم در غیاب حلالهای آلی افزایش یافته، ولی در حضور حلالهای آلی در الگوی کاهش فعالیت این آنزیم تغییر محسوسی مشاهده نشده است .و در بررسی تاثیر pHنیز نتیجه مشابهی حاصل گردیده است موثر در فعالیت آنزیم نیز در کنار اثر حلالهای بررسی شده است.نتایج حاصل از این تحقیق می تواند در عرصه های مختلف از جمله تهیه کیت های تشخیصی و بیوسنسورهای مبتنی برآنزیمXO مورد استفاده قرار گیرد.در تحقیق حاضر سعی شده است اثر برخی از حلالهای آلی برروی فعالیت و پایداریXO مورد مطالعه قرار گیرد.علاوه براین ،به موازات این بررسی ،اثر دماوpHنیز به عنوان عوامل عمومی موثر در فعالیت آنزیم نیز در کنار اثر حلالهای بررسی شده است.نتایج حاصل از این تحقیق می تواند در عرصه های مختلف از جمله تهیه کیت های تشخیصی و بیوسنسورهای مبتنی برآنزیمXO مورد استفاده قرار گیرد.در تحقیق حاضر سعی شده است اثر برخی از حلالهای آلی برروی فعالیت و پایداریXO مورد مطالعه قرار گیرد.علاوه براین ،به موازات این بررسی ،اثر دماوpHنیز به عنوان عوامل عمومی موثر در فعالیت آنزیم نیز در کنار اثر حلالهای بررسی شده است.نتایج حاصل از این تحقیق می تواند در عرصه های مختلف از جمله تهیه کیت های تشخیصی و بیوسنسورهای مبتنی برآنزیمXO مورد استفاده قرار گیرد.
Enzyme activity can be affected by the reaction media. The use of enzymes in hydro-organic/non-aqueous media has found variety of practical applications. Xanthine oxidase is a cytosolic enzyme capable of oxidizing a wide range of compounds. In the present study, xanthine oxidase activity in various hydro-organic mixtures has been investigated. Bovine milk xanthine oxidase was incubated with xanthine as substrate in Sorenson's phosphate buffer (pH 7.0 containing 0.1 mM EDTA) and the activity was determined spectrophotometrically in the absence and presence of different fractions of nine water -miscible organic solvents at 27 C to 50 C. Also the activity was determined spectrophotometrically in the absence and presence of different fractions of nine water-miscible organic solvents at pH=7 to pH=9. The effects of these solvents on enzymatic kinetic parameters were also studied. All studied organic solvents reduced the enzyme activity to a different extent. In spite of this inhibitory effect of the organic solvents on xanthine oxidase activity, the enzyme showed relatively a good stability in hydro-organic mixtures compared with the aqueous medium.The enzyme activity increased by raising the temperature and pH.