۲۳۶۴۰پ
per
مطالعه سمیت و القا آپاپتوز در رده ی سلولی NB۴ لوکمی میلویید حاد به وسیله ی ترکیبی از خانواده ی سیپروفلوکسازین
Study of cytotoxicity and apoptosis induction by a derivative from ciprofloxacin family in leukemia NB۴ cell line
/سلدا گهرخانی
: علوم طبیعی
، ۱۳۹۹
، کبیری
۷۱ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
زیست شناسی گرایش بیوشیمی
۱۳۹۹/۰۶/۳۰
تبریز
مقدمه :از آنجاییکه القاء آپاپتوز در سلول های سرطانی یکی از رویکرد های درمانی مؤثر برای درمان سرطان می باشد از این رو ترکیبات مختلفی برای القاء آپاپتوز و تمایز استفاده می شود .سیپروفلوکسازین ها هم از جمله ترکیباتی هستند که اثرات آنتی توموری آن ها تایید شده است .لذا در این پژوهش به بررسی تاثیرات ضد سرطانی و القاء آپاپتوز توسط یکی از مشتقات این خانواده به نامCP - ICHبر روی رده سلولی NB۴ به عنوان مدل آزمایشگاهی لوکمی پرومیلوئید حاد، پرداختیم .روش کار :این مطالعه از نوع مطالعات تجربی بر روی نمونه سلولی در قالب مطالعه In vitro طراحی و اجرا شد .نمونه مورد مطالعه شامل رده سلولی NB۴ لوکمی میلویید حاد بود .پس از کشت رده سلولیNB۴ ، تیمار سلول ها با استفاده از ترکیبCP - ICHدر غلظت های گوناگون آن انجام شد .برای بررسی اثر ترکیبCP - ICHبر رشد و زیستایی سلول هایNB۴ ، از آزمون MTT استفاده شد .از میکروسکوپ فلورسنس برای بررسی مورفولوژیکی آپاپتوز بهره گرفته شد .برای بررسی کمی آپاپتوز نیز از روش فلوسایتومتری و رنگ آمیزی Annexin V/PI استفاده شد .در نهایت، بیان سه ژن Bax, Bcl۲ ,Survivin از طریق تکنیکPCR - RTمورد بررسی قرار گرفت .نتایج :ترکیب مورد برسی ICH_CP بر روی رده سلولی NB۴ دارای اثرات سایتوتوکسیک بوده و سبب کاهش زیستایی آن ها شده بود که این تاثیر وابسته به غلظت و زمان بود .مطالعات صورت گرفته با استفاده از میکروسکوپ نوری نشان دهنده تغییرات ظاهری در سلول های تیمار شده با ترکیب ICH_CP بود .در ارزیابی با میکروسکوپ فلورسنس و رنگ آمیزی هوخست، هسته سلول های آپاپتوزی به واسطه متراکم شدن کروماتین و قطعه قطعه شدن هسته وتشکیل اجسام آپاپتوتیک به شکل نامنظم و به صورت نقاط آبی درخشان قابل مشاهده بود که بیانگر وقوع آپاپتوز می باشد .به دنبال استفاده ازICH_CP ، افزایش سطح بیان در هر دو ژنBax ، Bcl۲ و در مقابل، کاهش بیان Survivin در سلول های درمان شده با داروی مذکور قابل مشاهده بود .نتیجه گیری :تجویز ترکیب ICH_CP با سمیت و القای آپاپتوز در رده سلولی NB۴ لوکمی میلویید حاد همراه می شود که این اثر القائی با افزایش بیان ژن هایBax/Bcl - ۲و مهار بیان ژن Survivin همراه و در ارتباط خواهد بود
Background: Since induction of apoptosis in cancer cells is one of the most effective therapeutic approaches for cancer treatment, different combinations are used to induce apoptosis and differentiation. Ciprofloxacin is among the compounds whose antitumor effects have been confirmed. Therefore, in this study, we investigated the anti-cancer effects and induction of apoptosis by one of the derivatives of this family called ICH-CP on NB4 acute promyeloid leukemia cells. Methods: This study was designed and performed as an experimental study on a cell sample in an in vitro study. The study sample included NB4 cell line of acute myeloid leukemia. After culturing NB4 cell line, cells were treated using ICH-CP combination in various concentrations. MTT assay was used to evaluate the effect of ICH-CP combination on growth and bioavailability of NB4 cells. Fluorescence microscopy was used to examine the morpHology of apoptosis. Flow cytometry and Annexin V/PI staining were used to quantify apoptosis. Finally, the expression of three genes Bax and, Bcl2 and Survivin was examined by real tim-PCR. Results: Ciprofloxacin had cytotoxic effects on NB4 cell line and reduced their bioavailability, which was dependent on concentration and time. Studies using light microscopy showed apparent changes in cells treated with ICH_CP. Examination by fluorescence microscopy and Hoechst staining showed that the nucleus of apoptotic cells was due to chromatin condensation and fragmentation of the nucleus and the formation of irregular apoptotic bodies in the form of bright blue dots, indicating the occurrence of apoptosis. Following the use of ciprofloxacin an increase in the expression level in both Bax and, in contrast, a decrease in Survivin expression was observed in the cells treated with the drug. Conclusion: Ciprofloxacin administration is associated with toxicity and induction of apoptosis in NB4 acute myeloid leukemia cell line, which is associated with increased expression of Bax / Bcl-2 genes and inhibition of Survivin gene expression
Study of cytotoxicity and apoptosis induction by a derivative from ciprofloxacin family in leukemia NB۴ cell line
گهرخانی، سلدا
Goharkhani, Selda
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
