۲۳۴۰۲پ
per
ارزیابی مولکولی(بیان ژن های COL۱A۱ و (OPN و هیستوپاتولوژیک اثر باکتری کشته Mycobacterium obuense بر متاستاز سرطان پستان به بافت کبد در موش آزمایشگاهی BALB/c
Molecular (COL۱A۱ and OPN genes expression) and histopathological evaluations of heat-killed Mycobacterium obuense on liver metastasis of breast cancer in BALB/c mice
/علی اصغر فخری دمشقیه
: دامپزشکی
، ۱۳۹۹
، میرزائی
۵۷ص
چاپی - الکترونیکی
دکتری
دامپزشکی
۱۳۹۹/۰۷/۲۲
تبریز
مقدمه :سرطان بیماری است که در اثر اختلال در مکانیسم‌صهای کنترل رشد و تکثیر سلول‌صها ایجاد می‌شود .سرطان پستان یکی از مهم‌ترین و شایع‌ترین بیماری‌ها در زنان است که امکان بروز آن در مردان نیز وجود دارد .روش‌های درمانی که امروزه جهت درمان تومورهای پستانی استفاده می‌شود، شامل جراحی، پرتودرمانی، شیمی‌درمانی، هورمون تراپی و ایمنوتراپی می‌باشد .با توجه به اینکه در روش‌صهای جراحی، پرتودرمانی، شیمی‌درمانی و حتی هورمون تراپی، عوارض ناخواسته‌صای در فرد تحت درمان دیده می‌صشود و میزان موفقیت درمان را کاهش می‌صدهد، روش ایمنوتراپی با ترکیبات مختلف ایمنوژن به شکل ویژه‌صای مورد توجه پژوهشگران قرار گرفته است .در مطالعه حاضر، اثر باکتری کشته مایکوباکتریوم ابیوئنس (M.obuense) بر میزان متاستاز تومور پستانی به بافت ریه با روش‌صهای مولکولیPCR) - (qRTو هیستوپاتولوژی مورد بررسی قرار خواهد گرفت .مواد و روش‌ها :برای انجام این پژوهش، تعداد ۴۲ عدد موش BALB/c تهیه شد و موش‌صها به دو گروه اصلی سرطانی و غیرسرطانی تقسیم شدند .در ابتدا، قبل از انجام آزمایش اصلی، از آزمونdiphenyltetrazolium bromide) -۲,۵-yl)-۲-dimethylthiazol-(۴,۵- MTT (۳جهت ارزیابی سمیت سلولی دوزهای پائین و بالای باکتری استفاده شد .برای انجام این پژوهش، تعداد ۴۲ عدد موش BALB/c تهیه شد و موش‌صها به دو گروه اصلی سرطانی و غیرسرطانی تقسیم شدند .سپس، سرطان پستان با استفاده از سل لاین سرطان پستان بدخیم موشmouse breast cancer cell line)- ۴T۱ (۴T۱، در موش‌های گروه سرطانی القاء شد و ۱۰ روز بعد درمان آغاز شد .موش‌صهای سرطانی به چهار گروه۶ تایی شامل کنترل یک) موش‌صهای توموری و درمان با نرمال سالین استریل(، گروه کنترل دو) موش‌صهای سرطانی و درمان با داروی استاندارد تاکسول(، گروه درمان با دوز پایین باکتری) باکتری ( ۲ و گروه درمان با دوز بالای باکتری) باکتری ( ۵ تقسیم شدند .موش‌صهای غیرسرطانی نیز به سه گروه۶ صتایی شامل کنترل منفی) سالم با دریافت نرمال سالین(، گروه موش‌صهای غیرسرطانی با دریافت باکتری ۲ و گروه موش‌صهای غیرسرطانی با دریافت باکتری ۵ تقسیم شدند .درمآن‌های مختلف به مدت چهار هفته و در هر هفته دو بار انجام شد .در روزهای مختلف موش‌صها وزن‌صگیری شدند .در پایان مطالعه، موش‌صها یوتانیز شده و از توده توموری بعد از اندازه‌صگیری و بررسی ماکروسکوپی، جهت مطالعات مولکولی) ارزیابی بیان ژن‌صهای مربوط به متاستاز به نام‌صهای OPN و COL۱A۱ به روشTime PCR - Realانجام شد .همچنین به منظور انجام مطالعات هیستوپاتولوژی نمونه برداری بافتی از توده توموری) جهت بررسی میزان رشد تومور (و از بافت ریه) جهت بررسی متاستاز(، صورت گرفت .یافته‌ها :با توجه به یافته‌صهای حاضر، M. obuense رشد تومور را به صورت قابل صتوجهی سرکوب می‌صکند .عصاره ی M. obuense بیان ژن COL۱A۱ را به صورت قابل توجهی کاهش داد اما میزان بیان OPN کاهش محسوسی نشان نداد .عصاره‌صی M. obuense باعث کاهش میزان متاستاز و کاهش خاصیت تهاجمی سرطان پستان گردید .تجزیه و تحلیل یافته‌های آسیب شناسی نیز کاهش رشد تومور و کاهش متاستاز به کبد را در گروه‌صهای دریافت کننده Paclitaxel و عصاره‌صی باکتری کشته M. obuense مشخص کرد .نتیجه‌گیری :با توجه به نتایج مطالعه حاضر، به نظر می‌صرسد که باکتری کشته M. obuense بر رشد سلولی و رفتار متاستاتیک سلول‌صهای بدخیم سرطان پستان فعالیت اثرات ضد توموری دارد
Introduction: Cancer is a disease that disrupts intercellular relations and their order, disrupting vital and key genes. These molecular irregularities affect the cell division cycle and lead to the prevention of cell differentiation (Schottenfeld and Fraumeni, 2006). Breast cancer is one of the most important and prevalent diseases in women, which affects one in eight women, and unfortunately, causes more deaths than other cancers in women. Breast cancer is the most common cause of death in women between the ages of 33 and 55. Breast cancer is the most common cancer in humans after lung cancer (Romieu et al, 2006). In Iran, unfortunately, the incidence of breast cancer is increasing. In Iran, breast cancer is seen in younger women (at least a decade earlier than women in developed countries). Unfortunately, Iranian patients refer to medical care in advanced stages (Kaviani et al., 2010). Cancer cells in breast tissue can spread to the surrounding tissues and lymph nodes, which is called metastasis. Common sites of metastasis to this cancer are the lungs, bones, liver, and adrenal glands. The involvement of the brain, spleen, and pituitary gland is less common, but no organ is an exception. Metastasis may appear years after inhibition of the primary lesion (sometimes 15 years later) (Mohammadian et al., 2013). Therapies in use for treating breast cancer include surgery, radiation therapy, chemotherapy, hormone therapy, and immunotherapy. Since surgery, radiation therapy, chemotherapy, and even hormone therapy spawn unwanted side effects and complications reducing the rate of successful treatment of the patients, immunotherapy has received special attention from researchers. In the present study, the effect of killed bacterium Mycobacterium obuense on the rate of breast tumor metastasis to lung tissue was investigated by molecular methods (qRT-PCR) and histopathology. Methods and Materials: For this study, 42 BALB/c mice were prepared and the mice were divided into two main groups: cancerous and non-cancerous. Initially, breast cancer was induced in cancer mice using 4T1 (4T1-mouse breast cancer cell line), and treatment was started 10 days later. Cancerous mice were divided into four groups: control group 1 (tumor mice treated with sterile normal saline), control group 2 (cancer mice treated with standard taxol), low-dose bacterial treatment group (2 bacteria) and high dose bacterial treatment group (5 bacteria). Non-cancerous mice were also divided into three groups: negative control (healthy with normal saline intake), non-cancerous mice with 2 bacterial intake and non-cancerous mice with 5 bacterial intake. Different treatments were performed for four weeks twice a week. The mice were weighed on different days. At the end of the study, mice were euthanized and the tumor masses were sampled after being measured and macroscopically examined. For molecular studies, Real-Time PCR was performed. Histopathological studies were performed on tissue samples from tumor masses and liver tissue. Results: According to the present findings, M. obuense significantly suppresses tumor growth. M. obuense reduces the expression of Col1A1 significantly, but OPN expression levels was not significantly, altered, causing the reduction of metastasis. Analysis of pathological findings also approved tumor regression and the reduction of liver metastasis in the groups that received Paclitaxel and M. obuense. Conclusion: According to the results of the present study, it seems that the heat-killed M. obuense has antitumor activity on cell growth and metastatic behavior of breast cancer malignant cells
Molecular (COL۱A۱ and OPN genes expression) and histopathological evaluations of heat-killed Mycobacterium obuense on liver metastasis of breast cancer in BALB/c mice
فخری دمشقیه، علی اصغر
Fakhri Demeshghieh, Aliasghar
نفوذی، کتایون، استاد راهنما
خردادمهر، منیره، استاد راهنما
برادران، بهزاد، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
