۲۳۳۷۸پ
per
مطالعه بیان ژنTNF - در لکوسیت های گاوهای درگیر با کتوز تحت بالینی در دوره انتقال
Study of TNF- gene expression in leukocytes of cows involved with sub-clinical ketosis in transition period
/مژده ولائی
: دامپزشکی
، ۱۳۹۹
، راشدی
۸۱ص
چاپی - الکترونیکی
دکتری
دامپزشکی
۱۳۹۹/۰۶/۳۱
تبریز
بسیاری از مشکلات پس از زایش به دلیل مدیریت ضعیف در دوره انتقال می‌باشد .تشدید توازن منفی انرژی، بسیج چربی و در نهایت بالا رفتن سطح اجسام کتونی در جریان خون و مایعات خارج سلولی نقش مهمی را در بروز کتوز تحت بالینی، سندرم کبد چرب و عارضه جا به جایی شیردان دارد .توازن منفی شدید انرژی در دوره انتقال همچنین ممکن است احتمال بروز کتوز تحت بالینی را افزایش دهد .کتوز، یکی از بیماری‌های متابولیکی است که با افزایش غیرعادی غلظت اجسام کتونی در بافت‌ها یا مایعات ب‍ـدن مش‍ـخص می‌ش‍ـود .ای‍ـن بیماری اغلب در گاوهای شیری بروز کرده و در بیشتر کشورهایی که دامپروری به ش‍ـکل م‍ـتراکم انج‍ــام می‌ش‍ـود، مش‍ـاهده م‍ـی‌گردد .کتوز به شکل بالینی و تحت بالینی رخ می دهد، شکل تحت بالینی آن متداول‌تر بوده و از اهمیت اقتص‍ــادی بیش‍ـتری ن‍ـیز برخوردار است .هدف از این مطالعه بررسی میزان بیان ژنTNF در گاوهای مبتلا به کتوز تحت بالینی در دوره انتقال می‌باشد .این تحقیق در یک گاوداری با ظرفیت ۲۰۰۰ راس و ۹۰۰ رأس گاو دوشا انجام گرفت .پنج میلی لیتر خون از ۸۴ رأس گاو۴ - ۳شکم زاییده یک هفته قبل زایش و هفته اول و دوم بعد از زایش از ورید دمی اخذ شد .وزن گاوها بین۷۰۰ - ۶۵۰کیلو بود .ابتدا مقادیر HBA تمامی خون های گرفته شده در سه نوبت اندازه گیری شد گاوهایی که غلظت HBA بیشتر از ۲/۱ تا ۴/۱ میلی مول در لیتر باشد در گروه گاوهای درگیر با کتوز تحت بالینی و بقیه گاوصها در گروه گاوصهای سالم قرار گرفتند .نمونه های خون در موارد زیر مورد سنجش و ارزیابی قرار گرفتند .اندازه گیری متابولیت های خون شامل NEFA (:اسیدهای چرب غیر استریفیه(، گلوکز، آلبومین، توتال پروتئین، LDL،HDL ، کلسترول، تری گلیسرید، کلسیم ، فسفر و منیزیم با استفاده از کیت‌های تجاری و به وسیله دستگاه اسپکتروفتومتری انجام شد .همچنین اندازه گیری فعالیت آنزیم‌های خونی شامل :آلکالین فسفاتاز(ALP) ، گاما گلوتامیل ترانسفراز (GGT) با استفاده از کیت‌های تجاری و به وسیله دستگاه اسپکتروفتومتری انجام گرفت .برای بیان ژنTNF ، بعد از استخراج RNA، مرحله نسخه برداری معکوس و ساخت و تولید cDNA با استفاده از دستورالعمل کیت انجام پذیرفت .تکثیر ژن‌های مورد نظر برای اندازه گیری بیان ژن توسط واکنش Real time PCR بر اساس روش استاندارد به صورت نسبی انجام شد .همچنین در این مطالعه از ژن actin به عنوان ژن خانه دار استفاده شد .هدف این مطالعه بررسی اثر کتوز تحت بالینی روی بیان ژن TNF لکوسیت های گاوهای درگیر در دوره انتقال است .جمعیت مورد مطالعه شامل ۳۰ راس گاو گروه درمان درگیر کتوز تحت بالینی و ۶ گاو گروه کنترل بود .نتایج نشان داد کتوز تحت بالینی باعث افزایش بیان ژن TNF در گروه بیمار به میزان ۴/۰ ▒ ۵/۲ برابر بیشتر از بیان این ژن‌صها در گروه کنترل می-شود
Many postpartum problems are due to poor management during the transition period. Exacerbation of negative energy balance, fat mobilization, and ultimately, elevated levels of ketone bodies in the bloodstream and extracellular fluid, play an important role in the development of subclinical ketosis, fatty liver syndrome, and the complication of abomasal displacement . Severe negative energy balance during the transition period may also increase the risk of subclinical ketosis. Ketosis is a metabolic disease characterized by an abnormal increase in the concentration of ketone bodies in tissues or body fluids . The disease often occurs in dairy cows and it is observed in most countries where animal husbandry is done densely. Ketosis occurs both clinically and subclinically, its subclinical form is more common and has greater economic importance. The aim of this study is to evaluate the expression of TNF gene in cows with subclinical ketosis during the transition period. The study was conducted in a cattle ranch with a capacity of 2,000 head and 900 head of milch cows. 5 ml of blood was collected from 84 cows of 3-4 calves born one week before calving and in the first and second weeks after calving from the caudal vein . The cows weighted between 650 and 700 kg. First, the HBA levels of all blood samples were measured three times. Cows with a HBA concentration greater than 1.2 to 1.4 mmol / L were included in the group of cows with subclinical ketosis and the rest of the cows were in the group of healthy cows . Blood samples were measured and evaluated in the following cases . Measurement of blood metabolites, including: NEFA (non-esterified fatty acids), glucose, albumin, total protein, LDL, HDL, cholesterol, triglycerides, calcium, phosphorus and magnesium was done by using commercial kits performed by spectrophotometry . Also, the activity of blood enzymes, including: alkaline phosphatase, gamma glutamyl transferase, was measured by using commercial kits and spectrophotometry. To express the TNF gene, after RNA extraction, the reverse transcription step and cDNA fabrication were performed by using the kit instructions. Duplication of genes to measure gene expression by reaction Real time PCR was performed based on the standard method. Also in this study, actinB gene was used as a housekeeping gene. The aim of this study was to investigate the effect of subclinical ketosis on TNF gene expression in leukocytes of cows in transition period. The study population consisted of 30 cows in the treatment group with subclinical ketosis and 6 cows in the control group. The results showed that subclinical ketosis increased the expression of TNF gene in the patient group by 2.5 +- 0.4 times more than the expression of these genes in the control group
Study of TNF- gene expression in leukocytes of cows involved with sub-clinical ketosis in transition period
ولائی، مژده
Valaei, Mozhdeh
جعفری جوزانی، رضی‌الله، استاد راهنما
اکبری، حمید، استاد راهنما
جعفری خطایلو، یاسر، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
