اثرات نانو ذرات اکسید آهن بر بیان پروتئینصهای شوک حرارتی ۲۲ و ۲۵ در مغز جنین جوجه
keykavusi, kamran
/کامران کیکاوسی
: دامپزشکی
، ۱۳۹۸
، افشاری
۸۰ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
دامپزشکی
۱۳۹۸/۰۶/۱۷
تبریز
کاربردهای وسیع نانوذرات (NPs) موجب نگرانی در سطح جهان شده است زیرا ممکن است خطر سمیت آنصها در انسان و سایر موجودات وجود داشته باشد .نانوذرات اکسید آهن در کنار کاربردهای گوناگون میصتوانند در بافتصها مختلف تجمع یافته و اثرات سمی خود را از طریق القای استرس اکسیداتیو، تغییر در میتوکندری، اختلال در غشاها، آسیب بهDNA ، تغییر در چرخه سلولی، القای مرگ سلولی، اختلال در اسکلت سلولی و تغییر در میزان بیان ژنصها اعمال کنند .سلولصها به عوامل استرسصزای محیطی شامل دماهای بالا و پایین، مواد شیمیایی، آسیبصهای فیزیکی، اشعهصها با مکانیسمصهای مولکولی گستردهصای پاسخ میصدهند .در این میان پروتئینصهای شوک حرارتی (heat shock protein) از اجزای اصلی تشکیل دهنده سیستم سازگاری سلولصها با شرایط تنشصزای مختلف هستند .باوجود رواج روزافزون نانو ذرات اکسید آهن و کاربردهای آنها در سیستم های زیستی گزارشصهایی درباره بیان پروتئینهای شوک حرارتی کوچک در مغز مرغ و نیز در پاسخ به نانوذرات وجود ندارد .بنابراین مطالعه حاضر با هدف بررسی بیان پروتئینهای شوک حرارتی کوچک ۲۲و ۲۵ در مغز جنینهای مرغ در مواجهه با نانو ذرات اکسید آهن طراحی شد .به این منظور ۲۴۰ عدد تخممرغ نطفهصدار نژاد راس ۳۰۸ بهصورت تصادفی در ۸ گروه با ۳ تکرار قرار گرفتند .تیمارها شامل :تیمار :۱ کنترل منفی) بدون تزریق (تیمار :۲ کنترل مثبت) تزریق ۳/۰ میلی لیتر سرم فیزیولوژی(، تیمارهای ۳ تا :۵ تزریق ۳/۰ میلی لیتر از محلولNP - Fe۲O۳به ترتیب با غلظتصهایppm ۱۰۰ ، ppm ۲۵۰ وppm ۵۰۰، تیمارهای ۶ تا :۸ تزریق ۳/۰ میلی لیتر از محلولNP - Fe۳O۴به ترتیب با غلظت-هایppm ۱۰۰ ، ppm ۲۵۰ و ppm ۵۰۰بودند.تخم مرغصها در روز اول جنینی به روش In ovo تلقیح -شده و در دمای ۵/۳۷درجه سانتیگراد و رطوبت ۶۰ انکوبه شدند.پس از بررسیصهای مورفولوژیک در روز۲۰ ، نمونهصهای مغز در شرایط استریل و برای بررسی بیان ژنصهای HSP۲۲ و HSP۲۵ برداشت شدند .بیان ژنصهای مورد مطالعه به وسیله روش PCR در زمان حقیقی با استفاده از SYBR Green I و بر اساس روشCt - ۲بررسی شد .نتایج نشان داد که HSP۲۲ و HSP۲۵ در بافت مغز جنین مرغ بیان میصشوند و میزان بیان آنصها در پاسخ به مواجهه با اشکال مختلف نانوذرات اکسید آهن چقدر تغییر میصکند .همچنین بین اشکال مختلف نانوذرات اکسید آهن از نظر تأثیر بر بیان پروتئینصهای شوک حرارتی کوچک تفاوت وجود دارد .در کنار سایر فعالیتصهای بیولوژیکی که برای پروتئینصهای شوک حرارتی کوچک پیشنهاد شده است این مولکولصها در مکانیسمصهای پاسخ سلول به نانوذرات اکسید فلزی نیز دخالت دارند
The wider applications of nanoparticles (NPs) have evoked a world-wide concern due to their possible risk of toxicity in humans and other organisms. Iron oxide nanoparticles (IONs) can easily accumulate in different tissues and induce toxicity through induction of oxidative stress, mitochondrial changes, membrane disruption, DNA damage, cell cycle arrest, apoptosis, cytoskeletal disruption and gene expression alteration. Cells respond to various environmental stresses including high and low temperature, chemicals, physical damages and radiations via different molecular mechanisms. Heat shock proteins are among the main cellular system for adaptation with different stressful conditions. Despite the increasing relevance of IONs and their applications in biosystems there are no reports covering small heat shock proteins (sHSPs) expression in chicken brain and in response to NPs. Therefore, the current study conducted to evaluate the expression of HSP22 and HSP25 in the chickens embryo brain exposed to the IONs. Two hundred-forty Ross 308 embryonated eggs were randomly divided in eight groups with three repeats. Negative control group received nothings. The positive control group received 0.3 ml of normal saline. Groups 3-5 were administrated 0.3 ml of maghemite suspension with concentrations of 100 ppm, 250 ppm and500 ppm, respectively. Groups 6-8 received 0.3 ml of magnetite suspension with concentrations of 100 ppm, 250 ppm and500 ppm, respectively. Eggs were inoculated by In ovo method at day one of embryonic period and incubated at 37.5 C with 60 humidity. After morphological evaluation at day 20, the brains were harvested in sterile condition to evaluate the expression of HSP22 and HSP25. The expression level of target genes were analyzed using qPCR with SYBR Green I and 2-Ct method. The results showed that HSP22 and HSP25 are expressed in the chicken embryos brain and are upregulated in response to the different forms of IONs dose dependently. Also, various forms of IONPs have different effects on the sHSPs expression. Beside other biological functions, sHSPs are also involved in cell response to metal oxide NPs
keykavusi, kamran
کیکاوسی، کامران
The effects of iron oxide nano-particles on expression of heat shock proteins 22 and 25 in the brain of chickens embryo