کاهش آفلاتوکسین M۱ به وسیله مخلوط دیواره سلولی مخمرهای ساکارومایسس سروزیه و کاندیدا آلبیکانس تثبیت شده روی ذرات نانو بنتونیت به دام انداخته شده در ژل آلژینات
Reduction of Aflatoxin M۱ using mixture of Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans cell wall Immobilized on Nano Bentonite Particles Entrapped in Alginate Gel
/میثم بارسم
: کشاورزی
، ۱۳۹۸
، میرزائی
۹۵ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
علوم و مهندسی صنایع غذایی گرایش زیست فناوری مواد غذایی
۱۳۹۸/۰۵/۰۲
تبریز
مایکوتوکسینها متابولیتهای ثانویه قارچی هستند که برای رشد و تکثیر طبیعی قارچها ضروری نیستند .آفلاتوکسینصها از خطرناکترین مایکوتوکسینصها میصباشند که در خوراک دام و مواد غذایی یافت میصشوند و توسط گونهصهای مختلف آسپرژیلوس، از جمله آسپرژیلوس فلاووس، آسپرژیلوس پارازیتیکوس و آسپرژیلوس نومیوس تولید میصشوند و قادر به ایجاد تغییرات بیوشیمیایی، فیزیولوژیکی و آسیب شناختی بویژه سرطان در انسان و حیوانات هستند، بنابراین حذف یا کاهش این سموم بسیار ضروری میباشد .در سالهای اخیر روشهای مختلفی برای کاهش این سموم نظیر روشهای فیزیکی، شیمیایی استفاده شده که به علت تغییرات نامطلوب در ویژگیهای ارگانولپتیکی و ماهیت مواد غذایی مورد رغبت قرار گرفته نشده ولی در جدید ترین روش که روش بیولوژیکی میباشد این تغییرات نا مطلوب بسیار کمتر از روشهای دیگر بوده است .بنابراین هدف از این تحقیق کاهش آفلاتوکسین M۱ بوسیله مخلوط دیواره سلولی مخمرهای ساکارومایسس سروزیه و کاندیدا آلبیکانس تثبیت شده بر روی ذرات نانو بنتونیت به دام انداخته شده در ژل آلژینات میباشد .در این پژوهش، از روش ترکیبی شوک حرارتی-اولتراسوند، برای تخریب و جداسازی دیواره سلولی مخمرها استفاده شد .نتایج آزمون DLS و میکروسکوپ الکترونی روبشی نشان داد که اندازه اجزای دیواره سلولی مخمرها به طور میانگین ۹۵/۷۵ نانومتر بود، بنابراین روش تخریب و خردکردن سلولهای مخمر و کاهش اندازه آنها به میزان کمتر از ۱۰۰ نانومتر، موفقیت آمیز بوده .به منظور بهینه سازی غلظت نانو بنتنویت لازم برای تثبیت دیواره سلولی، از مقادیر،۳،۲،۱و ۴درصد نانو بنتونیت استفاده شد و نتیجه اندازهگیری قند به روش فنل-سولفوریک اسید نشان داد که غلظت ۴ درصد نانو بنتونیت بیشترین کارایی را برای تثبیت کردن داشت و حدود ۹۰ دیواره سلولی روی بستر تثبیت شد .در مرحله بعدی، دیوارههای سلولی تثبیت شده روی بستر نانو بنتنوئیت، در ماتریکس آلژینات کلسیم به دام انداخته شد .نتایج آزمونهای SEM و FTIR تثبیت دیوارههای سلولی در بستر نانو بنتونیت و به دام افتادن کمپلکس دیواره سلولی-نانو بنتونیت در دانههای آلژینات کلسیم را تایید کرد .نهایتا، تیمارهای مختلف شامل دیوارههای سلولی آزاد، دیوارههای سلولی تثبیت شده و به دام افتاده، آلژینات کلسیم و نانو بنتونیت خالص، با محلول آفلاتوکسین M۱ در دو زمان متفاوت ۱۵ دقیقه و ۲۴ ساعت تماس داده شدند و مقدار باقی مانده آفلاتوکسین توسط دستگاه HPLC اندازهگیری شد .نتایج حاصل نشان داد که تیمارهای مورد استفاده در این تحقیق ۵۴ تا ۹۲ درصد میزان آفلاتوکسین M۱ را کاهش دادند و بیشترین درصد کاهش آفلاتوکسین مربوط به استفاده از تیمار نانو بنتونیت خالص در ۱۵ دقیقه تماس بود
Mycotoxins are secondary fungal metabolites that are not essential for the growth and propagation of fungi. Aflatoxins are one of the most dangerous mycotoxins found in food and animal feeds and are produced by various species of Aspergillus, including Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus and Aspergillus numius and capable of biochemical changes. , Physiological and pathological, especially cancer, in humans and animals, so eliminating or reducing these pesticides is very necessary. In recent years, various methods have been used to reduce these toxins, such as physical and chemical methods, which are not due to undesirable changes in organoleptic characteristics and the nature of food, but in the most recent biological method, these adverse changes are much less Other methods have been used. Therefore, the purpose of this study was to reduce the aflatoxin M1 by mixing the cell wall of the yeasts of Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans fixed on nano bentonite particles trapped in alginate gel. In this study, a combination of thermal shock-ultrasound method was used to destroy and isolate the cell wall of yeasts. The results of the DLS test and scanning electron microscopy showed that the cell wall components of the yeast were 75.95 nm in average. Therefore, the destruction and crushing of yeast cells and the reduction of their size to less than 100 nm has been successful. In order to optimize the concentration of nano bentonite necessary for cell wall fixation, 1,2,3,4 of nano-benthonic acid content was used and the result of the measurement of sugar by phenol-sulfuric acid was that the concentration of 4 nano-bentonite had the highest efficiency for stabilization And about 90 of the cell wall was fixed on the bed. In the next step, the cell walls fixed on the nanobentovenite bed were trapped in calcium alginate matrix. The results of SEM and FTIR tests confirmed the stabilization of cell walls in the nanobentovenite bed and the trapping of the cell wall-nano-benthonic complex in calcium alginate grains. Finally, different treatments including free cell walls, fixed and trapped cell walls, calcium alginate and pure nano bentonite were contacted with aflatoxin M1 solution at two different times of 15 minutes and 24 hours and the remaining amount of aflatoxin by the device HPLC was measured. The results showed that the treatments used in this study reduced the amount of aflatoxin M1 to 54 to 92 percent, and the highest percentage of aflatoxin reduction was related to the use of pure nano bentonite treatment in 15 minutes of contact
Reduction of Aflatoxin M۱ using mixture of Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans cell wall Immobilized on Nano Bentonite Particles Entrapped in Alginate Gel