آپتاسنسور کونژوگه شده با نانوذرات تربیوم و گرافن کوانتوم دات برای شناسایی آفلاتوکسینM۱
Conjugation of aptasensor with nanoparticles (TbNPs (Terbium nanoparticles) and GQDs (Graphene quantum dot) for detection of aflatoxin M۱
/هومن خلفازاد کردشت
: دامپزشکی
، ۱۳۹۸
، میرزائی
۹۴ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناشی ارشد
دامپزشکی
۱۳۹۸/۰۴/۲۲
تبریز
آفلاتوکسین M۱ متابولیت هیدروکسیله شده آفلاتوکسین B۱ که در شیر یافت میشود .آفلاتوکسین M۱ یک مایکوتوکسین سمی است و برای سلامت سلامت انسان مضر است، پس شناسایی آن در بحث ایمنی مواد غذایی دارایی اهمیت زیادی است .در این تحقیق آپتاسنسور جدیدی برای شناسایی آفلاتوکسین M۱ طراحی شده استTerbium) -NH۲-chitosan/silica Nanospheres-Tb (graphene quantum dots-NH۲-۱-KCC-CS-. GQDsبر روی سطح الکترود با استفاده از تکنیک) CHA کرونوآمپرومتری (و) CV ولتامتری چرخهای (ترسیب گردید .سپس آپتامر مخصوص آفلاتوکسین M۱ بر روی سطح مهندسی شده با استفاده از قطرهگذاری تثبیت گردید .از اینرو آپتاسنسور تهیه شده با استفاده از تکنیک) DPV ولتامتری پالسی تفاضلی (حساسیت بالایی بار شناسایی آفلاتوکسین M۱ را دارد .آنالیزTb -NH۲-۱-KCC-CS- GQDsبه روشهای مختلفی مثل طیف سنج مادون قرمزIR)- (FT، روش تفرق دینامیک نور(DLS) ، پراش اشعه ایکس(XRD) ، میکروسکوپ های نیروی اتمی(AFM) ، میکروسکوپ الکترونی روبشی گسیل میدانیSEM) - (FEو طیفسنجی پراش انرژی پرتو ایکس (EDX) انجام گرفت .لازم به ذکر است مرفولوژی سطح الکترودهای مهندسی شده نیز با EDX وSEM - FEبررسی شد .برای اندازهگیری مساحت ویژه و چگالی ذرات بی ای تی (BET) استفاده گردید .نتایج بدست آمده نشان دهنده این است، که در شرایط بهینه، منحنی کالیبراسیون برای غلظتهای ۱/۰ میکرومولار تا ۰۰۰۰۰۰۰۱/۰ میکرومولار خطی است .لازم به ذکر است، که کمترین حد تشخیص (LLOQ) این حسگر ۱۰ فمتومولاراست .سمیت مواد مورد استفاده از استفاده از تست ام تی تی انجام گرفته است و نتایج زیست تخریب پذیر بودن آن را تایید میکند
AFM1 (aflatoxin M1) is hydroxyl metabolite of the AFB1 (aflatoxin B1) and that is found in some of the foods, such as the milk. AFM1 is superlative toxic mycotoxins and harmful for human healthy. So the detection of AFM1 is important for food safety. In the present work, a novel aptaassay was developed for monitoring of AFM1. GQDs-CS/KCC-1-NH2-Tb (graphene quantum dots chitosan/ Silica Nanospheres-NH2- Terbium) was electrodeposited on surface of GCE (glassy carbon electrode) by CV (cyclic voltammetry) and CHA (chronoamperometry) techniques and unique oligonucleotide AFM1 was immobilization on the engineered surface. Hence, a multilayer film was formed for highly sensitive quantitation of AFM1 using DPV (differential plus voltammetry) techniques. The morphology of GQDs-CS/KCC-1-NH2-Tb were investigated by FT-IR (Fourier-transform infrared spectroscopy), DLS (Dynamic light scattering), XRD (X-Ray Diffraction), AFM (Atomic force microscopy), FE-SEM (Field Emission Scanning Electron Microscopes) and EDX (Energy-dispersive X-ray spectroscopy). The surface morphology of the modified electrodes were characterized by FE-SEM and EDX. Based on the obtained results, The LLOQ of the developed aptasensor is 10 fM. The toxicity tests which performed by MTT assays, revealed the biocompatible nature of the produced Tb@KCC-NH2 fibrous material. Therefore, the engineered aptasensor was used for the detection of AFM1 in milk samples
Conjugation of aptasensor with nanoparticles (TbNPs (Terbium nanoparticles) and GQDs (Graphene quantum dot) for detection of aflatoxin M۱