اثر مقادیر مختلف نانو سلنیوم روی کیفیت اسپرم منجمد-ذوب شده در قوچ قزل
Effect of different levels of Nano Selenium on the quality of frozen-thawed sperm in Ghezel ram
/سحر ناطق کندرود
: کشاورزی
، ۱۳۹۷
، میرزائی
۸۲ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
علوم دامی گرایش فیزیولوژی دام
۱۳۹۷/۰۶/۱۸
تبریز
انجماد شاخهصای از علم کرایوبیولوژی است که به حفظ و نگهداری طولانی مدت سلول در دمای بسیار پایین میصپردازد .انجماد اسپرم به طور معمول در مراکز درمان ناباروری و بانکصهای نگهداری اسپرم و صنعت دامپروری انجام میصشود .اسپرم زمان محدودی در خارج از بدن و در دمای محیط میصتواند زنده بماند به این دلیل انجماد اسپرم بسیار حائز اهمیت است .یکی از عوامل مخرب تاثیرصگذار در کاهش مدت زمان نگهداری اسپرم، به وجود آمدنROS ها میصباشد که به مقدار کم لازم بوده ولی افزایش آن تاثیر مخربی بر روی اسپرم دارد .استفاده از موادی با خاصیت آنتی-اکسیدانی در محیط رقیقصکنندهصی اسپرم، برای مقابله با این گونهصهای اکسیژنی واکنشصپذیر نتایج بهتری داشته است .هدف از پژوهش حاضر، بررسی اثر افزودن غلظتصهای مختلف نانوسلنیوم (۱و ۲ میکروگرم در میلی لیتر (به رقیقصکنندهصی بر پایهصی تریس، زرده تخمصمرغ و فروکتوز همراه با ۷ درصد گلیسرول بر نگهداری طولانی مدت اسپرم منجمد قوچ میصباشد .برای انجام این تحقیق، ۴راس قوچ قزل بالغ انتخاب شده و اسپرمصگیری با واژن مصنوعی انجام گرفت از هر قوچ ۶ بار اسپرمصگیری در زمانصهای مختلف صورت گرفت .پس از ارزیابی اولیه منی و رقیق کردن با تیمارهای مورد مطالعه، بلافاصله در پایوتصهای ۲۵/۰ میلیصلیتری کشیده شد .از هر تیمار ۷ پایوت پر شد، سپس به مدت ۵/۱ ساعت در دمای ۵ درجه سانتیگراد یخچال نگهداری شد .در مرحله بعدی پایوتصها در فاصلهصی ۴ سانتیصمتری بالای سطح ازت قرار گرفت .پس از گذشت ۱۰ دقیقه بلافاصله در داخل ازت مایع غوطهصور شد .ارزیابی نمونهصها در روزهای صفر، ۱۵ و ۳۰ بعد از انجماد انجام گرفت .پس از یخصگشایی، تعیین ویژگیصهای حرکتی اسپرم، درصد اسپرمصهای زنده و مرده، درصد اسپرمصهای غیرصطبیعی وسلامت عملکرد غشا)تست (HOST با کمک میکروسکوپ نوری انجام شد .پراکسیداسیون لیپیدی غشای ( (MDAنمونهصها در روز ۳۰ یخصگشایی با استفاده از واکنش تیوباربیتوریکصاسید اندازهصگیری شد .دادهصهای به دست آمده توسط رویهصهای Glm و Mixed نرم افزار ۹.۱ SASآنالیز شدند و برای مقایسهصی میانگینصها از روش حداقل مربعات (Ls Means)استفاده شد .نتایج حاصل از این آزمایش نشان داد که رقیق کنندهصی حاوی سطوح ۱ و ۲ میکروگرم نانوسلنیوم در مقایسه با گروه شاهد، موجب بهبود معنیصداری در درصد تحرک کل، حرکت پیشرونده، زندهصمانی ودرصد اسپرمصهای با غشای سالم)هاست مثبت (و سلامت غشای آکروزوم شد .(۰۱/۰>P)همچنین نانوسلنیوم سبب کاهش معنیصدار اسپرمصهای با مورفولوژی غیر-طبیعی در طی ۳۰ روز انجماد شد .(۰۱/۰>P)همچنین نانوسلنیوم ۱ میکروگرم در میلیصلیتر نتایج بهتری نسبت به نانو سلنیوم ۲ میکروگرم در میلیصلیتر نیزداشت
Freezing is one branch of cryobiology knowledge that process to protecting and long term keeping of cell in very low temperature. Sperm freezing commonly done in infertility treatment centers and keeping sperm banks and livestock industry. Sperm can survive decrease out of body and environment temperature. freezing is so important one of influential destructive factors in reducing duration of sperm storage is creation of ROS. It needs very low, but it is increasing has destructive affects on sperm. Use of antioxidants in sperm extender have better results to deal with these reactive oxygen species. The aim of the present study was to investigate the effect of adding different concentration of the Nano-selenium (1 and 2g/ml) Tris-eggyolk-Fructose based diluents (with 7 Glycerol) on the long term preservation of frozen ram semen. For this purpose, sperm was collected with an artificial vagina from 4 selected adult Ghezel ram. After initial evaluation and treated, the semen was immediately aspirated to 0.25 ml freezing straw. 7 straws were filled separately with each treatment. After recording, treatments were packaged and refrigerated in 5C for 1.5 hours. Then, the packaged straw containing semen were placed on 4 cm above the liquid nitrogen, then were immersed in liquid nitrogen immediately after 10 minutes. Samples were evaluated performed at 0, 15 and 30 day, after frozen storage. After thawing the percentage viability of spermatozoa and abnormal morphology, motility, healthy membrane performance was measured, using a light microscope. Achived data obtained were analyzed by Glm and linear Mixed models using proc Mixed SAS 9.2 software and the Least square method (Ls means) was used for comparison the mean. The results showed that ram semen diluents containing 1 and 2 g Nano-se, comparison with control groups, significant improved motility, progressive motility, viability, sperm morphology, membrane health and acrosomal membrane health (p<0.01). According to the results, it appears that the addition of 1 and 2 g Nano-se to freezing ram semen diluent causes significant improvement in sperm parameters, such as sperm motility and viability. Also, Nano Selenium 1 g/ml had a better results than Nano Selenium 2 g/ml
Effect of different levels of Nano Selenium on the quality of frozen-thawed sperm in Ghezel ram