بررسی تأثیر رقیق کنندههای حاوی سیلیمارین بر روی ماندگاری اسپرم قوچ قزل
Investigation of the effect of silymarin-containing diluents on the Storage of Ghezel ram sperm
/مینا بهنام
: کشاورزی
، ۱۳۹۷
، میرزائی
۷۲ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
علوم دامی گرایش فیزیولوژی دام
۱۳۹۷/۰۶/۱۸
تبریز
در حال حاضر در کشورهای پیشرفته از تلقیح مصنوعی به عنوان یک روش علمی برای پیشرفت اهداف تولید مثلی و اصلاح نژاد در صنعت گاوداری و گوسفندداری استفاده میشود .در روند انجماد ممکن است تغییرات مخربی در سلول رخ دهد و سبب تنش اکسیداتیو شود .تنش اکسیداتیو در واقع عدم تعادل بین عوامل اکسیدکننده و مولکولهای آنتی اکسیدانی است که موجب افزایش تولید رادیکالهای آزاد و نقص در مولکولهای آنتی اکسیدانی مکانیسم دفاعی میشود .تنش اکسیداتیو در واقع به شرایطی گفته می شود که در آن رادیکالهای آزاد سبب آسیب به سلول میشوند .همین دلایل باعث شده که در فرآیند انجماد اسپرم از رقیقصصکنندههای مختلف حاوی آنتیصاکسیدان استفاده شود تا سلول اسپرم را در مقابل شوک سرمایی و آسیبهای دیگر محفاظت کند .هدف از این پژوهش بررسی اثر آنتی اکسیدانی سیلیمارین بر روی ماندگاری اسپرم منجمد قوچ قزل است .در این طرح از ۴ رأس قوچ قزل استفاده شد و اسپرمصگیری هفتهای دو بار با استفاده از واژن مصنوعی انجام گرفت .بعد از نمونهصگیری و انتقال نمونه به آزمایشگاه، نمونه از نظر عواملی همچون رنگ، حجم، تحرک موجی، درصد حرکت پیشصرونده و درجا، درصد زندهصمانی و ناهنجاری بررسی شد، سپس نمونه با رقیقصکنندهای که حاوی سیلیمارین میباشد (۵ و ۱۰ میکرو گرم بر میلی لیتر ( رقیق شده و بعد نمونهها داخل پایوتهای ۲۵/۰ میلیصلیتری کشیده شد .نمونه به مدت یک و نیم ساعت با دمای ۳۰ درجه سانتیگراد برای سردسازی به یخچال منتقل شده تا دمای نمونه به ۵ درجه سانتیگراد کاهش یابد .بعد از مرحله سردصسازی، پایوتها به مدت۱۰ - ۸دقیقه در فاصله۵ - ۴سانتی متری بخار ازت قرار شده و بعد از مدت مذکور پایوتها را به آرامی وارد ازت مایع میکنیم .یخ گشایی در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد انجام شدص .ارزیابی هایی که بعد از یخ گشایی انجام گرفت شامل تحرک اسپرم) حرکت پیش رونده و درجا(، درصد زندهصمانی، ناهنجاری، آزمایش سلامت آکروزوم بود که با کمک میکروسکوپ نوری انجام شد .دادهصهای بدست آمده توسط مدل خطی مختلط با استفاده از Proc Mixedنرم افزار SAS۹.۱آنالیز شدند و برای مقایسه میانگینصها از روش حداقل مربعات (LS Means) استفاده شد .نتایج حاصل از این آزمایش نشان داد که رقیق کننده با غلظت ۵ میکروگرم سیلیمارین در مقایسه با ۱۰ میکروگرم سیلیمارین موجب بهبودی معنیصداری در درصد تحرک و حرکت پیش رونده و زندهصمانی و سلامت غشای اکروزوم و تستصهاست اسپرم قوچ شد .(۰۱/۰>P) بیشترین میزان تولید۹۲/۰) MDA (۲۳۶/۰در سیلیمارین ۵میکروگرم و کمترین میزان۵۴/۰) MDA (۲۳۶/۰در سیلیمارین ۱۰میکروگرم مشاهده شد، ولی معنیصدار نبود .نتیجه نهایی : افزودن g/ml۵سیلیمارین به رقیق کننده انجماد اسپرم قوچ سبب بهبود پارامترهای کیفیتی اسپرم از جمله تحرک، زندهصمانی و سلامت غشای آکروزوم و ناهنجاری اسپرم پس از یخصگشایی میصشود
In advanced countries, artificial insemination is now used as a scientific method for the development of reproductive and breeding purposes in the dairy and sheep industry. In the process of freezing, destructive changes in the cell occur and cause oxidative stress. In fact, Oxidative stress is imbalance between oxidizing agents and antioxidant molecules, which increases the production of free radicals and defects in antioxidant molecules of the defense mechanism. Oxidative stress is in fact referred to as a condition in which free radicals cause damage to the cell. The same reasons have led to the use of different diluents containing antioxidants in the process of freezing sperm to protect the sperm cell from shock and other damages. The aim of this study was to investigate the antioxidant effect of silymarin on the viability of frozen spermatozoa. In this model, four Ghezel ram were used and twice weekly semen were performed by using artificial vagina. After sampling and transferring the specimen to the laboratory, the sample was examined for factors such as color, volume, motility, forward and inward movement percentages, viability and abnormality and followed by a diluent containing silymarin. (5 and 10 g / ml) were diluted and then the specimens were pulled in 0.25 milliliters. The sample was transferred to a refrigerator for one and a half hours to cool the temperature to 5 C. After the cooling step, the straws were placed in a nitrogen vapor for 10 to 8 minutes, and after that time, the Pythoes are slowly introduced into the liquid nitrogen. Thawing was performed at 37 C. The evaluations that took place after freezing included sperm motility (progressive and on-site movement), percentage of viability, abnormalities, acrosome health test, performed with light microscope. Data were analyzed by mixed linear model using Proc Mixed software SAS9.1. LS Means were used to compare the meanings. The results of this experiment showed that diluent with a concentration of 5 g of silymarin compared to 10 g of silymarin resulted in a significant improvement in the percentage of motility and progressive motility, and the survival and health of the acrosome membrane and the host test (0.01 > P). The highest amount of MDA production (0.29 0.236) in silymarin was 5 g and the lowest MDA (0.54 0.136) in silymarin 10 g, but not significant. Final result: Adding 5 g / ml of silymarin to a ram sperm freezing diluent improves sperm quality parameters including motility, health of the acrosome membrane and sperm motility
Investigation of the effect of silymarin-containing diluents on the Storage of Ghezel ram sperm