مطالعهی بیان ژنی ۳.۳.۱۴ در بافت ریهی رتهای نر بالغ مبتلا به هیپوتیروئیدیسم
Study of expression of ۱۴.۳.۳ protein gene in lung tissue in hypothyroidism male rats
/رعنا صفی زاده
: علوم طبیعی
، ۱۳۹۷
، راشدی
۱۱۵ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
فیزیولوژی جانوری
۱۳۹۷/۰۶/۱۹
تبریز
بیماریصهای تیروئید یکی از شایعصترین بیماریصهای عصر امروز میصباشد .هرگونه تولید ناصکافی هورمونصهای تیروئیدی منجر به ابتلای فرد به کمصکاری تیروئید میصگردد .از آنجایی که ریه به عنوان یکی از اصلیصترین بافتصهای هدف برای هورمونصهای تیروئید میصباشد .از اینصرو تغییرات مشخصی در عملکرد ریه در حالتصهای هیپوتیروئید و هیپرتیروئید رخ میصدهد .قبلا گزارش شدهاست که کمصکاری تیروئید میصتواند اثرات مخربی بر سیستم تنفسی بگذارد ۳.۳.۱۴ .یک خانواده از چاپرونصهای مولکولی اسیدی هستند که در بسیاری از سازوکارهای درونسلولی همصچون مسیرهای سیگنالینگ، آپوپتوز، چسبندگی و تکثیرسلولی دخیلاند .بدینترتیب در پژوهش حاضر نقش هورمون تیروئیدی بر بیان پروتئین ۳.۳.۱۴ در بافت ریه مورد بررسی قرار گرفت .مواد و روشصها :در این مطالعه ۳۰ سر رت نر بالغ نژاد ویستار با محدوده وزنی ۲۰۰ ۵۰گرم در ۳ گروه کنترل، مبتلا به هیپوتیروئید و درمان همراه تیروکسین دستهصبندی شدند .برای القای هیپوتیروئیدیسم ۲۰ رت به مدت ۸ هفته پروپیل تیواوراسیل (PTU) با غلظت ۵/۰ گرم در لیتر در آب آشامیدنی دریافت کردند ۱۰ .سر از این رتصها به مدت ۸ هفته داروی لووتیروکسین با غلظت ۲/۰ گرم در لیتر آب آشامیدنی دریافت کردند .در پایان دوره آزمایش، بعد از بیهوشی رتصها با زایلازین یک قسمت ثابت از ریه سمت راست در تمامی نمونهصها برش داده شد .برای بررسی بیان ژن هدف با استفاده از روشTime PCR- Real، ابتداRNA ی تام سلولی با استفاده از معرفplus - RNX استخراج گردید RNA .توسط واکنش رونویسی معکوس با پرایمر رندوم هگزامر به cDNAتبدیل شد .سپس سطح mRNA توسط آنالیز کمیTime PCR - Realسنجیده شد .نتایج :بر اساس محاسبات نرمصافزارSPSS ، بیان هر دو ایزوفرم پروتئین ۳.۳.۱۴ درگروه درمان نسبت به گروه کنترل) گروه دست نخورده(، افزایش معنیداری را نشان میصدهد .(P<۰.۰۵) در گروه هیپوتیروئیدیسم نسبت به گروه کنترل تغییر معنیداری مشاهده نمیشود .(P>۰.۰۵) نتیجهگیری :نتایج به دست آمده از این پژوهش نشان داد که تزریق اگزوژن هورمون صتیروئیدی منجر به تغییراتی در بیان ژنی ایزوفرمهای زتا و اپسیلون پروتئین ۳.۳.۱۴ میصگردد که بیانگر تاثیر هورمونصهای تیروئیدی بر بیان ژنی هر دو ایزوفرم پروتئین ۳.۳.۱۴ در سیستم تنفسی و نقش این ایزوفرمها در مسیر سیگنالینگ این هورمونها در سیستم تنفسی است
Introduction: Today, the thyroid disease is one of the most common diseases. The insufficient production of thyroid hormones lead to hypothyroidism. Since the lung is one of the main target tissues for thyroid hormones, There are marked (significant) changes in the function of the lung in hypothyroid and hyperthyroid states. It has previously been reported that hypothyroidism can have deleterious effects are induced through intracellular pathways and the changes in the expression gene lung tissue. 14.3.3 proteins are a family of molecular chaperones which are involved in many intracellular mechanisms such as signaling pathways, apoptosis, Cell adhesion and proliferation. In the present stydy, the role of hormone thyroid was investigated on gene expression in lung tissue. Materials and methods: In this study thirty Wistar adult male rat weighting 25050 g were divided into three groups control, hypothyroid and treatment (each ten). For induction of Hypothyroidism 20 rats received 6-Propyl-2-thiouracil (PTU) for 8 weeks in drinking water concentration of 0.05 grams per liter. Ten of these rats were received LevoThyroxin for 8 weeks at a concentration of 0.2 grams per liters of drinking water. At the end of the experiment after anesthesia of rats with Xylazine, a fixed portion of the lung was cut in all samples. To determine the target gene expression using Real-Time PCR total RNA was isolated by using RNX-plus reagent. RNA was Reverse transcribed, using a reverse transcription system with random hegzamer primer, then mRNA levels were analyzed by quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR). Results: Based on the SPSS software, the expression of both isoforms 14.3.3 protein in the treated with thyroxine group increased and compared to the control group(The group is intact), and since p<0.05, the change is significant in the two groups. There was nosignificant change in the hypothyroidism group compared to the control group (P>0.05). Conclusion: The results obtained from this study showed that exogenous injection of thyroid hormones leads to changes in expression of the zeta and epsilon isoforms 14.3.3 protein. These results indicates the effect of exogenous thyroid hormone on gene expression of both isoforms in the respiratory system and role of these isoforms in the signaling pathway thyroid hormones of respiratory system
Study of expression of ۱۴.۳.۳ protein gene in lung tissue in hypothyroidism male rats