۲۰۶۳۳پ
per
مقایسه اثر سرم اتولوگ بره و سرم جنین گاوی بر هم-کشتی سلول‌های اسپرماتوگونی با سلول‌های سرتولی بره‌های قزل
Comparison of autologous lamb serum and fetal bovine serum effect on Ghezel lambs spermatogonial cells co-culture with sertoli cells
/فریبا قربانی عوری
: کشاورزی
، ۱۳۹۷
، میرزائی
۸۶ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
علوم دامی گرایش فیزیولوژی دام
۱۳۹۷/۱۱/۱۴
تبریز
کشت و تکثیر سلول‌صهای اسپرماتوگونی در محیط آزمای‍ـشگاه م‍ـی‌صتوان‍ـد اطلاعات ارزنده‌صای از عملکرد این سلول‌صها و درک فرآیند اس‍ـپرماتوژنز در اختی‍ـار م‍ـا ق‍ـرار دهد .به علاوه این سلول‌صها منبع ارزشمندی برای آزم‍ـایش‌صه‍ـای بیولوژیک، پژوهش‌صهای پزشکی، فناوری‌صهای نوین دامی و اصلاح ژنتیک از طریق دستکاری سلول‌صهای زاینده فراهم می‌صکنند .س‍ـرم جنین گاوی(FBS) برای رشد تمامی سلول‌صها در کشت سلولی ض‍ـروری م‍ـی‌صباش‍ـد .ازآنج‍ـایی ک‍ـه ممک‍ـن اس‍ـت FBS واکنش‌صهای ایمونولوژیک را در حیوان گیرنده سلول تحریک کرده و یا باعث انتقال عوامل پاتوژنیک گردد، لذا اگر بتوان از سرم اتولوگ هر حیوان برای اهداف کشت سلول همان حیوان استفاده کرد نه تنها عوارض جانبی نخواهد داشت بلکه از نظر اقتصادی بسیار باصرفه خواهد بود .در این مطالعه جهت کشت سلول‌صهای اسپرماتوگونی، از بیضه بره‌صهای دو ماهه با روش TESE بیوپسی انجام داده و نمونه‌ها به آزمایشگاه منتقل شد .سپس سلول‌های اسپرماتوگونی با روش هضم آنزیمی دو مرحله‌ای استخراج و با استفاده از هم-کشتی با سلول‌های سرتولی در حضور درصدصهای مختلف سرم اتولوگ(۱ ، ۳ و ۱۰ درصد (کشت داده و تاثیر درصدصهای مختلف سرم اتولوگ بر روی تعداد و قطر کلونی‌صهای اسپرماتوگونی‌ص و میزان زنده‌صمانی این سلول‌صها بررسی شده و با گروه کنترل (۱۰ FBS) مقایسه گردید .تایید ماهیت سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی و سلول‌های سرتولی با استفاده از رنگ‌آمیزی ایمونوسیتوشیمی) PLZF برای سلول‌های اسپرماتوگونی (و ویمنتین) برای سلول‌های سرتولی (انجام گرفت .تعداد و مساحت سلول‌های کشت داده شده در روزهای۷ ، ۹ و ۱۱ ارزیابی شده و درصد زنده‌مانی سلول‌ها نیز با استفاده از رنگ‌آمیزی تریپان بلو مورد ارزیابی قرار گرفتند .داده‌ها با استفاده از نرم افزار SAS مورد آنالیز قرار گرفتند .نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که سرم اتولوگ خود بره می‌تواند به عنوان جایگزینی بهتر برای سرم جنین گاوی (FBS) بر روی میزان رشد سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی باشد و از طرف دیگر نگرانی‌های موجود در مورد انتقال بین گونه‌ای بیماری‌ها از طریق سرم نیز رفع خواهد شد
The culture and propagation of spermatogonium cells in the laboratory environment can provide valuable information on the function of these cells and the understanding of the process of spermatogenesis. In addition, these cells provide a valuable source of biological testing, medical research, modern animal technology and genetic modification through the administration of stem cells. The fetal bovine serum (FBS) is essential for the growth of all cells in cell cultures. Since FBS may stimulate immunological reactions in the animal's recipient cell or cause pathogenic pathogenesis, so if the animal's autologous serum can be used for the same animal's cell culture, it would not only have side effects, but also economically It will be very lucrative. In this study, spermatogonial cells were cultured from two-month lamb testis with biopsy TESE and transferred to the laboratory. Then, spermatogonial cells were extracted by two stage enzymatic digestion and cultured with sertoli cells in presence of different percentages of autologous (1, 3 and 10 ) serum, and the effect of different percentages of autologous serum on the number and The diameter of spermatogonial colonies and the viability of these cells were examined and compared with the control group (10 FBS). The confirmation of the nature of spermatogonial stem cells and sertoli cells was performed using the immunostimulatory staining of PLZF (for spermatogonial cells) and vimentin (for sertoli cells). The number and area of cultured cells were evaluated on days 7, 9 and 11, and the percentage of cells survival was evaluated using trypan blue staining. Data were analyzed using SAS software. The results of this study showed that self-lamb autologous serum could be a better substitute for fetal bovine serum (FBS) on the growth rate of spermatogonial stem cells, and, on the other hand, concerns over the transmission of certain diseases through the serum will also disappear
Comparison of autologous lamb serum and fetal bovine serum effect on Ghezel lambs spermatogonial cells co-culture with sertoli cells
قربانی عوری، فریبا
Ghorbani Ouri, Fariba
دقیق کیا، حسین، استاد راهنما
قاسمی پناهی، بابک، استاد راهنما
مقدم، غلامعلی، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
