شناسایی مولکولی آناپلاسما اوویس در نشخوارکنندگان کوچک استان آذربایجان شرقی
Molecular detection of Anaplasma ovis in small ruminants of East Azerbaijan province
/ظفر اکبرزاده
: دامپزشکی
، ۱۳۹۷
، میرزائی
۴۸ص
چاپی - الکترونیکی
دکتری
دامپزشکی
۱۳۹۷/۰۸/۰۱
تبریز
آناپلاسموزیس یک بیماری کنهصای است که در گوسفند و بز عمدتا توسط گونهصی آناپلاسما اویس ایجاد میصشود .این بیماری در گوسفند معمولا بدون نشانه بالینی است ولی در مواقع استرس میصتواند تبدیل به شکل بالینی بیماری نیز گردد .به دلیل اینکه این بیماری میصتواند موجب کاهش تولید شیر و گوشت دام گردد بنابراین از لحاظ اقتصادی نیز اهمیت فراوانی را دارا میصباشد .این مطالعه با هدف، بررسی میزان آلودگی به آناپلاسما اوویس در نشخوارکننگان کوچک استان آذربایجان شرقی با استفاده از واکنش زنجیرهصای پلیمراز آشیانهصایPCR) - (Nestedصورت گرفت .برای این منظور، از تعداد ۱۵۶ رأس گوسفند و بز ( ۱۱۶ رأس گوسفند و ۴۰ رأس بز ( به ظاهر سالم از مناطق مختلف استان آذربایجان شرقی به روش نمونهصگیری تصادفی ساده و با استفاده از لول ونوجکت حاوی ماد ضد انعقادK۲)- (EDTA، نمونه خون اخذ گردید .نمونهصهای خون جمعصآوری شده در کنار یخ قرار داده شدند و اطلاعات لازم از قبیل اسامی مناطق نمونهصبرداری، نوع دام، سن و جنس یادداشت گردید .سپس نمونهصها تحت شرایط انجماد در کمترین باز زمانی به دانشکده دامپزشکی دانشگاه تبریز منتقل گردیدند .نمونهصهای خون در فریزر C۲۰- تا انجام آزمایشات مولکولی نگهصداری شدند .سپس استخراج DNA با استفاده از کیت تجاری انجام و شناسایی موارد آلوده به آناپلاسما اویس با استفاده از تکثیر ژن MSP۴ در واکنش زنجیرهصای پلیمراز آشیانهصای انجام شد .داده های حاصل از واکنش زنجیرهصای پلیمراز به صورت آماری مقایسه شد تا ارتباط بین سن، جنس، گونه و محل نمونهصگیری با موارد مثبت آناپلاسما اویس مشخص شود .برای این منظور از روش آماری کای دو استفاده شد .دادهصها با استفاده از نرم افزارSPSS (SPSS, version ۲۲, IBM statistics ض USA) ,مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند و مقادیر P کمتر از ۰۵/۰ معنیصدار در نظر گرفته شد .بر اساس نتایج به دست آمده از واکنش هایPCR ، در این مطالعه از ۱۵۶ نمونه خون به دست آمده از گوسفندان و بزهای استان آذربایجان شرقی تعداد ۱۱ نمونه ( (۱/۷ از نظر وجود ژن MSP۴ مربوط به آناپلاسما اوویس مثبت بودند.تجزیه و تحلیل نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که هیچگونه رابطهصی معنی داری بین فاکتورصهای سن، جنس و گونه دام با میزان آلودگی با آناپلاسما اویس وجود نداشت .(<(۰۵/۰P همچنین در این مطالعه که از مناطق مختلف استان آذربایجان شرقی نمونه برداری شده بود، ارتباط معنیصداری بین محل نمونه گیری و میزان آلودگی به آناپلاسما اویس وجود نداشت .با وجود اینکه تفاوت معنی داری بین شهرهای مختلف نمونه برداری شده وجود نداشت، ولی میزان آلودگی در هشترود و چارویماق بیش از سایرین بود .با توجه به نتایج بدست آمده در این مطالعه مشخص شد که آلودگی به آناپلاسما اوویس در نشخوارکنندگان کوچک استان آذربایجان شرقی وجود دارد ولی میزان آن پایین است
Anaplasmosis is a Tick-born disease that is mainly caused in sheep and goats by Anaplasma ovis. The disease in sheep is usually without a clinical sign, but can also take a clinical form of the disease when the sheep is under stress. Because the disease can reduce the production of milk and meat, it is also economically important. The aim of this study was to evaluate the infection rate of Anaplasma ovis in small ruminant in East Azerbaijan Province using Nested-PCR. For this purpose, the blood sample were randomely collected from 156 healthy sheep and goats (116 sheep and 40 goats) from different regions of East Azerbaijan province. The collected blood samples were placed into the ice and necessary information such as names of sampling areas, livestock type, age and gender were recorded. The samples were then transferred to the Faculty of Veterinary Medicine, University of Tabriz under freezing conditions in the shortest time period. Blood samples were stored in a freezer at 20 C until molecular tests were performed. DNA extraction was done using a commercial kit and identification of the Anaplasma ovis infected cases was performed using MSP4 gene amplification in the polymerase chain reaction of the nest. Data from polymerase chain reaction were statistically compared to determine the relationship between age, sex, species and place of sampling with positive cases of Anaplasma ovis. Chi-square method was used for this purpose. Data were analyzed using SPSS software (SPSS version 22, IBM statistics, USA) and P values less than 0.05 were considered significant. In this study, based on the results of PCR reactions, from 156 blood samples of the sheep and goats in the East Azerbaijan province, 11 samples (7.1 ) were positive for Anaplasma ovis, and also positive for Msp4 gene. Analysis of the results of this study showed that there was no significant relationship between age, sex and livestock factors with Anaplasma ovis infection (P> 0.05). Also, in this study, which was sampled from different regions of East Azerbaijan, there was no significant relationship between sampling area and infection rate with Anaplasma ovis. Although there was no significant difference between the various sampled locations, the infection rates in Hashtrood and Charoymagh were higher than others. According to the results of this study, it was determined that the infection with Anaplasma ovis is present in the small ruminants of East Azerbaijan province, but its rate is low
Molecular detection of Anaplasma ovis in small ruminants of East Azerbaijan province