۱۹۶۴۶پ
per
شناسایی و غربال جدایه‌های اندوفیت گونه Trichoderma harzianium از میزبان‌های چوبی در جنگل‌های ارسباران و بررسی اثر بازدارندگی آنها روی قارچ Fusarium graminearum در شرایط آزمایشگاه
Identification and screening of Endophytic isolates of Trichoderma harzianum species from wooden hosts in Arasbaran forests and investigating their inhibitory effect on Fusarium graminearum in laboratory conditions
/زهرا اسمعلی‌پور
: کشاورزی
، ۱۳۹۷
، میرزائی
۹۸ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
گیاه‌پزشکی - بیماری‌شناسی گیاهی
۱۳۹۷/۰۶/۱۹
تبریز
بلایت فوزاریومی سنبله گندم (Fusarium Head Blight) یک بیماری قارچی ویران‌صکننده غلات است که به طور عمده توسط اعضای گونه Fusarium graminearum species complex ایجاد می‌صشود .بیماری بلایت فوزاریومی طی دوره گل‌صدهی، گندم‌صها را آلوده کرده و سبب کاهش شدید عملکرد محصول و پایین آمدن کیفیت دانه به دلیل تولید مایکوتوکسین‌صها می‌صشود .مدیریت بیماری مبتنی بر تلفیق روش‌صهای زراعی، شیمیایی و استفاده از ارقام مقاوم می‌صباشد .با توجه به عدم کارایی روش‌صهای رایج در مدیریت بیماری و اثرات زیست‌صمحیطی سوء ترکیبات شیمیایی، استفاده از روش‌صهای جایگزین در مدیریت بیماری قابل توجه می‌صباشد .کنترل بیولوژیکی می‌صتواند به عنوان یکی از روش‌صهای مبارزه در مدیریت تلفیقی، برای مبارزه با این بیماری مورد استفاده قرار گیرد .گونه‌صهایTrichoderma در میان اغلب قارچ‌صهای خاکزی جدا-سازی شده‌صاند و در اکوسیستم‌صهای ریشه گیاه وجود دارند .این قارچ‌صهای فرصت‌صطلب، همزیست‌صهای غیر بیماری‌صزای گیاهی هستند و به عنوان انگل و آنتاگونیست‌صهای بسیاری از قارچ‌صهای بیمارگر گیاهی عمل می-کنند، بنابراین از گیاهان در برابر بیماری محافظت می‌صکنند .امروزه توجه ویژه‌صای به استفاده از قارچ‌صهای اندوفیت در مدیریت بیماری‌صهای گیاهی معطوف گردیده است .جدایه‌صهای مختلفی از گونه‌صهای Trichoderma به عنوان اندوفیت از بافت‌صهای میزبان‌صهای گیاهی سالم جداسازی شده‌صاند .هدف تحقیق حاضر ارزیابی پتانسیل بازداندگی از رشد جدایه‌صهای اندوفیت T. harzianum روی قارچ F. graminearum در شرایط آزمایشگاه بود .در این تحقیق ۷۹ جدایه اندوفیت قارچ Trichoderma مورد بررسی و مطالعه قرار گرفت .جهت غربال جدایه‌صهای متعلق به گونه T. harzianum جفت آغازگر اختصاصی گونه، BR۱ و BR۲ مورد استفاده گردید .بدین ترتیب قطعه ۸۳۷ جفت بازی با DNA T. harzianumتکثیر داده شد و تعداد ۵۰ جدایه به عنوان گونه T. harzianum شناسایی گردیدند .بررسی تنوع درون‌صگونه‌صای گونه‌صهای کمپلکسT. harzianum ، با استفاده از نشانگر توالی‌صهای تکرار شونده ساده بینابینی Inter Simple Sequence Repeat (ISSR) انجام گردید .درصد چندصشکلی حاصل از تمامی باندهای ISSR ۸۶/۹۵ بود که نشان‌صدهنده‌صی وجود تنوع ژنتیکی بالا بین جمعیت جدایه‌صهای T. harzianum مورد بررسی می‌صباشد .دندروگرام حاصل از آنالیز UPGMA براساس ۲۳ باند تکثیر شده و طبق ضریب تشابه جاکارد، ۵۰ جدایه ی مورد مطالعه را در ۷ خوشه شاملG) - (Aدر ضریب تشابه ۰/۸۶ قرار داد و تشابه بین جدایه ها در محدوده‌صی ۳۹ تا ۱۰۰ درصد بود .قرارگیری جدایه‌صها در ۷ خوشه ذکر شده با میزبان آن‌صها در ارتباط نبود.در بررسی‌ص آزمایشگاهی قدرت آنتاگونیستی جدایه‌صهای T. harzianum بر علیه F. graminearum با استفاده از سه روش آزمون کشت متقابل، آزمون متابولیت‌صهای غیر فرار و آزمون متابولیت‌صهای فرار مطابق دنیس و وبستر انجام گردید .نتایج با استفاده از نرم افزار SPSS ورژن ۲/۲ مورد تجزیه‌صوصتحلیل آماری قرار گرفت .در آزمون بررسی قدرت آنتاگونیستی علیهF. graminearum ، در روش کشت متقابل و آزمون متابولیت‌صهای فرار، هر کدام از جدایه‌صهای متعلق به گونه T. harzianum مورد مطالعه، در مقایسه با شاهد، به طور معنی‌صداری در سطح احتمال یک درصد، باعث بازدارندگی و کاهش رشد پرگنه بیمارگر F. graminearum شدند .در آزمون کشت دوطرفه بیشترین درصد کنترل عامل بیماری ۷۳/۳ درصد، مربوط به جدایه HB۲۸ و کمترین میزان بازدارندگی از رشد میسلیوم قارچ عامل بیماری (F. graminearum) مربوط به جدایه HB۴۵ با ۲۱/۹ درصد مشخص گردید .طبق نتایج حاصل از آزمون متابولیت‌صهای محلول، بیشترین درصد بازدارندگی به ترتیب مربوط به جدایه‌صهایHB۸۴ ،ac۱- Na،Tr۵ ،۱a - VB۱با درصد بازدارندگی از رشد ۵۷/۵، ۳۹/۵۸، ۹/۱۶، ۳/۷۵ درصد مشاهده گردید .در آزمون ترکیبات فرار خارج‌صسلولی، بیشترین درصد بازدارندگی از رشد پرگنه قارچ عامل بیماری، ۵۴/۳۲ درصد، مربوط به جدایه Tricho و کمترین میزان بازدارندگی از رشد میسلیوم F. graminearum مربوط به جدایه۱a - VB۱با درصد ۹/۲۵ تعیین گردید
Disease of Fusarium Head Blight (FHB) is a destructive fungal disease affecting cereals which mainly is caused by members of F. graminearum species complex. FHB infects wheat during flowering stage, resulting in a severe reduction in yield and grain quality because secrete mycotoxines. Disease management is based on the combination of agronomic, chemical and resistant cultivars. Due to the inefficiency of commonly used methods in the management of the disease and the environmental impacts of chemical misuses, the use of alternative methods in disease management is significant. Biological control can be used in integrated pest management strategies to combat FHB disease. Trichoderma species have been isolated among most of soil-born fungi and are present in plant root ecosystems. These opportunistic fungi are non-pathogenic symbiosis and act as parasites and antagonists of many pathogenic fungi, protecting the plants from the diseases. Today, special attention has been paid to the use of endophytic fungi in plant disease management. Different isolates of Trichoderma species have been isolated as endophytes from tissues of healthy plant hosts. The purpose of this study was to evaluate the potential of the growth of T. harzianum endophyte isolates on F. graminearum fungi in laboratory conditions. In the current study, 79 isolates of Trichoderma endophyte isolates were studied. To screen the isolates belonging to the species T. harzianum was using T. harzianum specific primers (BR1 and BR2). The length of the sequences was 837 bp. Therefore, 50 isolates were identified as T. harzianum. Analysis of genetic diversity of T. harzianum isolates was conducted using inter-simple sequence repeat (ISSR) marker. Percentage of polymorphism derived from all ISSR bands was 86.95 suggesting the existence of high diversity within studied T. harzianum population. Dendrogram depicted by UPGMA analysis based on 23 amplified bands and according to Jaccard's similarity coefficient, grouped 50 T. harzianum isolates into seven clades (A-G) at the similarity coefficient approximately 0.86. The similarity among the isolates was in the range of 39 to 100 . The clustering of ISSR analysis indicated that there was not any correlation between the isolates and their host plants. The antagonistic ability of T. harzianum isoletes against F. graminearum was evaluated under in-vitro condition using dual culturemethod, volatile and non-volatile metabolite tests according to Denise and Webster. SPSS software (version 2.2) was used for statistical analysis. Results indicated that T. harzianum isolates could significantly decrease and inhibit mycelial growth of F. graminearum. Based on the results of dual culture test, the isolates HB28 and HB45 represented the highest and the lowest percent of mycelial growth inhibition of F. graminearum (73.3 and 21.9 , respectively). Based on the results of soluble metabolites test, the highest inhibition percent was related to the isolates HB84, Na-ac1, Tr5, and VB1-1a (57.5 , 39.58 , 9.16 , and 3.75 , respectively). Based on the results of volatile metabolites test, the highest and the lowest percent of colony growth inhibition was related to the isolate Tricho (54.32 ) and VB1-1a (9.25 ) respectively
Identification and screening of Endophytic isolates of Trichoderma harzianum species from wooden hosts in Arasbaran forests and investigating their inhibitory effect on Fusarium graminearum in laboratory conditions
اسمعلی‌پور، زهرا
Esmalipour, Zahra
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
