۱۸۸۵۷پ
per
اثر محیط شرایطی فیبروبلاستهای مرتبط با تومور (CAFs) بر تکثیر و مهاجرت رده سلولی سرطان کلورکتال تحت تیمار با اگزوزوم‌های مشتق از سلول‌های
/بابک جهانگیری
: علوم طبیعی
، ۱۳۹۵
، راشدی
چاپی
کارشناسی ارشد
ژنتیک
۱۳۹۵/۰۶/۲۰
تبریز
تومورهای جامد شامل تومورهای پروستات، پستان، کلون و غیره، بافت‌های بسیار پیچیده‌ای هستند که از زیر جمعیت‌های ناهمگون سلول‌های سرطانی و استرومای توموری که شامل انواع سلول‌های غیر تغییر یافته از جمله سلول‌صهای فیبروبلاست و سلول‌صهای بنیادی مزانشیمی (MSCs) هستند، تشکیل یافته است .درک بیشتر در مورد ارتباط متقابل بین سلول‌صهای استرومایی، فیبروبلاست‌ها و سلول‌صهای توموری منجر به یافتن استراتژی‌صهای مناسب در مدیریت بالینی انواع مختلف تومورهای جامد می‌صگردد .هدف از این تحقیق بررسی نقش محیط شرایطی فیبروبلاستهای مرتبط با سرطان (CAF) بر فعالیت تکثیری و مهاجرت رده سلولی سرطان کلورکتال (SW۴۸۰) تیمار شده با اگزوزوم‌صهای مشتق از سلول-های بنیادی مزانشیمی می‌صباشد .پس از انجام آزمونMTT ، سلول‌صهای SW۴۸۰ با غلظت g/ml ۱۵از اگزوزوم‌صها و محیط شرایطی CAF به‌تنهایی و همچنین هردو به‌صطور همزمان تیمار شدند و چرخه سلولی، فعالیت تکثیری و مهاجرت سلولی آنها مورد ارزیابی قرار گرفت .همچنین بیان برخی از ژن‌صهای محور mTOR شامل۲- Bcl،STAT۳ ، HK۲ ،۱۰۰ - miRو۱۴۳ - miRتوسط روشtime PCR - Realبررسی شدند .ارزیابی اثر اگزوزوم‌صهای مشتق از سلول‌صهای بنیادی مزانشیمی بر رده سلولی SW۴۸۰ با آزمون MTT مشخص کرد که در غلظت‌ص g/ml ۱۵اگزوزوم‌صها اثر کاهش‌دهنده تکثیر سلولی دارند .همچنین بررسی بیان ژنها نشان داد که این اثر میتواند از طریق انتقال۱۰۰ - miRو۱۴۳ - miRاگزوزومی به سلول‌صهای SW۴۸۰ و هدف قرار دادن ژن‌صهای به ترتیب mTOR و HK۲ اعمال صشود و در پی آن فعالیت ژن‌صهای پایین دست mTOR یعنی STAT۳ وBcl - ۲نیز کاهش می‌صیابد .تیمار اگزوزومی، چرخه سلولی را در مرحله G۱ مهار کرده و باعث کاهش چشمگیری در مرحله S/G۲M می-شود .تیمار سلول‌صهای SW۴۸۰ با محیط شرایطی CAF از طریق همین محور mTOR باعث افزایش تکثیر و مهاجرت سلولی شده و منجر به پیشبرد چرخه سلولی به سمتS/G۲M می‌صشود .در تیمار همزمان با محیط شرایطی CAF و اگزوزوم‌صها، اثر مهاری اگزوزوم‌صها بر تکثیر سلولی خنثی شده و فعالیت تکثیری و مهاجرتی سلول‌صهای SW۴۸۰ افزایش یافت .همچنین محیط شرایطی CAF با حذف اثر مهاری اگزوزوم‌صها بر مرحله G۱ در چرخه سلولیSW۴۸۰ ، باعث افزایش مرحله S/G۲M و پیشبرد تکثیر سلولی شدند .نتایج این تحقیق حاکی از آن است که اگزوزوم‌ها غنی از۱۰۰ - miRو۱۴۳ - miRبوده و می‌صتوانند باعث مهار تکثیر سلولی در رده سلولی SW۴۸۰ شوند .همچنین محیط شرایطی CAF قادر به افزایش چشمگیری در تکثیر سلولی می‌صباشد و میتوانند باعث خنثی کردن اثرات ضد تکثیری اگزوزوم‌صهای مشتق ازMSC - hBMشوند
Solid tumors are very complex tissues composed of heterogeneous subpopulations of cancer cell and tumor stroma, which is composed of many kinds of non-transformed cells such as fibroblasts, mesenchymal stem cells (MSCs). Better comprehension of interactions between stromal cells, fibroblasts and tumor cells will lead to finding better strategies in the clinical management of different solid tumors. The main purpose of this study is to investigate the effects of mesenchymal stem cell-derived exosomes on proliferation and migration of colorectal cancer cell line (SW480) treated with cancer-associated fibroblast (CAF) conditioned media (CM). After performing MTT assay, SW480 cells were treated with 15 g/ml of exosomes or CAF CM and also simultaneously treated with both. Proliferation, migration and cell cycle of treated SW480 cells were examined. In addition, some mTOR pathway genes, including Bcl-2, STAT3, HK2, miR-100, miR-143 expression was studied using real-time PCR. Analysis the effect of MSC-Derived exosomes on SW480 cells using MTT assay showed that 15g/ml of exosomes reduced the cell proliferation. The results of gene expression revealed that the anti-proliferative effects of the exosome can be exerted by transferring the miR-100 and miR-143 to SW480 cells via exosomes, and targeting the mTOR and HK2 genes, resulted in decreases the expression of downstream genes i.e. STAT3 and Bcl-2. Treated the cells with exosomes, lead to accumulate in the G1 phase and the decrease in S-phase of the cell cycle. Further treatment of cells with CAF CM culminated in increases the migration and proliferation and induced S and S/G2M phases entry. During simultaneous treatment with CAF-CM and exosomes, the inhibitory effect of exosomes was neutralized and proliferation and migration of SW480 cells were promoted. Furthermore, CAF-CM eliminated the inhibitory effects of exosomes on the G1 in SW480 cell cycle, leads to increasing in S/G2M population and promoting cell proliferation. The results of this study show that the exosomes are rich with miR-100 and miR-143 and they can inhibit the cell proliferation in SW480 cell line. Also, CAF-CM can significantly promote the cell proliferation and neutralize anti-proliferation effects of hBM-MSC-derived exosomes
جهانگیری، بابک
خلج کندری، محمد، استاد راهنما
باباشاه، مجید، استاد راهنما
صادقی زاده، مجید، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
